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台盼蓝(trypan blue)排斥实验一台盼蓝排斥法

台盼蓝染料不能透过活细胞正常完整的细胞膜,故活细胞不着色,但死亡细胞的细胞膜通透性增加,可使染料通过细胞膜进入细胞内,使死细胞着色呈蓝色。是最常用的检测细胞活率的方法。
实验材料
试剂、试剂盒
仪器、耗材
实验步骤
1.  将待染色细胞稀释至所需浓度。(方法及浓度范围与细胞计数相同) 

2.  每0.1 ml 细胞悬夜约加新鲜配置的染液一小滴,室温下染3~5 min 。

3.  染色过的细胞材料,取一滴细胞悬液置玻片上,加盖玻片后放在高倍镜下观察。

4.  死亡的细胞着浅蓝色并膨大,无光泽;活细胞不着色并保持正常形态,有光泽。计数100~200个白细胞。

5.  统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活力。 细胞活力(%)=未染色的细胞数/观察的细胞总数 × 100。
 
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注意事项
1.  染色时间不能太长,否则活细胞也会逐渐积累染料而染成颜色,使检测结果偏低。

2.  另可结合细胞计数方法,同时进行细胞计数和活力检测。