求助：血清白蛋白和IgG的分离纯化
2021-07-29
问题描述：
我有些问题向各位请教：
①在用超滤除白蛋白，IgG中硫酸铵盐时，膜包该如何选择？选择几个？
②如用凝胶过滤来分级纯化血清中65%硫酸铵盐析出的白蛋白和纯化33%硫酸铵盐析出的IgG，其填充介质应选择什么？其洗脱缓冲液应用什么好？
下面有些关于这方面的数据，供参考：
①牛血清白蛋白：分子量：66210；分子形状：椭圆形；分子大小：
40Å*140Å；等电点：4.7；血浆中的含量：52.0g/L。
②IgG:分子量：15300；分子形状：球状；等电点：5.8—7.3;血浆中含量：2.0g/L。
③另外，我从书上看到说：凝胶过滤在分级方法中分辨率为中等，但对脱盐效果优良；流速较低，对分级每周期约≥8小时，对脱盐仅30分钟；适用于大规模纯化的最后步骤，在纯化过程的任何阶段均可进行脱盐处理，尤其适用于两种缓冲液交替时。
期待您的帮助，谢谢您。
*请输入10-500个字符
已帮助
0人
0人
rockrr
用户
IgG:分子量：15300-- 153000?①在用超滤除白蛋白，IgG中硫酸铵盐时，膜包该如何选择？选择几个？总量1万毫升, 总蛋白含量2%左右, 超滤起始硫酸铵浓度低于15%, 两个中型膜包(3万-5万分子量), 作2-3次1:5-8倍稀释, 4-6小时完成.
已帮助
0人
0人
chromatography
用户白蛋白可以用蓝色琼脂糖凝胶亲和一步纯化,很好用,我们都用它专门去除白蛋白,你需要我可以把材料发给你,至于IgG可以用重组蛋白A琼脂糖凝胶一步纯化,很好用,当然你也可以考虑用疏水去纯化.白蛋白也可以用镍琼脂糖凝胶柱去纯化.
已帮助
0人
0人
jyp_1128
用户对不起，IgG分子量是153000，多谢rockrr了，您帮了我大忙。还有chromatography，我看了您的很多文章，很是佩服，我现在在做牛血蛋白的分离纯化，是生产规模的，每天要处理4吨的血，准备提取血红素，白蛋白，IgG3种产品，前面用盐析分级沉淀白蛋白和IgG，然后准备过一次层析柱精分离，在超滤除盐浓缩，最后在冻干成粉末。所以，关键在层析这部分，成本和得率都是我现在面临的问题，劳驾各位高手帮小弟出出主意，chromatography兄，我的邮箱是jyp_1128@eyou.com,多谢您的帮助。
▍
相关分类
▍
相关文章
