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活体成像两种检测技术介绍

活体成像

特点

优点

缺点

生物发光检测

bioluminescence

★荧光素酶(Luciferase)对基因、细胞和活体动物进行标记;

★荧光素酶催化底物(例如荧光素钾盐)反应后,会产生化学发光。这种光是由化学反应而来,不需要激发光;

★标记方法是通过克隆技术,将荧光素酶的基因插入到预期观察的细胞染色体内,通过对克隆细胞进行筛选,培养出能稳定表达荧光素酶的细胞株。再将细胞株转移至特定的小鼠体内形成模型。

★特异性强,无自发荧光;

★高灵敏度,在体内可检测到几百个细胞,检测的深度在3-100px;

★定量精确

 

★信号较弱,检测时间较长;★仪器精密度要求较高;

★细胞或基因需要转基因标记;

★不可用于人体,不适用于抗体、多肽等标记

荧光检测

fluorescence

★采用荧光报告基因 (GFP、RFP等) 或荧光染料进行标记;

★需要外接激发光源,利用报告基因、荧光蛋白质或染料产生的荧光,就可以形成体内的生物光源。

★荧光染料、蛋白标记能力强;

★信号强,成像速度快,操作简便,实验成本较低;

★未来可用于人;

★适用范围广,可以是动物、细胞、微生物,也可以是抗体、药物、纳米材料等。

★存在自发荧光,影响灵敏度;

★光容易被动物组织吸收;

★检测深度受限;

★背景光干扰,定量准确度低


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