转染操作流程：(瞬时转染方法) 转染效率（部分数据参考，本数据来源于网络，不作为售后投诉依据）
1. 接种细胞： 转染前一天，用胶原酶（WORTHINGTONG 公司 LS004196)消化细
胞并计数（不建议用胰酶）。调整细胞浓度，将细胞铺入细胞培养的器皿，每个孔置
入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到 70~80%。
2. 准备 DNA-PEI 复合物： DNA、PEI 试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其
升至室温。，用 Opti-MEM ITM（Invitrogen）或其他适合的无蛋白培养基稀释适
量 DNA。用同样的培养基稀释 PEI 试剂。每 1 μg DNA 需用 1-5 μL 线性 PEI 转
染试剂。一边轻轻涡旋装有 DNA 溶液 的试管，一边将稀释的线性 PEI 转染试剂滴
加至试管中（注意：请勿颠倒添加顺序）。充分混匀后，室温静置 10~25 min 以
形成 DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时，请用圆底聚丙烯管，例如 NEST 5 mL /14
mL 离心管。
3. 转染细胞： 直接向每个孔中加入 DNA-PEI 复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在
无血清条件下转染时，去除生长培养基，替换成无血清培养基，然后滴 DNA-PEI 复
合物。转染 3 h 后，添加½体积的包含 30%血清的生长培养基。
4. 孵育细胞和分析结果： 在 CO2 培养箱中 37℃下孵育细胞至可以分析检测。转
染后快 的话7 h 即可检测到转入基因的表达。 请自行确定适合检测时间。
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