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1．bigdye测序反应试剂盒 主要试剂是bigdye mix，内含pe专利四色荧光标记的ddntp和普通dntp，amplitaq dna polymerase fs，反应缓冲液等。2．pgem-3zf (+) 双链dna对照模板 0.2g/l，试剂盒配套试剂。3．m13(-21)引物 tgtaaaacgacggccagt，3.2μmol/l，即3.2pmol/μl，试剂盒配套试剂。4．dna测序模板 可以是pcr产物、单链dna和质粒dna等。模板浓度应调整在pcr反应时取量1μl为宜。本实验测定的质粒dna，浓度为0.2g/l，即200ng/μl。5．引物 需根据所要测定的dna片段设计正向或反向引物，配制成3.2μmol/l，即3.2pmol/μl。如重组质粒中含通用引物序列也可用通用引物，如m13(-21)引物，t7引物等。6．灭菌去离子水或三蒸水。7．0.2ml或和0.5ml的pcr管 盖体分离，pe公司产品。8．3mol/l 醋酸钠(ph5.2) 称取40.8g naac·3h2o溶于70ml蒸馏水中，冰醋酸调ph至5.2，定容至100ml，高压灭菌后分装。9．70%乙醇和无水乙醇。10．naac/乙醇混合液 取37.5ml无水乙醇和2.5ml 3mol/l naac混匀，室温可保存1年。11．pop 6测序胶 abi产品。12．模板抑制试剂(tsr) abi产品。13．10×电泳缓冲液 abi产品。14．abi prism 310型全自动dna测序仪。15．2400型或9600型pcr仪。16．台式冷冻高速离心机。17．台式高速离心机或袖珍离心机。向左转|向右转
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