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- Specification
- Product Description:
- This protein protein interaction antibody pair set comes with two antibodies to detect the protein-protein interaction, one against the AKT1 protein, and the other against the CDKN1A protein for use in in situ Proximity Ligation Assay. See Publication Reference below.
- Reactivity:
- Human
- Quality Control Testing:
- Protein protein interaction immunofluorescence result.
Representative image of Proximity Ligation Assay of protein-protein interactions between AKT1 and CDKN1A. HeLa cells were stained with anti-AKT1 rabbit purified polyclonal antibody 1:1200 and anti-CDKN1A mouse monoclonal antibody 1:50. Each red dot represents the detection of protein-protein interaction complex. The images were analyzed using an optimized freeware (BlobFinder) download from The Centre for Image Analysis at Uppsala University.
- Supplied Product:
- Antibody pair set content: 1. AKT1 rabbit purified polyclonal antibody (100 ug) 2. CDKN1A mouse monoclonal antibody (40 ug) *Reagents are sufficient for at least 30-50 assays using recommended protocols.
- Storage Instruction:
- Store reagents of the antibody pair set at -20°C or lower. Please aliquot to avoid repeated freeze thaw cycle. Reagents should be returned to -20°C storage immediately after use.
- MSDS:
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- Datasheet:
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- Publication Reference
- 1.
- An analysis of protein-protein interactions in cross-talk pathways reveals CRKL as a novel prognostic marker in hepatocellular carcinoma.Liu CH, Chen TC, Chau GY, Jan YH, Chen CH, Hsu CN, Lin KT, Juang YL, Lu PJ, Cheng HC, Chen MH, Chang CF, Ting YS, Kao CY, Hsiao M, Huang CY. Mol Cell Proteomics. 2013 Feb 8. [Epub ahead of print]
- Applications
- In situ Proximity Ligation Assay (Cell)
- Application Image
- In situ Proximity Ligation Assay (Cell)
- AKT1
- CDKN1A
- Gene Information
- Entrez GeneID:
- 207
- Gene Name:
- AKT1
- Gene Alias:
- AKT,MGC99656,PKB,PKB-ALPHA,PRKBA,RAC,RAC-ALPHA
- Gene Description:
- v-akt murine thymoma viral oncogene homolog 1
- Omim ID:
- 164730, 181500
- Gene Ontology:
- Hyperlink
- Gene Summary:
- The serine-threonine protein kinase encoded by the AKT1 gene is catalytically inactive in serum-starved primary and immortalized fibroblasts. AKT1 and the related AKT2 are activated by platelet-derived growth factor. The activation is rapid and specific, and it is abrogated by mutations in the pleckstrin homology domain of AKT1. It was shown that the activation occurs through phosphatidylinositol 3-kinase. In the developing nervous system AKT is a critical mediator of growth factor-induced neuronal survival. Survival factors can suppress apoptosis in a transcription-independent manner by activating the serine/threonine kinase AKT1, which then phosphorylates and inactivates components of the apoptotic machinery. Multiple alternatively spliced transcript variants have been found for this gene. [provided by RefSeq
- Other Designations:
- RAC-alpha serine/threonine-protein kinase,murine thymoma viral (v-akt) oncogene homolog-1,protein kinase B,rac protein kinase alpha
- Gene Information
- Entrez GeneID:
- 1026
- Gene Name:
- CDKN1A
- Gene Alias:
- CAP20,CDKN1,CIP1,MDA-6,P21,SDI1,WAF1,p21CIP1
- Gene Description:
- cyclin-dependent kinase inhibitor 1A (p21, Cip1)
- Omim ID:
- 116899
- Gene Ontology:
- Hyperlink
- Gene Summary:
- This gene encodes a potent cyclin-dependent kinase inhibitor. The encoded protein binds to and inhibits the activity of cyclin-CDK2 or -CDK4 complexes, and thus functions as a regulator of cell cycle progression at G1. The expression of this gene is tightly controlled by the tumor suppressor protein p53, through which this protein mediates the p53-dependent cell cycle G1 phase arrest in response to a variety of stress stimuli. This protein can interact with proliferating cell nuclear antigen (PCNA), a DNA polymerase accessory factor, and plays a regulatory role in S phase DNA replication and DNA damage repair. This protein was reported to be specifically cleaved by CASP3-like caspases, which thus leads to a dramatic activation of CDK2, and may be instrumental in the execution of apoptosis following caspase activation. Two alternatively spliced variants, which encode an identical protein, have been reported. [provided by RefSeq
- Other Designations:
- CDK-interaction protein 1,DNA synthesis inhibitor,OTTHUMP00000016298,cyclin-dependent kinase inhibitor 1A,melanoma differentiation associated protein 6,wild-type p53-activated fragment 1
- Interactome 1
- Interactome 2
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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
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2021-07-25
细胞纯化可根据其大小、密度、表面荷电、吸附能力或表面抗原的差异而采用密度梯度沉降法、细胞电泳、贴附、亲和层析、花环形成、补体介导杀伤溶解以及流式细胞仪（FCM）等方法来进行纯化。（来源：医学基础免疫学实验指导，主编金伯泉李恩善，第1 版，北京：世界图书出版社，1990） 查看更多
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2018-12-26
首先，它肯定不同于原代细胞系的，最大的区别，原代的心肌细胞基本不能分裂，而H9C2可以分裂，最大的区别了吧！原代心肌细胞会跳动，你的H9C2不会吧。虽然都是梭形的，但是H9C2来源于胚胎期心脏，而心肌细胞一般用新生大鼠分离获得。H9C2与原代心肌细胞有那么大区别，当然不能替代它，所以在研究 查看更多
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本实验来源「细胞实验指南」 黄培堂 等译。 查看更多
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2018-12-26
以兔软骨细胞为例：①一般根据实验要求，选取不同年龄组的兔子，实际上兔子的年龄越小越好，毕竟幼体组织的活力要高于成体组织的活力，耳静脉空气注射法处死后,无菌条件下分离后肢关节软骨和肋软骨，剥离包裹软骨组织的筋膜和软骨膜，放入盛有PBS液的培养皿中。②将分离得到的软骨组织剁碎成 查看更多
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2021-09-11
The wound healing assay allows the researcher to study cell migration and cell interactions. In some cases also single cell migration can be analyzed. This ass 查看更多
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2021-08-29
Put cryovial straight from storage and float in the 37篊 water bath- caution should be taken as on rare occasions vials can explode when heated up due to trappe 查看更多
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干细胞的分离纯化作者：裴雪涛,本实验来自「干细胞实验指南」 查看更多
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2018-12-26
The technique described here is a slight modification (March 1997) of methods presented in: Nagy A., J. Rossant. 1993. Production of completely ES cell-derived 查看更多
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2018-12-26
基因性状的其它检测方法1） 基因长度多态性（RFLP）检测在无DNA缺失，仅发生核苷酸改变性突变疾病时，往往出现酶切位点发生改变，通过RFLP分析可以显示出。设计一对适当引物，使被扩增的片段包含有某一个或数个多态性的限制性内切酶识别位点的序列。进行PCR后，用限制性内切酶酶切PCR产物；理论上 查看更多
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2021-08-21
Liposome Swelling AssayREFERENCES: Nikaido and Roseenberg (1983) J.Bact 153: 241-252; Yoshimura et al. (1983) J.Bact 258: 2308-2314.METHOD:6.2 µmoles of 查看更多
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2021-08-01
Applied StemCell Inc.（ASC）公司产品介绍【代理商代购现货】 查看更多
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2018-12-26
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商品咨询
肝星状细胞的分离、培养及鉴定123
123reserch2017-06-03
经过无数次的大鼠肝脏插针灌注，忍受过实验结果不理想的打击和折磨，今天终于成功了，特分享些相关图片以鼓励还在奋战中的网友们。
【求助】求小鼠睾丸支持细胞分离经验_问答详情_细胞分离_细胞...123
hxy00222013-08-20
各位前辈，我现在要分离小鼠睾丸支持细胞进行培养，但是做了三次都没有贴壁，不知道问题出在哪，**指导！！！
我的步骤：
1、16－22天小鼠颈椎脱臼法处死后，75%酒精浸泡30秒消毒，睾丸取出后置预冷PBS，40分钟（路上所需时间）后开始处理。
2、剔除白膜，剪碎睾丸。0.25%胰酶（含edta）1.5ml/个睾丸37°C消化30-50分钟，等体积DMEM/F12含10%FBS终止消化，1000r/MIN离心5分钟，弃上液。
3、加0.1%胶原酶消化30分钟，过200目网筛，1000r/MIN离心5分钟，弃上液。
4、DMEM/F12含10%FBS5ml重悬后转如培养瓶，入孵育箱37°C5%CO2培养。
请教各位，我到底是哪里有问题，是胰酶消化的时间长了吗？
我的步骤：
1、16－22天小鼠颈椎脱臼法处死后，75%酒精浸泡30秒消毒，睾丸取出后置预冷PBS，40分钟（路上所需时间）后开始处理。
2、剔除白膜，剪碎睾丸。0.25%胰酶（含edta）1.5ml/个睾丸37°C消化30-50分钟，等体积DMEM/F12含10%FBS终止消化，1000r/MIN离心5分钟，弃上液。
3、加0.1%胶原酶消化30分钟，过200目网筛，1000r/MIN离心5分钟，弃上液。
4、DMEM/F12含10%FBS5ml重悬后转如培养瓶，入孵育箱37°C5%CO2培养。
请教各位，我到底是哪里有问题，是胰酶消化的时间长了吗？
黄体化颗粒细胞分离培养 细胞生物学和信号转导版论坛123
young743612016-03-21
最近在做黄体化颗粒细胞分离培养，但是注射器吸取大卵泡液或者从下颗粒细胞离心时就会凝固成果冻状，大家有碰到过这样的事情么？已经好几次了，一直是这样，大家给支个招吧
原代肿瘤细胞的分离培养123
goodyezi2017-03-29
近期根据经验总结了原代肿瘤细胞分离培养的2个关键因素。
1、组织的活性：如果我们取的都是坏死的组织或者结缔组织，我相信任何方法都不可能分离出来活的细胞的。另外，取完的组织要冷藏存放，并且越早分离越好，最好在24h内，最久不要超过48h。
2、组织的消化：在组织消化前，组织剪的越碎越好（1mm3左右为宜），组织的大小决定了组织的消化时间，不同组织消化时间差别较大：例如肺癌在2h-2.5h；食管癌在1个多小时。
希望可以帮到各位研友，另外如果大家有更好的经验可以一起来讨论！
FicollPaque单个核细胞分离方法123
青霉素YY2016-11-28
刚买的分离液标本是人的为什么会有絮状物
人外周血单核细胞(PBMC)分离及培养123
baichimao2016-05-27
各位师兄师姐：
我近期负责的课题，需要进行人类血液淋巴细胞和DC细胞的分离和培养，但我在方面懂的不多，想求助这方面的大神们。后续我需要做RT-qPCR，western-blot、免疫荧光等实验，我应该去多少ml全血比较好？全血怎么保存？怎么进行分离？后续怎么培养和保存？
谢谢！
新生大鼠心肌细胞的分离和培养123
心sky2016-08-31
请大神前辈指点指点，已经研三了，实验很不顺利，再这样都要延期的节奏了。请问最近急性分离出来的大鼠心肌细胞很不耐钙，做膜片钳封接不上可能是什么原因造成的？谢谢了！
乳鼠心肌细胞分离步骤(最新整理) 123
dxy_g7kz4xfw2017-03-25
这两天实验需要分离乳鼠心肌细胞，操作了两次，但是效果都不好。细胞不贴壁，大量漂浮死亡。我是新手，也没有人指导，只能自己查文献摸索条件，想跟各位老师请教一下，争取早点培养成功。
大概步骤如下：c57小鼠大概六七只，酒精浸泡后不处死取出，迅速打开胸腔取出心脏放入冰PBS冲洗。待心脏取出完毕，冲洗移入有PBS青霉素小瓶中用眼科剪剪成较小组织块。
之后加入0.1％胰酶消化（之前浓度为0.25％，活细胞数量更少。）吹打1min.放入孵箱中3min.弃去上清，加入∥型胶原酶（0.1％）吹打10Min，放入孵箱15Min。取出后加入1ml胰酶。吹打1Min后加入含血清F12培养液终止消化，800转离心5Min。之后取沉淀重悬种板。90Min差速贴壁法纯化心肌细胞。
48h后只有少量（个位数）细胞贴壁，呈三角形。
第一次用0.25％胰酶时离心后有大量鼻涕样物质。
第二次胰酶浓度减小后没有，但细胞沉淀少，且为半透明微白。是不是离心时间不够。
感觉细胞整体状态都不好，几次都没有大量心肌细胞，更不用说观察到心肌细胞搏动。
老师们能不能帮忙分析一下是哪里的原因呢。
有没有比较稳定的小鼠乳鼠心肌细胞分离步骤呢。
希望大神快点出现。
大概步骤如下：c57小鼠大概六七只，酒精浸泡后不处死取出，迅速打开胸腔取出心脏放入冰PBS冲洗。待心脏取出完毕，冲洗移入有PBS青霉素小瓶中用眼科剪剪成较小组织块。
之后加入0.1％胰酶消化（之前浓度为0.25％，活细胞数量更少。）吹打1min.放入孵箱中3min.弃去上清，加入∥型胶原酶（0.1％）吹打10Min，放入孵箱15Min。取出后加入1ml胰酶。吹打1Min后加入含血清F12培养液终止消化，800转离心5Min。之后取沉淀重悬种板。90Min差速贴壁法纯化心肌细胞。
48h后只有少量（个位数）细胞贴壁，呈三角形。
第一次用0.25％胰酶时离心后有大量鼻涕样物质。
第二次胰酶浓度减小后没有，但细胞沉淀少，且为半透明微白。是不是离心时间不够。
感觉细胞整体状态都不好，几次都没有大量心肌细胞，更不用说观察到心肌细胞搏动。
老师们能不能帮忙分析一下是哪里的原因呢。
有没有比较稳定的小鼠乳鼠心肌细胞分离步骤呢。
希望大神快点出现。
毛囊细胞高效分离培养方法的建立123
涵602wei2016-10-09
细胞分离知识百科,细胞分离试验步骤,细胞分离说明书,细胞分离...123
blue66612017-05-09
前辈们好，近期老板布置任务需要分离小鼠肝脏细胞，查了好多文献，都没有写胶原酶的cat#,只写sigma订购，想请教下，是否有人做过，可以提供下货号和使用方法吗？十分感谢。另外，文中还提到digitonin，如果有一起用到的话麻烦帮我查看下，谢谢。
流式细胞仪细胞分选的操作步骤123
wangenjing2017-03-15
我做的临床试验，就想简单检测PBMC细胞的凋亡，上流式检测，有啥检测效果好的步骤推荐一下，谢谢
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