请使用支持JavaScript的浏览器! 线粒体膜电位(MMP)检测的具体步骤及方法_蚂蚁淘,【正品极速】生物医学科研用品轻松购|ebiomall -蚂蚁淘商城
当前位置: > 首页 > 技术文章 >
线粒体膜电位(MMP)检测的具体步骤及方法
来自 : mayitao

一、服务介绍

         大量的研究表明线粒体与细胞凋亡密切相关,其中线粒体跨膜电位(MMP)的下降,被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件之一。它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体跨膜电位崩溃,则细胞凋亡不可逆转。

二、实验原理

        JC-1是一种碳氰化合物类阳离子荧光染料,可作为检测线粒体跨膜电位指示剂。JC-1在细胞内以聚合体和单体两种不同的物理形式存在,分别处于不同的荧光发射峰。当JC-1浓度低或膜电位水平低时,主要以单体形式存在,激发波长为527nm,呈绿色荧光;当JC-1浓度升高或线粒体膜电位水平较高时,形成聚合物,发出红色的荧光,激发波长为590nm。当细胞发生凋亡时,线粒体跨膜电位被去极化,JC-1从线粒体内释放,红光强度减弱,以单体的形式存在于胞质内发绿色荧光,根椐这一特征就可以检测线粒体膜电位的变化。

三、实验流程

1.细胞培养

2.用适当的方法诱导细胞凋亡,同时设立阴性依照组合阳性对照组,收集细胞;

3.用PBS洗涤细胞三次,收集不多于1×106的细胞;

4.取100μL10×IncubationBuffer加900μL灭菌去离子水稀释成1×IncubationBuffer,混匀并预热至37℃;

5.吸取500μL1×IncubationBuffer,加入1μLJC-1,涡旋混匀配成JC-1工作液;

6.取500μLJC-1工作液将细胞均匀悬浮,37℃,5%CO2培养箱中孵育15~20min。

7.室温离心(2000rpm,5min)收集细胞,用1×IncubationBuffer洗两次;

8.吸取500μL10×IncubationBuffer重新悬浮细胞;

9.流式细胞仪检测,分析。

四、服务说明

1.客户提供:细胞株(冻存株或培养好的细胞),相关药品或MMP检测试剂盒(可代购)

2公司提供:实验步骤、结果图、数据结果和分析报告

3实验周期:1-2周,具体需要根据细胞生长情况及实验内容而定。

、质量承诺
       提供清晰的图片、可靠的分析结果。

免责声明 本文仅代表作者个人观点,与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实,对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺,请读者仅作参考,并请自行核实相关内容。
版权声明 未经蚂蚁淘授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的,应该授权范围内使用,并注明“来源:蚂蚁淘”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。
相关文章