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biosharp、QSP、Axygen、GEB、watson、Eppendorf移液器吸头,枪头

来自 : mayitao

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线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1）是一种以JC-1为荧光探针，快速灵敏地检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化的试剂盒，可以用于早期的细胞凋亡检测。
JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位△Ψm的理想荧光探针。可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。在线粒体膜电位较高时，JC-1聚集在线粒体的基质中，形成聚合物，可以产生红色荧光；在线粒体膜电位较低时，JC-1不能聚集在线粒体的基质中，此时JC-1为单体，可以产生绿色荧光。这样就可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体去极化的比例。
线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件。通过JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降，同时也可以用JC-1从红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。
JC-1单体的最大激发波长为515nm，最大发射波长为529nm；JC-1聚合物的最大激发波长为585nm，最大发射波长为590nm。实际观察时，使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的设置即可。

服务内容：

细胞培养。
流式线粒体膜电位检测。

服务流程：

细胞重悬于0.5mL细胞培养液中，细胞培养液中可以含血清和酚红。；
用适当的方法诱导细胞凋亡，同时设立阴性依照组合阳性对照组，收集细胞；
用PBS洗涤细胞三次，收集不多于1×10⁶的细胞；
加入0.5mLJC-1染色工作液，颠倒数次混匀。细胞培养箱中37℃孵育20分钟。
在孵育期间，按照每1mLJC-1染色缓冲液（5×）加入4mL蒸馏水的比例，配制适量的JC-1染色缓冲液（1×），并放置于冰浴。
37℃孵育结束后，600g4℃离心3～4分钟，沉淀细胞。弃上清，注意尽量不要吸除细胞。
用JC-1染色缓冲液（1×）洗涤2次：加入1mLJC-1染色缓冲液（1×）重悬细胞，600g4℃离心3～4分钟，沉淀细胞，弃上清。再加入1mLJC-1染色缓冲液（1×）重悬细胞，600g4℃离心3～4分钟，沉淀细胞，弃上清。
再用适量JC-1染色缓冲液（1×）重悬后，用流式细胞仪分析。