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点击量 348 更新于 2021-08-31
疏水作用层析(hydrophobic interaction chromatography, H I C )是蛋白质纯化技术中一个非常有价值的工具。 H I C 用于蛋白质纯化的规模很广泛—分析及制备规模均可。H I C 可用于去除溶液中存在的多种杂质,包括不需要的产品相关杂质。尤其 是 ,H i c 于去除产品巾的聚 合 讽 ,目 其 与 轉 财 特 性 不 H 般 可以有效去除。本章中,我 们 将 介 绍 H IC 基 顧 论 及 如 何 从 水 紐 巾 纯 化 蛋 白 质 。在理论背景前 提 下 ,
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点击量 318 更新于 2021-08-30
免 疫 球 蛋 白 M(IgM)和 免 疫 球 蛋 白 D(IgD) 的纯化的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。
免疫球蛋白 M(IgM)和免疫球蛋白 D(IgD) 的纯化 实验方法
点击量 318 更新于 2021-08-29
免 疫 球 蛋 白 M(IgM)和 免 疫 球 蛋 白 D(IgD) 的纯化的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。
蛋白质纯化所需的生物提取物制备的实验
点击量 326 更新于 2021-08-28
蛋白质组学和结构基因组学需要这种蛋白质提取方法, 它能够允许同时将几百个蛋白质在不同的载体和宿主的组合上进行筛选 (Stevensetal.,2001)。在这种多因素平行筛选 (multiparallelscreen) 中鉴定出来的能够正确折叠的表达水平高的最佳组合被放大到毫克级规模来生产,以便获得纯品进行功能和结构分析。这种高通量(high-throughout,HT) 的蛋白质表达和纯化策略加速了能够在微量和大量规模上高效裂解细胞和提取蛋白质的试剂及仪器的发展和优化。
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点击量 263 更新于 2021-08-27
从自然环境中分离和纯化噬菌体实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。<link rel="stylesheet" type="text/css" href="/ueditor/themes...
用蛋白质组学方法绘制磷酸化位点图谱
点击量 242 更新于 2021-08-26
分析磷酸化位点最常见的方法是用同位素(如 32P 或 33P) 来标记蛋白,但是内源 ATP 和 GTP 的存在会导致低效标记,而且放射性标记本身不能精确显示磷酸化位点,所以需要一种替代的方法。MS 正在逐步成为一种非放射性分析磷酸化的选择。[澳] 理查德 J. 辛普森 (Richard J.Simpson) 主编 何大澄 主译
显微镜维修吧
点击量 365 更新于 2021-08-25
RP-HPLC 越来越多地应用于蛋白质的分离,主要包括分析型和制备型。但如果要求纯化过的蛋白能够恢复活性并重新折叠为正确的三维结构,则不建议使用 RP-HPLC,因为许多蛋白在有机溶液中会发生不可逆变性。反相支持物(骨架)上的蛋白分析也会碰到低的回收率、畸形峰、「鬼峰(ghosting)」(即某个蛋白峰在进行下次色谱分析时虚假地再次出现)等问题。[澳] 理查德 J. 辛普森 (Richard J.Simpson) 主编 何大澄 主译
Life Technologies细胞结构产品(二)产品资讯
点击量 257 更新于 2021-08-23
纯化受体从概念上可以分成两步: 第一步用合适的去污剂将受体从膜中提取出来 (增溶); 第二步使用如常规的亲和标签、与该受体特异结合的配体层析柱、分子排阻色谱和其他方法纯化受体。最重要的是,必须注意选择实验条件以保持膜蛋白在整个纯化过程中处于活性状态。这一点怎么强调也不过分,因为很多 GPCR—旦被去污剂从质膜中提取出来就会变得不稳定。
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点击量 286 更新于 2021-08-22
膜蛋白在生物进程中具有关键性的作用。它们参与细胞与细胞之间、细胞与细胞基质 之 间 的 相 互 联 系 胞 器 及 细 胞 的 形 成 过 程 ,各种离子、代谢产物和蛋白质的跨质膜运辅 i,R N A 的跨核膜运输等。鉴于膜蛋白在多种细胞功能中的重要性,目前针对各种疾病的药物约有 5 0 % 都以其为靶点。作者: 伯吉斯等,主译:陈薇,本实验来自「蛋白质纯化指南」
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