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【求助】向各位前辈请教关于siRNA shRNA 质粒的问题
2021-07-21
问题描述:

这方面的新手还在看文献看帖学习阶段有个疑惑看到有的文章siRNA也会用到载体比如说pSUPERxx

Thecellsweretransientlytransfectedwith4mg(1:1)pSUPER.retroandpSilencer2.1-U6hygrovectors(vectorgroup),4mgHIF-1asiRNA-expressingplasmid(HIF-1asiRNAgroup),4mgVEGFsiRNA-expressing
plasmid(VEGFsiRNAgroup),or4mg(1:1)HIF-1asiRNA-andVEGFsiRNA-expressingplasmids(co-transfectiongroup)bytheLipofectamine2000(LF2K;Invitrogen,Carlsbad,CA)methodaccordingtothemanufacturer’sinstructions

但是我看各位前辈的说法
siRNA是化学合成的加发卡结构后shRNA才可以加载体构建质粒?然后可能在进一步构建病毒

为什么文章把siRNA插入到载体里面呢?我没理解错吧?它这种表述是不是有问题呢?
然后是构建了质粒载体之后可以再包装成病毒吗?那质粒载体可以直接用吗?

可能我表述的也不太清楚。。。希望有前辈简单回答!

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Fubio-GG
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psuper是表达载体。siRNA化学合成不需要添加载体。添加发卡结构则可以用作shRNA。构建到病毒载体上即可包装病毒。
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