肌酸激酶增高持续一年怎么治疗? 心血管
来自 : 蚂蚁淘
SmashandGrab
DavidAmberg
- Growcellsin3mlsselectivemediao/n.
- Pelletcellsby2quickspinsinamicrofuge.
- ResUSPendcellsin200ulofthefollowingsoln:
- 5mlSCE
- 60ul10mg/ml100TZymolyase
- 10ul2-ME
- Vortexandincat37¡Cfor30-60min.
- Add400ul0.2NNaOH/1%SDS,inverttomixandinc.onicefor5min.
- Add300ul3MK/5MOAcpH4.5,inverttomixandinconicex5min.
- Spin2mininmicrofuge,poursuperintoafreshtubeandrepeatspin.Remove500ultoafreshtube.
- Add300uliPrOH,vortexandletstandfor5min.atRT.
- PelletDNA5mininamicrofuge,thenwashpelletwith70%EtOHandrepeatspin.
- Drypelletinspeedvacandreconin25ulTE.
- Porate2ulintoelectrocompetentcoli,recoverandplateall.
- SCE:
- 1MSorbitol
- 0.1MSodiumCitratepH7.6
- 0.06MEDTA
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