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【求助】做流式前细胞破膜步骤 细胞技术讨论版
发布人 PoppyPoppyPoppy   发布时间 2017-12-22
求助：想用CD206标记抗体，但看说明书写的要破膜表达量才高，没做过破膜标记，请问应该怎么破膜标记抗体，详细步骤是什么？另外，破膜后不会影响细胞活性吗，不会让细胞死掉，流式细胞仪还能检测到吗？
小爱实验Tips:WB实验之大分子量蛋白转膜
发布人 meiling314   发布时间 2017-12-18
最近一直跑285KD分子量的蛋白，转膜条件是90V,90min,转完膜之后老是有180kd的Marker留了一点点在胶上，显影的时候285kd的条带就很弱很弱，求高手指点这是怎么回事？
怎么从血液离心中提取到白膜层 细胞技术讨论版论坛
发布人 绝对零度007   发布时间 2017-12-18
用缓冲液将血液转移入50ml离心管定容至45ml；400g室温离心5min后，去除上清；加入红细胞裂解液至45ml，翻转孵育8min；400g离心5min后去上清；重复裂解1次后，加入洗液至45ml，重悬细胞后计数。细胞400g离心5min后，去上清；所得细胞按107白细胞/20ul磁珠比例与Miltenyi磁珠混合，4℃孵育15min；将细胞悬液加入已润湿的LS柱，在强磁场作用下收集未吸附的CD45-细胞组份(含CTC)，用3ml洗涤液洗涤柱子,共洗涤3次。所收集的细胞经离心滴加于载玻片上，置...
小鼠MCAO手术造模步骤
发布人 芊洋   发布时间 2017-12-15
请问各位前辈们，如果我需要检测小鼠关于免疫方面的指标，是不是就不能用裸鼠造膜，用一般的小鼠就可以了吗？
WB转膜原理到底是什么？ 蛋白质和糖学
发布人 朵Doria朵   发布时间 2017-12-07
第一次做WB,两块胶，10%的和8%的，湿转1.5h，然后发展两张膜成了如图所示，好尴尬呀，请问有谁能解答一下问题出在哪里了么？
western blot 转移缓冲液的配方?
发布人 锦瑟华年725   发布时间 2017-11-27
我在网上看到有两种关于转膜缓冲液的配方。第一种是：10×转缓（储液）：30.3gTris，144.1g甘氨酸，调pH到8.3并用去离子水定容至1L，用的时候取100mL，稀释10倍。另外一种是：1×转缓（现配现用）：3.03gTris，14.4g甘氨酸，200mL甲醇，用去离子水定容至1L，不调pH。想请教一下各位，这两种配方哪种更好一些？谢谢！
求助western blot转膜不成功 蛋白质和糖学技术讨论版论坛
发布人 chloechenyx   发布时间 2017-11-26
第一次做wb。转膜完发现膜上用丽春红完全染不出条带也没有Marker的带转膜液还混了第二天看底下有白色絮状物但是用的是学姐前几天配的转膜液。配制上应该没有问题看滤纸的边缘有黄色类似条带的颜色是转反了吗？还有查丁香园上还有可能是转过头我们200mA90min这样会转过头吗转完的时候看过膜上是没有任何条带了。
大鼠脊髓BDNF转膜条件 蛋白质和糖学技术讨论版 专业医生社区...
发布人 我了路哦哦哦   发布时间 2017-11-26
最近在做BDNF的WB，条件一直摸不好，有没有大神分享一下转膜的电流和时间，万分感谢
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