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来自 : mayitao
| 实验材料 | 转染的细胞 | 试剂、试剂盒 | PBSTriton裂解液β-半乳糖苷酶反应 缓冲液光发射加速液 | 仪器、耗材 | 细胞刮子绘图仪发光计计数器 | 实验步骤 | 1. 用PBS分别洗涤两次60mm培养皿中的转染β-半乳糖苷酶表达质粒的细胞及模拟转染的细胞。 2. 加入250μlTriton裂解液，用一橡胶细胞刮子将细胞刮下来。将细胞提取物转移至1个1.5ml微量离心管中。在4℃以最大速度离心2min，将上清转移至一个干净的微量离心管中。 3. 在一只发光计的测试管中加2~20μl细胞提取液。再加200μlβ-半乳糖苷酶反应缓冲液，在室温下温育60min。 4. 将测试管放入发光计中，注人300μl光发射加速液。注入后等2~5s，然后测定5s。 |
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