求助如何避免提动物组织蛋白质研磨过程中起泡

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2021-08-04

问题描述：

动物组织块冻存在液氮，取出后放到1.5mlEP管中，EP管中加入RIPA裂解液（按照0.1mg组织最多1ml裂解液的体积使用，用前已加入PMSF），使用电动组织研磨器研磨，每次研磨时间10秒左右，研磨过程中发现蛋白质起泡，就像做蛋糕时鸡蛋被打出泡一样。请问如何避免这种情况？

PS，本来试着在冰上操作，但是电动组织研磨器工作时EP管震动的很厉害，没法放在冰上。

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将计就计哈哈

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再次加入少量的PMSF泡泡会少很多

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早孕有反应

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我想问一下你用这个电动研磨器不会产热比较多吗效果可以吗我也想提组织蛋白不敢用电动组织研磨器呢

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tianxiaokun

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@早孕有反应早孕兄弟你好，我觉得你担心的很有道理，怕是电动研磨器在研磨的过程中产热，影响蛋白。

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羲和羲羲和

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之前用过钢珠的研磨仪，时间很快的，一般1-2min吧，所以产热也不会很多啊，我们用之前还把固定EP管的器材提前放进-80℃冻了一下下，就几分钟，不敢冻太久，反正磨好了没什么温度，起泡的，没管，打磨过程必然会起泡吧，静置之后，选了一些没磨好的继续磨，然后就把打磨液吸出来就算好了。

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claire樱奈

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早孕有反应我想问一下你用这个电动研磨器不会产热比较多吗效果可以吗我也想提组织蛋白不敢用电动组织研磨器呢还可以，能提出蛋白的

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朗朗健康

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展开引用claire樱奈动物组织块冻存在液氮，取出后放到1.5mlEP管中，EP管中加入RIPA裂解液（按照0.1mg组织最多1ml裂解液的体积使用，用前已加入PMSF），使用电动组织研磨器研磨，每次研磨时间10秒左右，研磨过程中发现蛋白质起泡，就像做蛋糕时鸡蛋被打出泡一样。请问如何避免这种情况？PS，本来试着在冰上操作，但是电动组织研磨器工作时EP管震动的很厉害，没法放在冰上。......前辈您好，我也刚准备组织提蛋白，用正常组织预实验出现类似您提到过的情况，最后您怎么处理呢？

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突金塔6

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朗朗健康前辈您好，我也刚准备组织提蛋白，用正常组织预实验出现类似您提到过的情况，最后您怎么处理呢？同问～你们提取组织蛋白的时候是直接加裂解液然后匀浆离心抽上清么？有没有超声之类的步骤啊？

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