液氮冷冻研磨必要性
在分子生物学实验中,动物的肌肉组织、结缔组织、骨组织、毛发组织等,植物的根、茎、叶、种子等均需磨碎,进而对其成分、基因与蛋白质及结构和功能进行研究。
冷冻组织研磨仪为了使各种组织成分在研磨过程中不易被破坏或降解,又为了使组织变硬、脆性增加,从而易于磨碎,特别是有关核糖核酸(RNA)、脱氧核糖核酸(DNA)的研磨分离提取。需要先将生物材料放置到液氮中快速冷冻,终止细胞内外一切生物反应,同时生物材料细胞完全冻硬、脆化,这样研磨可以达到很好的破胞效果,将细胞磨成粉,使里边的物质释放出来。
可研磨样本
·◇植物组织:根、茎、叶、花、果、种子等
·◇动物组织:大脑、心脏、肺、胃、肝脏、胸腺、肾脏、肠、淋巴结、肌肉、骨骼等
·◇木材、种子、致密的土壤和沙土等
·◇真菌细菌:酵母、大肠杆菌、孢子等
·◇古老干燥的样本、铁锈等
·◇整个昆虫、藻类、珊瑚乳液等
液氮冷冻研磨步骤
1.将组织样本分装到合适的离心管内。
2.在离心管内添加适量裂解介质
3.将离心拧紧盖子,本插入冷冻适配器中。
4.使用专用适配器夹具,将冷冻适配器整体放置到液氮中,3-15分钟。
5.再使用专用适配器夹具,将冷冻适配器整体放置取出,放置到Gd16plus研磨仪,并拧紧固定手柄。
6.设置研磨速度和时间,启动Gd16plus研磨仪
7.研磨仪停止后,取出冷冻适配器,并取出离心管。
注意事项
1.液态氮在常压时的温度相当的低,使用液态氮时须额外注意,避免与皮肤的直接接触。
2.将冷冻适配器放置到液氮中和从液氮中取出,需使用专用适配器夹具进行,并佩戴防冻手套