
【求助】超声粉碎细胞
2021-08-12
问题描述:
我要用超声粉碎293细胞纯化蛋白,目前碰到的困难是文献中使用的超声是1.5min,22%-24%amplitute。但是我这样做了以后有2个不好的结果,一个是时间长了液体都发烫,虽然我已经放在冰上,第二个问题是有很多泡沫。结果蛋白浓度很低。
我想请教下怎么避免这种情况。还有就是我用的仪器和文献中的不一样,那可以完全采用上述条件吗,还是应该根据不同的机器进行不同的转换后再超声。谢谢了!
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lichunmei111


一般都是超声3S停10s,不能连续超声,中间不停的,最后超声的时间到你所需要的就可以了,比如你超声1.5min,就是需要重复3s停10s这个程序30次。而且超声的头子尽量深入溶液底部,但是不能碰到管壁。

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laforet


开0.5s停0.5s的间断超声效果比较好,泡沫很少

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shirong_ye


现在细胞粉碎的设备很多,现在最常用的是高压细胞破碎法,破碎率和温度控制都已经非常成熟用得最多的主要是:APV,NIRO,ATS,AVESTIN,MFIC等,现在国内这方面应用非常多

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herooff


我之前都用超声波清洗机低功率超声用15毫升离心管,效果还不错

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appleb


放在冰水中,不要放在冰上
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