非特异性酯酶染色
| 实验方法原理 | NAE将α－乙酸萘酚水解，产生α－萘酚，再与重氮盐偶联，生成不溶性的有色沉淀位于胞质中。 | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| 试剂、试剂盒 | 磷酸盐缓冲液α－乙酸萘酚加重氮盐甲基绿水港派 实验步骤 | 一、实验试剂： 1.作用液：l／20mol／L 磷酸盐缓冲液（PH7.4）40mg加10g／Lα－乙酸萘酚（以50％丙酮做溶剂）0.8ml，充分振荡，直至最初产生的混浊物大部分消失为止，加重氮盐，（坚牢蓝B或其他种均可）40mg振荡，过滤后使用． 2.1g／L甲基绿水港派 二、实验操作： l.固定新鲜涂片置10％甲醛生理盐水固定5min 2.流水冲洗5min 3.加入37℃作用液中1小时 4.水洗 5.lg/L甲基绿水溶液复染5min 6.水洗，干后镜检． NaF抑制试验：方法同上，在40ml作用液中加入氟化钠（NaF）6mg（每毫升作用液加NaF－l.5mg），若阳性明显减弱或呈阴性，示被NaF抑制最好能计算NaF抑制率，其公式为： （加NaF后NSE积分值/未加NaF时的NSE积分值）×100％凡抑制率＞50％者，提示确受NaF所抑．四.实验判定结果：细胞质内有灰黑色或棕黑色弥漫性或颗粒状沉淀为阳性，胞质内无沉淀者为阴性． 其他 | 1.标本必须新鲜，应于取材后两天内染色，否则酶的活性显著降低．若冰箱内保存，可适当延长保存时间． 2.重氮盐的选择，以坚固蓝B．坚固蓝RR及坚固黑B重氮盐的染色为好． |
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发布于 ： 2021-09-01
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