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细胞膜完整性及膜转运功能检测实验——HoechstPI染色法资讯分析...
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实验步骤1. 主要试剂的配制碘化丙锭贮存液:100 μg/ml,4℃ 避光保存。Hoechst 33258 贮存液:100 μg/ml,4℃ 避光保存。2. 操作流程2.1 常规制备单细胞悬液(方法同 PI 染色法),加入 Hoechst 33258 溶液,使其终浓度为 1 μg/ml,37℃ 孵育 7 min,离心后弃染液,用PBS重悬。2.2 加入 PI 染液,使其终浓度为 5 μg/ml,置冰块上片刻,离心弃染液,用 PBS 洗 1 次后,即可上机检测,紫外激光记录 400~500 nm 处蓝色荧光和 630 nm 处红色荧光。3. 结果观察正常对照细胞呈弱蓝色及弱红色荧光,凋亡细胞呈蓝色及弱红色荧光,死亡细胞呈强红色及弱蓝色荧光。展开 ......阅读全文


流式细胞仪实验方法

一、实验准备1. 标本制备:2. zui小化非特异性结合:二、凋亡1.凋亡的检测方法:网站和其它2.PI染色法3.Annexin V 法4.TUNNEL法三、细胞因子1.激活的细胞因子2.CBA四、血小板


组织学研究方法

(一)一般光学显微镜术应用一般光学显微镜(简称光镜)观察组织切片是组织学研究的最基本方法。取动物或人体的新鲜组织块,先用固定剂(fixative)固定(fixation),使组织中的蛋白质迅速凝固,防止细胞自溶和组织腐败。常用的固定剂如洒精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化锇等,一般常将几种固定剂配制成混


流式细胞仪之细胞凋亡检测的PI双染色法

流式细胞仪是检测悬浮的单细胞或微粒的信号分析技术,被誉为实验室的“CT”,可用于细胞凋亡检测、细胞分选、单细胞内细胞因子表达分析等。这里简单介绍下流式细胞仪检测细胞凋亡的两种方法。第一部分流式细胞仪检测细胞凋亡:Heochst 33342/PI双染色法一、基本原理


流式细胞仪实验方法-1

流式细胞仪实验方法一、实验准备1. 标本制备:2. zui小化非特异性结合:二、凋亡1.凋亡的检测方法:和其它2.PI染色法3.Annexin V 法4.TUNNEL法三、细胞因子1.激活的细胞因子2.C


细胞培养污染的途径、危害及预防措施(二)

3 生物性污染的来源、危害及预防 外界的微生物如昆虫、节肢动物、原虫、霉菌、病毒、细菌、无细胞壁的微生物(通常指支原体)和其它类型的细胞都可能侵入培养环境引起污染。只要在一个开放的环境中进行培养,都难以避免发生污染。发生污染的可能性取决于操作方法、培养室的无菌环境以及实验室的规章制度。生物性污染对细


流式细胞术在血液学中的应用

DNA倍体分析及细胞周期分析 在细胞周期内,DNA含量随细胞内时相发生周期性变化,正常情况下,大多数细胞处于休止期(Go), G1期细胞虽有DNA合成,但DNA含量仍为2N,为二倍体细胞,;处于活跃的DNA合成期(S期)的细胞DNA含量为2N-4N;正经历细胞分裂(G2/M期)的细胞


细胞活力检测方法

细胞活性是判断体外培养细胞在某些条件下是否能正常生长的重要指标,如药物处理、放射性或紫外线照射、培养条件变化等。细胞活性检测方法有很多种,如台盼蓝染色法、克隆(集落)形成法、、ATP含量测定法、荧光染色法、比色法(MTT法)等。一、ATP含量测定法---生物发光检测有研究表明内源性三磷酸腺苷 (AT


检测细胞凋亡的实验方法比较

◆ TUNEL 与 ELISA 检测凋亡的方法比较TUNEL法 细胞凋亡中, 染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3 -OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3


FCM对外周白细胞的免疫荧光分析

外周血是临床检验中的重要标本。FCM分析外周白细胞的主要目的是了解各种白细胞的数目与分群情况。这些数字的变化与临床的某些疾病有一定的关系。近年来,由于多种识别白细胞膜表面抗原的单克隆抗体的发现,以及对这些单克隆抗体的直接或间接荧光标记物的出现,使得利用FCM的荧光组织化学分析获得被测细胞的多指标的更


FCM对外周白细胞的免疫荧光分析

外周血是临床检验中的重要标本。FCM分析外周白细胞的主要目的是了解各种白细胞的数目与分群情况。这些数字的变化与临床的某些疾病有一定的关系。近年来,由于多种识别白细胞膜表面抗原的单克隆抗体的发现,以及对这些单克隆抗体的直接或间接荧光标记物的出现,使得利用FCM的荧光组织化学分析获得被测细胞的多指标的更


体液学检查进展

随着基础医学深入研究,高新科技检测技术在检验医学的广泛应用,使国内血液各项检查项目水平明显提高,但相比之下,先进的技术及方法在体液学常规检查中应用较少,为了提高我国体液学检测水平,现将近年来国内外进展综述如下。 一、尿液沉渣检查及尿液蛋白分析 1.尿沉渣检验方法学进展主要是显微镜检查的标准化和沉


六种染色后光镜观察法检测肝癌细胞凋亡

作者:杨连君,司晓辉,王文亮,王文勇,赵一岭,方正清[摘 要] 目的:探讨简便易行的在光镜下通过形态学观察检测细胞凋亡的方法,并对其进行比较。方法:首先用6%的乙醇作用6 h诱导人肝细胞癌细胞系HCC9204细胞凋亡,然后进行未固定细胞的台盼蓝染色、吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双染色,


CFDA颁布第一批120项医疗器械行业标准

6月30日,国家食品药品监督管理总局在网站上发布新闻,表示以2014年第30号公告形式颁布了《子宫刮匙》等120项推荐性医疗器械行业标准。这是今年6月1日起新修订的《医疗器械监督管理条例》施行后颁布的第一批医疗器械行业标准。标准的正式颁布将推动医疗器械监督管理,对保障医疗器械安全有效、促进医疗器


快速细胞分析仪应用

细胞计数一直是令大家头疼的事,传统的细胞计数不但麻烦,而且还没有办法判断细胞的活率、细胞的体积、细胞的的直径、细胞的浓度、以及细胞碎片等诸多问题。传统的细胞计数方法就是一台细胞计数器(hemacytometer)和一部显微镜,为了得到准确的计数,血细胞计数器必须首先用擦镜纸彻底的进行清洁


免疫学检验——免疫细胞的分离及其表面标志检测技术

第一节 免疫细胞的分离 一、外周血单个核细胞的分离 将2份6%聚蔗糖蒸馏水溶液与1份34%泛影葡胺生理盐水溶液混合,其比重为1.077±0.002,可作为常规的淋巴细胞分离液,即Ficoll分离液。 主要用于分离外周血中单个核细胞,是一种单次密度梯度离心分离法,其分布由上到下依次为:稀释


脑力智宝对实验性脑缺血大鼠学习记忆与神经细胞凋亡...

脑力智宝对实验性脑缺血大鼠学习记忆与神经细胞凋亡的影响【摘要】目的研究脑力智宝对实验性脑缺血大鼠学习记忆功能与神经细胞凋亡的影响。方法结扎实验大鼠双侧颈总动脉制作脑缺血模型,Morris水迷宫法测试其学习记忆功能,HE染色法观察其神经细胞形态学改变,TUNEL法检测凋亡细胞。


细胞染色方法归纳

Hoechst染色hoechst可以穿过活细胞膜与细胞核结合 (主要为凋亡活细胞)在紫外光下将核染为蓝色. Hoechst染细胞核会影响共聚焦显微镜对该样本其他荧光的观察效果.hoechst有hoechest33342和hoechst33258两种 hoechsts33258,h


细胞凋亡实验

细胞凋亡(Apoptosis) 又称程序性细胞死亡(Programmed Cell Death,PCD)是指细胞基因调控的一种自主性的自杀现象。即是在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自主结束生命的死亡方式。凋亡一词最早是由年澳大利亚组织病理学家John Kerr通过研究大鼠肝左叶细胞死亡时,


FDA和NIST对细胞治疗中的细胞计数

近年来,由于细胞治疗方法的兴起,人们日益需求能够高质量、稳健、有效进行细胞表征测定的方法。细胞计数,作为细胞疗法中最基础的检测项目,现今需要更高的检测可信度。2017年4月,美国国家标准与技术研究院(NIST) 食品与药物管理局(FDA)共同举办了一场专注于细胞计数的研讨会,聚焦于选择、设计


抗肿瘤药物研究及新药筛选

提 纲 一、化疗药物的发展 二、肿瘤的药物治疗 三、抗肿瘤药物筛选及评价 四、体外抗肿瘤活性试验 五、体内抗肿瘤活性试验 一、化疗药物的发展 • 近代肿瘤化疗学始于20世纪40年代。 • 50年代通过动物筛选化疗药物发现了5FU、MTX、CTX等,


抗肿瘤药物研究及新药筛选

提 纲 一、化疗药物的发展 二、肿瘤的药物治疗 三、抗肿瘤药物筛选及评价 四、体外抗肿瘤活性试验 五、体内抗肿瘤活性试验 一、化疗药物的发展 • 近代肿瘤化疗学始于20世纪40年代。 • 50年代通过动物筛选化疗药物发现了5FU、MTX、CTX等,


动物细胞/组织培养常见的一些问题

由于影响因素过多,细胞/组织培养中出现的一些问题往往很难分析并得到解决,因此被人戏称为“黑色艺术”或“巫术”。本文列举了一些动物细胞/组织培养中常见的问题及解决方法。1.培养试剂的保存:血清:-5oC - -20oC 保存,避免反复冻融。培养基: 2oC – 8oC避光保存。


免疫细胞化学在神经科学中的应用

免疫细胞化学的发展对许多领域的研究起到很大的推动作用,在神经科学的研究中尤为突出。本章 仅就免疫细胞化学在神经科学的基础研究方面的应用做一简要介绍。 一、确定神经递质的性质、定性和分布 早期的神经科学工作者应用传统的神经解剖学研究方法如甲基蓝染色法、镀银染色法等对中枢及外周神经系统的结构做了大量


细胞凋亡,细胞凋亡通路和细胞凋亡检测的几种检测方法

一、形态学观察方法 1、HE染色、光镜观察:细胞凋亡后呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。 2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。细胞凋亡|后(细胞凋亡,细胞凋亡通路,细胞凋亡检测)核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧


细胞凋亡通路和细胞凋亡检测的几种检测方法

一、形态学观察方法1、HE染色、光镜观察:细胞凋亡后呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。细胞凋亡|后(细胞凋亡,细胞凋亡通路,细胞凋亡检测)核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨


细胞凋亡的几种检测方法介绍

一、形态学观察方法1、HE染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核 呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。3、台盼蓝染色:如果细胞膜 不


细胞凋亡的几种检测方法

一、形态学观察方法1、HE染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。3、台盼蓝染色:如果细胞膜不完整


细胞凋亡的几种检测方法

一、形态学观察方法 1、HE染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。 2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。 3、台盼蓝染


细胞凋亡的几种检测方法

一、形态学观察方法1、HE染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。3、台盼蓝染色:如果


细胞凋亡的几种检测方法

一、形态学观察方法 1、HE染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。 2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。 3、台盼蓝染色:如果

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