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affinity biologicals/Alpha-1-Antitrypsin A1AT Paired Antibody Set/A1AT-EIA
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affinity biologicals/Alpha-1-Antitrypsin A1AT Paired Antibody Set/A1AT-EIA
品牌 / 
affinity
货号 / 
A1AT-EIA
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Alpha-1-Antitrypsin A1AT Paired Antibody Set

Affinity’s Alpha-1-Antitrypsin A1AT Paired Antibody Set consists of matched capture and detecting antibodies that have been titrated and optimized for use in sandwich style ELISA assays. The product as provided contains sufficient capture and detecting antibodies for five full 96-well microplates and contains a detailed protocol sheet containing directions for use, recipes for solutions and sources for additional materials required. This Alpha-1-Antitrypsin A1AT Paired Antibody Set is intended to facilitate the end user in establishing an “in-house” immunoassay for research purposes only and must not be used for diagnostic applications.  Assay validation is the responsibility of the end user.


Product Code: A1AT-EIA

Supplied Materials:

  1. Capture Antibody (A1AT-EIA-C): One yellow-capped vial containing 0.5 ml of polyclonal affinity purified anti-A1AT antibody for coating plates.
  2. Detecting Antibody (A1AT-EIA-D):  One red-capped tube containing 0.5 ml of peroxidase conjugated affinity-purified polyclonal anti-A1AT antibody for detection of captured Alpha-1-Antitrypsin.

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Species Cross Reactivity: View Chart

Product Datasheet: Alpha-1-Antitrypsin A1AT Matched Pair Antibody Set for ELISA


Description of Alpha 1-Antitrypsin A1AT

Alpha-1-Antitrypsin A1AT, also known as Alpha-1-Proteinase inhibitor (A1PI), is the most abundant protease inhibitor in blood and a member of the SERPIN family of proteinase inhibitors. Serum levels are typically 1.3 mg/ml (25 μM) but A1AT is an acute phase protein and concentrations can rise four-fold during inflammatory episodes or tissue injury. Low levels in circulation have been associated with pulmonary disease such as emphysema. A1AT is a single chain molecule with a mass of 52,000 daltons that is produced primarily in the liver and to a lesser extent by blood monocytes and intestinal epithelium. Based on association rates, the primary target enzyme for A1AT is believed to be neutrophil elastase1,2, but A1AT is a broad-spectrum inhibitor for many serine proteinases and the main role of A1AT in vivo is likely that of a “backup” inhibitor and proteinase scavenger in fluids and tissues. Although the association rates of A1AT with other enzymes are lower, the high concentration in plasma makes it an important inhibitor of activated Protein C, activated FXI, thrombin and plasmin1-4. Enzyme inhibition by A1AT occurs through proteolytic cleavage between Met358 and Ser359, which induces a conformational change in A1AT locking the enzyme into a stable, inactive 1:1 enzyme-inhibitor complex.

References and Reviews

  1. Johnson D, Travis J; Oxidative Inactivation of Human α-1-Proteinase Inhibitor; JBC 254, pp4022-4026, 1979.
  2. Travis J, Johnson D; Human α-1-Proteinase Inhibitor; Methods in Enzymology, 80, pp 754-765, 1981.
  3. Heeb MJ, Griffin JH; Physiologic Inhibition of Human Activated Protein C by α-1-Trypsin Inhibitor; JBC 263, pp11613-11616, 1988.
  4. Scott CF, Schapira M, James HL, Cohen AB, Colman RW; The Inactivation of Factor XIa by plasma protease inhibitors: Predominant role of α1protease inhibitor and protective effect of high molecular weight kininogen. J Clin Invest 69, pp 844, 1982.

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制备抗体的传统方法是用纯制的抗原多次接种于适当的成年健康动物,则激其产生免疫应答,血清中含有大量特异性抗体,又称抗血清或免疫血清。可以直接取用,也可将血清抗体提纯为精致免疫球蛋白。但是天然抗原含有多种互不相同的抗原决定簇,因此血清抗体是具不同特异性的多克隆抗体混合物... 查看更多>
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鼠IGG对于羊来说是异物,所以当羊接触鼠IGG就会产生相应的抗体,称为羊抗鼠IgG抗体.
又由于自然存在的抗原大都存在多个抗原表位,会刺激机体产生多种针对同一抗原的不同抗原表位相应的不同抗体.
抗原注射进入动物体内后,因为不是一个单独的分子,会随血液循环输送到各处,也就会接触不同的免疫细胞。有些还会被抗原提呈细胞再加工。所以最后的结果是很多个免疫细胞都会接触到。一个抗原分子也有很多抗原表位。每个表位理论上都有能力激活一个B细胞转化为浆细胞。所以体内最后针对该抗原的必定是多克隆

本人做多克隆抗体制备,所用蛋白为纯化的过敏原,与福氏佐剂等量混合,每次量为1mg,每次总的注射量为3-4ml,兔子皮下多点注射,但是其中两只兔子在首次免疫后死亡,另有一致在首次加强免疫后死亡,死亡原因全是消化不良,胃鼓的像气球一样,请问各位老师这是什么原因啊,应该如何改进啊?谢谢

多克隆抗体的概念抗原刺激机体,产生免疫学反应,由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白,这就是免疫球蛋白,这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该抗原所产生的抗体称之为单克隆抗体(Monclone antibody)。由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体,机体内所产生的抗体就是多克隆抗体;除了抗原决定簇的多样性以外,同样一类抗原决定簇,也可刺激机体产生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五类抗体。
单克隆抗体是由淋巴细胞杂交瘤产生的、只针对复合抗原分子上某一单个抗原决定簇的特异性抗体。
单克隆抗体这项新技术从根本上解决了在抗体制备中长期存在的特异性和可重复性问题,可用于探讨: ①蛋白质的精细结构;②淋巴细胞亚群的表面新抗原;③组织相容性抗原;④激素和药物的放射免疫(或酶免疫)分析;⑤肿瘤的定位和分类;⑥纯化微生物和寄生虫抗原;⑦免疫治疗和与药物结合的免疫-化学疗法 (“导弹”疗法,利用单克隆抗体与靶细胞特异性结合,将药物带至病灶部位.。
因此,单克隆抗体可直接用于人类疾病的诊断、预防、治疗以及免疫机制的研究,为人类恶性肿瘤的免疫诊断与免疫治疗开辟了广阔前景。
最近打算做CoIP,但是有一个蛋白没有抗体,实验室想制备一个。不知道对于CoIP来说,多克隆抗体行吗?还是要单克隆抗体
根据不同应用领域的要求,正确的选择和应用.
1.单克隆抗体的优点:
(1)杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代,只要不发生细胞株的基因突变,就可以不断的生产高特异性、高均一性的抗体.
(2)可以用相对不纯的抗原,获得大量高度特异的、均一的抗体.
(3)由于可能得到“无限量”的均一性抗体,所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法,如IRMA和ELISA等.
(4)由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能,可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗.
2.单克隆抗体的局限性:
(1)单克隆抗体固定的亲和性和局限的生物活性限制了它的应用范围.由于单克隆抗体不能进行沉淀和凝集反应,所以很多检测方法不能用单克隆抗体完成.
(2)单克隆抗体的反应强度不如多克隆抗体.
(3)制备技术复杂,而且费时费工,所以单克隆抗体的价格也较高.
所谓混合单克隆抗体就是只含一个单细胞核混合其他氨基酸物质的克隆细胞产生的。
说得简单点就是,细胞核是原封不动的,没有重组过,而细胞核外的东西是很多别的细胞中提取出来的并组合起来的。这样的混合体淋巴细胞产生的抗体具有很强的嵌合能力,针对性比一般的抗体强,但是它的来源没变,所以称之为混合单克隆抗体
哎最近实验真多!最重要的是这个我来负责找!累人!求助各位大大!

求助,我们免疫了小鼠,然后采用眼眶取血,之后10000g离心后发现上清的血清有少量溶血现象,发红。对后续的抗体实验有什么影响么,后续就初步硫酸铵纯化下抗体,做ELISA和间接荧光染色做流式之类的实验。这种有少量溶血的血清能用么

我用GST做融合蛋白免疫兔子制备了多克隆抗体,制备出的抗体通过了GST的柱子消除了与我的抗原有交叉反应的抗体,用鼠脑做WesternBlot有三条带,其中有我目的蛋白的条带,另外一条在26KDa-34KDa之间,还有一条大于130KDa,我目的蛋白是在55KDa-72KDa之间,我想问一下那两条杂带是什么?因为鼠脑中应该没有与我目的蛋白相似的蛋白了(用Blast做过蛋白比对,相似的蛋白并没有出现在WB中,在40KDa左右),那两个杂带会是什么呢?我能通过什么方法把它们去除呢?谢谢
Western blot的一抗和二抗都可以用多克隆抗体
不过多克隆抗体因为有多个结合位点,事实上的特异性并不如单克隆抗体,所以一般Western blot都尽量要求使用单克隆抗体。以保证实验结果准确可靠