需要大量纯化细胞表达的重组蛋白,但有DNA残余,怎么去除DNA影响
2021-08-15
问题描述:
用E.coli重组表达了一种蛋白,现在想要大量表达纯化,开始用过滤的方法,因为所需的蛋白和细胞碎片分子量差别很大,但是发现有很多的DNA污染,用什么方法能去掉DNA,而不影响需要的蛋白呢?用Dnase可以吗?
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1749905874
用户
大多数DNA水解酶都是蛋白质,,,会影响需要的蛋白如果需要的蛋白分子量适当,凝胶色谱法就可以分离了啊。。。
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后山草民
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加点核酸酶溶解掉核酸,我们实验室蛋白纯化都是用柱子纯化,没有用过滤的,而且过滤的话纯化效果应该很差,杂质太多
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thqnsfac
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不知道 你用E.coil表达的蛋白有无his标签,如果有就可以考虑核酸酶,降解DNA后再用IMAC金属螯合柱子纯化,基本可以得到较纯的蛋白。如果没有His标签,也可以考虑其他柱子,离子交换之类的,如果怕核酸酶对你的蛋白有影响,也有核酸酶残留检测试剂盒INDUMY。希望对你有所帮助。
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boonma
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可以用DNA酶的
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