U-proteinExpressBV是一家专门的合同研究机构，提供用于研究和临床前应用的（哺乳动物）重组蛋白和抗体的快速大规模生产，并在位于荷兰乌得勒支乌得勒支科学公园的最先进实验室设施中运营。员工在DNA克隆、哺乳动物细胞培养和蛋白质生产方面经验丰富。自2002年以来，已为生物技术、制药工业和学术界生产了5000多种不同的重组抗体和蛋白质。
U-ProteinExpress的rPEX技术基于HEK293或CHO细胞系中的瞬时蛋白生产，成功率超过90%，可以生产难以表达的蛋白质，如双特异性抗体和抗原。
U-ProteinExpress蛋白纯化原则
蛋白纯化要利用不同蛋白间内在的相似性与差异，利用各种蛋白间的相似性来除去非蛋白物质的污染，而利用各蛋白质的差异将目的蛋白从其他蛋白中纯化出来。每种蛋白间的大小、形状、电荷、疏水性、溶解度和生物学活性都会有差异，利用这些差异可将蛋白从混合物如大肠杆菌裂解物中提取出来得到重组蛋白。
蛋白的纯化大致分为粗分离阶段和精细纯化阶段二个阶段。一般蛋白纯化采用的方法为树脂法。粗分离阶段主要将目的蛋白和其他细胞成分如DNA、
RNA等分开，由于此时样本体积大、成分杂，要求所用的树脂高容量、高流速、颗粒大、
粒径分布宽．并可以迅速将蛋白与污染物分开，必要时可加入相应的
保护剂（例如
蛋白酶抑制剂），防止目的蛋白被降解。精细纯化阶段则需要更高的分辨率，此阶段是要把目的蛋白与那些分子量大小及理化性质接近的蛋白区分开来，要用更小的树脂颗粒以提高分辨率，常用
离子交换柱和疏水柱，应用时要综合考虑树脂的选择性和柱效两个因素。选择性指树脂与目的蛋白结合的特异性，柱效则是指各蛋白成分逐个从树脂上集中洗脱的能力，洗脱峰越窄，柱效越好。仅有好的选择性，洗脱峰太宽，蛋白照样不能有效分离。
U-ProteinExpress重组抗体使制备人源化抗体和人源抗体成为可能，而这是其他常规的多克隆或单克隆抗体制备方法所不可能做到的。主要包括四个方面的技术：抗体库技术，包括组合抗体库、噬菌体抗体库、细菌和酵母展示的抗体库、核糖体展示的抗体库及其抗体库的筛选技术；重组抗体基因的改造和表达，包括抗体亲和力成熟、抗体人源化改造和稳定性改造，以及抗体基因在原核、酵母、昆虫、哺乳动物细胞、植物及转基因动物中的表达；重组抗体效应功能的提高，涉及抗体与同位素、药物、毒素结合的"导向药物"、双特异性抗体、抗体一酶融合蛋白、免疫细胞因子及细胞内抗体；抗体特异性分析和鉴定，主要介绍抗体的分离和纯化、抗体标记技术、抗体亲和力测定、抗体的抗原表位分析、抗体基因测序和结构模建，以及常用的抗体鉴定技术，如ELISA、免疫组化、FACS分析、免疫沉淀和Westernblot等。本书涵盖了当前重组抗体制备和改造中的大部分技术，因此对从事抗体研制的技术人员、生物技术公司及有关专业的大专院校师生均有一定参考价值。
U-ProteinExpress蛋白纯化步骤
分离纯化某一特定蛋白质的一般程序可以分为前处理、粗分级、细分级三步。
前处理
分离纯化某种蛋白质，首先要把蛋白质从原来的组织或细胞中以溶解的状态释放出来并保持原来的天然状态，不丢失生物活性。为此，动物材料应先剔除结缔组织和脂肪组织，种子材料应先去壳甚至去种皮以免受
单宁等物质的污染，油料种子最好先用低沸点的有机溶剂如乙醚等脱脂。然后根据不同的情况，选择适当的方法，将组织和
细胞破碎。
动物组织和细胞可用电动捣碎机或匀浆机破碎或用超声波处理破碎。植物组织和细胞由于具有纤维素、半纤维素和果胶等物质组成的
细胞壁，一般需要用
石英砂或
玻璃粉和适当的提取液一起研磨的方法或用
纤维素酶处理也能达到目的。细菌细胞的破碎比较麻烦，因为整个
细菌细胞壁的骨架实际上是一个借
共价键连接而成的肽聚糖囊状大分子，非常坚韧。破碎细菌细胞壁的常用方法有超声波破碎，与砂研磨、高压挤压或溶菌酶处理等。组织和细胞破碎后，选择适当的
缓冲液把所要的蛋白提取出来。细胞碎片等不溶物用
离心或过滤的方法除去。
如果所要的蛋白主要集中在某一细胞组分，如细胞核、
染色体、
核糖体或可溶性细胞质等，则可利用差速离心的方法将它们分开，收集该细胞组分作为下步纯化的材料。如果碰上所要蛋白是与细胞膜或膜质
细胞器结合的，则必须利用超声波或去污剂使膜结构解聚，然后用适当介质提取。
粗分离
当蛋白质提取液（有时还杂有核酸、多糖之类）获得后，选用一套适当的方法，将所要的蛋白与其他杂蛋白分离开来。一般这一步的分离用
盐析、
等电点沉淀和有机溶剂分级分离等方法。这些方法的特点是简便、处理量大，既能除去大量杂质，又能浓缩蛋白溶液。有些蛋白提取液体积较大，又不适于用沉淀或盐析法浓缩，则可采用
超过滤、凝胶过滤、冷冻真空干燥或其他方法进行浓缩。
细分离
样品经粗分级分离以后，一般体积较小，杂蛋白大部分已被除去。进一步纯化，一般使用层析法包括凝胶过滤、
离子交换层析、吸附层析以及亲和层析等。必要时还可选择电泳法，包括
区带电泳、
等电点聚焦等作为最后的纯化步骤。用于细分级分离的方法一般规模较小，但分辨率很高。
结晶是
蛋白质分离纯化的最后步骤。尽管结晶过程并不能保证蛋白一定是均一的，但是只有某种蛋白在溶液中数量上占有优势时才能形成结晶。结晶过程本身也伴随着一定程度的纯化，而
重结晶又可除去少量夹杂的蛋白。由于结晶过程中从未发现过变性蛋白，因此蛋白的结晶不仅是纯度的一个标志，也是断定制品处于天然状态的有力指标。
离子层析法
当被分离的蛋白质溶液流经离子交换层析柱时，带有与离子交换剂相反电荷的蛋白质被吸附在离子交换剂上，随后用改变pH等办法将吸附的蛋白质洗脱下来。
有机溶剂提取
蛋白质纯化有机溶剂提取的原理是:与水互溶的有机溶剂(如甲醇、乙醇)能使一些蛋白质在水中的溶解度显著降低;而且在一定温度、pH值和离子强度下,引起蛋白质沉淀的有机溶剂的浓度不同,因此,控制有机溶剂的浓度可以分离纯化蛋白质。例如,在冰浴中磁力搅拌下,在4℃预冷的培养液中缓慢加入乙醇(-25℃),可以使冰核蛋白析出,从而纯化冰核蛋白。由于在室温下,有机溶剂不仅能引起蛋白质的沉淀,而且伴随着变性。因此,通常要将有机溶剂冷却,然后在不断搅拌下加入有机溶剂防止局部浓度过高,
蛋白质变性问题就可以很大程度上得到解决。对于一些和脂质结合比较牢固或分子中极性侧链较多、不溶于水的蛋白质,可以用乙醇、
丙酮和
丁醇等有机溶剂提取,它们有一定的
亲水性和较强的亲脂性,是理想的提取液。冷乙醇分离法提取免疫
球蛋白最早由Cohn于1949年提出,用于制备
丙种球蛋白。冷乙醇法也是WHO规程和中国生物制品规程推荐的方法,不仅分辨率高、提纯效果好、可同时分离多种成分,而且有抑菌、清除和灭病毒的作用。
U-ProteinExpress常用产品报价单
| 产品名 | 货号 | 公司分类 | 商城分类 | 美金价 |
| U-protein/Adrenocorticotropichormonemonoclonalantibody/P-Ab0001/100microgram | P-Ab0001 | Antibodies | 功能性抗体 | 300.00 |
| U-protein/ComplementC2,human/C001/200microgram | C001 | Complementproteins | 其它天然蛋白 | 390.00 |
| U-protein/Fam3D,human/F002/100microgram | F002 | Cytokines | 细胞因子 | 425.00 |
| U-protein/Alkalinephosphatase,placenta,human,secreted(glycerolbuffer)/A002/0.25mg | A002 | Enzymes | 其它酶 | 475.00 |
| U-protein/Beta2-GlycoproteinI/G002/0.1mg | G002 | Haematology | 其他试剂 | 420.00 |
| U-protein/FSH,Daniorerio/F001/100microgram | F001 | Hormones | 激素 | 450.00 |
| U-protein/CD36extracellulardomain,human/C007/100microgram | C007 | Receptors | 受体 | 750.00 |
| U-ProteinExpress/Mannose-bindingproteinC/0.1mg/M001 | M001 | Complementproteins | 其它重组蛋白 | 470.00
|
蚂蚁淘电商平台
ebiomall.com
公司简介
蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
正品保证： 全球直采 在线追溯
蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
及时交付： 限时必达 畅选无忧
蚂蚁淘的运营团队都是有着多年经验的成员，他们熟悉海外采购、仓储物流、报关等环节； 同时通过在线的流程监控，蚂蚁淘的进口速度比传统企业提高了50%以上， 部分产品甚至能做到7-10天到货，即蚂蚁淘的“时必达”服务。
轻松采购： 在线下单 简单省事
蚂蚁淘的价格是真实透明的，并且具有很大的价格优势，不需要繁杂的询价比价； 报价单与合同可以直接在线生成或打印；就像在京东购物一样， 您的鼠标点击几 次即完成在蚂蚁淘的采购，订单详情会告诉您所有进程。
售后申请： 耐心讲解 优质服务
蚂蚁淘提供的产品在使用过程中如因产品质量问题有售后需求时， 您可通过我的订单提交您的“申请售后”， 蚂蚁淘产品顾问会第一时间为您处理， 在售后服务过程中如遇到问题也可致电蚂蚁淘客服热线：4000-520-616。
重组蛋白A预装柱/填料（技术指标：每毫升rProtein G结合30-55mg人血清IgG，22-45mg兔IgG /ml填料，4-12mg鼠血清IgG/ml填料，4-13是由广州洁特生物过滤股份有限公司代理或销售的JET BIOFIL品牌的试剂，产品来源于中国。广州洁特生物过滤股份有限公司是中国最权威的重组蛋白A预装柱/填料（技术指标：每毫升rProtein G结合30-55mg人血清IgG，22-45mg兔IgG /ml填料，4-12mg鼠血清IgG/ml填料，4-13试剂销售服务商之一，在广州等地方
查看更多>
上海泽叶生物科技有限公司在发布的色氨酸羟化酶1(TPH1)重组蛋白供应信息，浏览与色氨酸羟化酶1(TPH1)重组蛋白相关的产品或在搜索更多与色氨酸羟化酶1(TPH1)重组蛋白相关的内容。
查看更多>
一般认为，在几乎所有的后生动物（metazoans), 尤其是脊椎动物中，都普遍存在选择性剪接，这就为从单基因产生多种功能性多肤提供了一'条经济的途径。根据 EST(expressedsequencedtag，表达序列标签）序列定位和对合成的mRNA (resultant mRNA) 家族进行图谱分析的结果，估计约有 35% 的人类基因能产生多种不同的剪接产物。
查看更多>
BioLegend新产品—TNF家族新重组蛋白，&nbsp;<br><br><br><br><br><br>&nbsp;<br><br>&nbsp;<br><br>&nbsp; &nbsp; &nbsp;&nbsp;TNF家族新重组蛋白<br><br>&
查看更多>
一般认为，在几乎所有的后生动物（metazoans), 尤其是脊椎动物中，都普遍存在选择性剪接，这就为从单基因产生多种功能性多肤提供了一'条经济的途径。根据 EST(expressedsequencedtag，表达序列标签）序列定位和对合成的mRNA (resultant mRNA) 家族进行图谱分析的结果，估计约有 35% 的人类基因能产生多种不同的剪接产物。
查看更多>
重组蛋白的产生是应用了重组DNA或重组RNA的技术从而获得的蛋白质。目前，体外重组蛋白的生产主要包括四大系统：原核蛋白表达，哺乳动物细胞蛋白表达，酵母蛋白表达及昆虫细胞蛋白表达。生产的蛋白在活性和应用方法方面均有所不同。根据自身的下游运用选择合适的蛋白表达系统，提高表达成功...
查看更多>
北京华大蛋白质研发中心有限公司在发布的[华大蛋白]-[重组蛋白]-TP47供应信息，浏览与[华大蛋白]-[重组蛋白]-TP47相关的产品或在搜索更多与[华大蛋白]-[重组蛋白]-TP47相关的内容。
查看更多>
弘业新创抗体技术股份有限公司在发布的重组蛋白纯化服务，抗体纯化服务供应信息，浏览与重组蛋白纯化服务，抗体纯化服务相关的产品或在搜索更多与重组蛋白纯化服务，抗体纯化服务相关的内容。
查看更多>
上海柯雷生物科技有限公司在发布的山梨醇脱氢酶(SDH)重组蛋白供应信息，浏览与山梨醇脱氢酶(SDH)重组蛋白相关的产品或在搜索更多与山梨醇脱氢酶(SDH)重组蛋白相关的内容。
查看更多>
Western Blotting依然是目前分离和检测蛋白最常用到的一种技术方法，但是要将这种技术变成你的有利手段，并不容易。因此优化实验操作手册至关重要，但是，正如Bio-Rad成像系统市场经理Ryan Short所说的，“大多数研究人员并不是Western blot技术专家——他们要解答的是更大的问题”，Ryan继续说道，“问题是大多数人都不知道何处需要优化。坦率地说，Western blot检测过程耗时太长
查看更多>
上海信裕生物科技有限公司在发布的线粒体外膜转位酶70A(TOMM70A)重组蛋白 供应信息，浏览与线粒体外膜转位酶70A(TOMM70A)重组蛋白 相关的产品或在搜索更多与线粒体外膜转位酶70A(TOMM70A)重组蛋白 相关的内容。
查看更多>
Source: Pichia. PastorisMolecular Weight: Recombinant OPG/Fc contains 412 amino acid residues, including 180 residues from mature OPG (a.a 22-201) and 232 residues from the Fc protein of human IgG1, and has a calculated ...
查看更多>
常见问题
蚂蚁淘所售产品均为正品吗？
蚂蚁淘的创始人兼CEO是钟定松先生，具有十年的从业经验，在业界享有良好的口碑；
Ebiomall是跨境直采平台，我们直接从厂家采购，自己的团队负责国际物流和清关，中间没有第三方，蚂蚁淘承诺所售产品仅为正品，假一罚十。
下单后可以修改订单吗？
未确认状态的订单可以修改，打开“订单详情”页面，点击右上角的“修改订单”即可，若已审核确定，则订单无法修改。
商品几天可以发货？
现货产品付款审核后即可发货,大部分期货产品在3周左右即可到货,提供时必达服务的产品订单审核十天内即可发货。
订单如何取消？
如订单处于未确定状态，进入“我的订单"页面，找到要取消的订单，点击“取消订单”按钮。
可以开发票吗？
本网站所售商品都是正规清关，均开具13%正规发票，发票金额含配送费金额，另有说明的除外。
如何联系商家？
蚂蚁淘任何页面都有在线咨询功能，点击“联系客服”、“咨询”或“在线咨询”按钮，均可咨询蚂蚁淘在线客服人员，
或拨打4000-520-616，除此之外客户可在
联系我们页面找到更多的联系方式。
收到的商品少了/发错了怎么办？
同个订单购买多个商品可能会分为一个以上包裹发出，可能不会同时送达，建议查看订单详情是否是部分发货状态；如未收到，可联系在线客服或者致电4000-520-616。
退换货/维修需要多长时间？
一般情况下，退货处理周期为客户收到产品一个月内（以快递公司显示签收时间为准），包装规格、数量、品种不符，外观毁损、短缺或缺陷，请在收到货24小时内申请退换货；特殊商品以合同条款为准。
商品咨询
二者不一样。赖脯胰岛素（优泌乐）是短效胰岛素，起效快，但是作用时间短。而精蛋白锌赖脯胰岛素混合液（25R）是属于短中效结合的胰岛素，起效快，而且作用时间长，二者不能简单替换，如果自己私自替换，可能会造成下一餐前的低血糖，是会出危险的。
HEK293细胞表达系统，瞬时转染的话 3天左右可以初步检测表达效果，可以14天内优化表达效果。关于这个系统，有任何疑问可以咨询我 4008909989
包涵体的形成是一个由许多蛋白质参与的极端复杂的动力学过程，依赖于蛋白质的折叠速率和聚集速率，并且与蛋白质的合成和降解程度相关。强的表达系统，高的诱导剂浓度，相对较高的培养温度常常造成包涵体的形成。除了外界因素，包涵体的形成依赖于蛋白质特异的折叠行为，而不是蛋白的通常特性，如大小，融合标签，相对的疏水性。尽管如此，限制折叠速率的结构特性，如二硫键的形成常常是含有二硫键蛋白质正确折叠的限速步骤（并不绝对，因为有些蛋白质二硫键的破坏并不影响其功能），富含二硫键的蛋白质具有更为复杂的结构，当高水平表达时，由于大肠杆菌细胞质是一个偏还原性的环境，蛋白质容易形成错配的二硫键，这常常是包涵体形成的主要原因。膜蛋白具有暴露的疏水区，表达时易于聚集形成包涵体，也有可能由于降解或对细胞的毒性作用使得表达水平极低。蛋白质的糖基化可以影响到蛋白质的折叠行为和溶解性，当它们在原核系统进行表达时，也容易聚集。
防止包涵体常用的方法：使用中等强度或弱的启动子，低温培养，有限的诱导，优化培养基条件，进行融合表达，与伴侣分子和折叠酶共表达，表达定位于不同的空间，选择突变的菌株或其他的原核表达系统。
增加蛋白质折叠的添加剂：添加剂可能的作用机制甘油对蛋白质具有优先的水合作用/增加黏度L-精氨酸两亲分子/渗压剂甘氨酰甜菜碱/山梨糖醇 对蛋白质具有优先的水合作用阿拉伯聚糖 增加黏度木糖醇 增加黏度乙醇 调节极性DMSO 调节极性
两性离子表面活性剂（Zwitterionic detergents）保护非极性表面Triton X-100保护非极性表面硫代甜菜碱类物质（NDSBs）保护非极性表面蔗糖/海藻糖对蛋白质具有优先的水合作用/增加黏度N-氧化三甲胺（TMAO）对蛋白质具有优先的水合作用/渗压剂三氟乙醇（TFE）促进二级结构的形成低浓度盐酸胍使部分折叠的中间体不稳定/增加天然构象蛋白质的溶解性低浓度尿素使部分折叠的中间体不稳定/增加天然构象蛋白质的溶解性配体稳定天然结构状态聚乙二醇保护熔球体（molten globule）/增加黏度需要强调的是在培养细菌时，在培养基中加入5％的乙醇可以起到一定的防止包涵体产生的作用。
对比另外一篇文章：
减少包涵体形成的策略降低重组菌的生长温度，降低培养温度是减少包涵体形成的最常用的方法，较低的生长温度降低了无活性聚集体形成的速率和疏水相互作用，从而可减少包涵体的形成。2. 添加可促进重组蛋白质可溶性表达的生长添加剂，培养E.coli时添加高浓度的多醇类、蔗糖或非代谢糖可以阻止分泌到周质的蛋白质聚集反应，在最适浓度范围内添加这些添加剂不会影响细胞的生长、蛋白质的合成或运输，其它促重组蛋白质可溶性表达的生长添加剂还有乙醇（诱导热休克蛋白的表达）、低分子量的巯基或二硫化合物（影响细胞周质的还原态，从而影响二硫键的形成）和NaCl。3. 供给丰富的培养基，创造最佳培养条件，如供氧、pH等。
精蛋白生物合成人胰岛素注射液(预混30R)即是30%的R（重组人胰岛素）和70%的N（精蛋白重组人胰岛素）的混合制剂。R是速效产品，N是缓释效用。
生物合成人胰岛素注射液，比如诺和灵R笔芯。是单一品种、不是混合的胰岛素。是不含鱼精蛋白的短效胰岛素。
当蛋白组学，肿瘤细胞生物学正风风火火的开展研究时，蛋白质的高效快速表达显的日见重要。因此选择一种合适的表达蛋白体系很是重要：当然这很多的时候和实验室的条件和偏好有关。下面这篇文章就利用大肠杆菌表达重组......
E.coliExpressionSystems.pdf(136.05k)
各位业内前辈，我们正在考虑引进符合GMP认证标准的CHO细胞系，用于表达可做疫苗生产的重组蛋白类。目前已有符合标准信息的是Thermofisher的CHO-S悬浮培养细胞资料，希望能再多了解一些和这株细胞类似的其他公司符合GMP标准的生产株细胞做个比较。谢谢指教！
重组蛋白不切除GST-tag有活性，那么如果使用带有GST-tag的酶进行测活，对测活结果是否会带来干扰？
重组蛋白和多肽的分离纯化问题不管是对生产还是研究工作都是关键性的问题，这里给大家一点总结性的文章，希望能够抛砖引玉，欢迎热烈的讨论:)理论总结.rar(116.67k)
1.在悬浮培养液中培养Sf9细胞，并使之适应无血清培养液。
2.准备旋转培养瓶，用于按比例扩增Sf9细胞，将合适大小的两孔盖连接在转瓶的一个 侧臂，另用一平盖接在另一侧臂。将一段短管（约6英寸或15 cm）装在通气孔中，末端连接一滤器，借助张力器用管索将管子与通气孔和滤器固牢。
3.将一段长管（30~60 cm）连接至进气孔，并在末端连接一滤器，用管索加固，另一段管子连接于滤器的另一端，用管索固牢。管子末端用铝箔封好。
4.将与两孔装置相对的侧壁上的盖子旋转90度以松开，高压灭菌培养瓶1 h。
5.将适应了无血清培养液的细胞接种于经高压灭菌的培养瓶中。将培养瓶装至半
