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【求助】全病毒抗原包板的问题
2006-03-24
问题描述:

我没有做过ELISA,请教一下各位,用全病毒做抗原包板做间接ELISA,对病毒纯度和病毒量的要求怎样?多谢!

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waynepionnet
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病毒属于可溶性抗原,与一般蛋白包被没有什么特别的区别,纯度越纯越好,蛋白量不需很多的。不过倒是要注意安全了,必要的时候需要灭活!
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jusmart
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谢谢waynepionnet,但是我手上的病毒量很少,现在自己在扩增,怎么知道扩增多少才够用呢?可不可以用TCID50之类的指标来粗略估计?
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waynepionnet
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蛋白的包被量是用质量来计算的,与TCID50没有什么直接的关系,可以用分光光度计测一下,一般包被量都在ng级。
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jusmart
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分光光度计测蛋白含量的话要纯化之后做吧,看到一些做ELISA的包板的蛋白量都是几十微克,太恐怖了吧,那该要多少病毒呀?!
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waynepionnet
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对,是在纯化之后做检测。做ELISA的几十微克包被你是从哪看来的,肯定没那么多的,一般ng级/孔啦。不过为了你后面实验顺利进行,最好多准备一点。
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jusmart
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非常非常感谢!
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