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Inoue, H., H. Nojima, and H. Okayama. 1990. High efficiency transformation of Escherichia coli with plasmids. Gene 96:23-28. Citation Abstract Procedure1. Inoc 查看更多>
An inexpensive alternative to glassmilk for DNA purificationPreparation of Silica1. Suspend 5 g of silica (Sigma, S-5631) in 50 ml of PBS. 2. Allow the silica 查看更多>
Rapid Method for Preparation of Genomic DNA from P. aeruginosa Inoculate 1 ml of L-broth or other rich media with cells of the strain from which genomic DNA is 查看更多>
Large scale double-stranded DNA isolationThe method used for the isolation of large scale cosmid and plasmid DNA is an unpublished modification (16) of an alka 查看更多>
基因(遗传因子)是产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列。基因支持着生命的基本构造和性能。储存着生命的种族、血型、孕育、生长、凋亡等过程的全部信息。环境和遗传的互相依赖,演绎着生命的繁衍、细胞分裂和蛋白质合成等重要生理过程。生物体的生、长、衰、病、老、死等一切生... 查看更多>
Cohesive End Ligation1) The ligation mixture contains the following: vector DNA (~100 ng) insert DNA (equimolar or 2 or 3 X molar concentration of vector) wate 查看更多>
基因组DNA的提取概 述   基因组DNA的提取通常用于构建基因组文库、Southern杂交(包括RFLP)及PCR分离基因等。利用基因组DNA较长的特性,可以将其与细胞器或质粒等小分子DNA分离。加入一定量的异丙醇或乙醇,基因组的大分子DNA即沉淀形成纤维状絮团飘浮其中, 可用玻棒将其取出,而小分子DNA则只形成颗 查看更多>
Prepare a ligation mix:Ligation Mix (2x)10x ligase buffer1.0 mldigested vector(0.1 mg/ml)1.0 mlH2O6.0 mltotal8.0 mldivide ligation mix into two Eppendorf tubes 查看更多>
1. 10ml菌液过夜培养至饱和(OD600值为2-3) 2. 离心沉降细胞(Sorvall中以2000rpm的速度),然后以冷的、等体积的无菌蒸馏水洗涤 3. 将细胞沉淀在200μl 裂解缓冲液中重悬浮,然后加入约300μl 玻璃珠和200μl的1:1苯酚:氯仿混和液 4. 漩涡摇匀1-2min 5. 加入200μ 查看更多>
稀释平板测数是根据微生物在高度稀释条件下固体培养基上所形成的单个菌落是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法,即一个菌落代表一个单细胞。 计数时,首先将待测样品制成均匀的繁殖稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,使其成单个细胞存在,否则一个菌落就不只是代表一个细胞,再取一定稀释 度、一定量的稀释液接种到平板中,使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后,由单个细胞生长繁殖形成菌落,统计菌落数目,即可计算出样品中的含菌数。此 记数方法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数,故又称活菌计数。一般用于某些 查看更多>
DNA Plasmid Prep.This is a scaled up version of the Baron protocol which has been modified to achieve purity comparable to CsCl preps. I have not sorted out st 查看更多>
Procedure1. Inoculate 1 ml from overnight culture into 100 ml Psi broth (scale up or down as needed). Incubate at 37 C with aeration to A550=0.48 2. Ice 15 min 查看更多>
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想获得高纯度的组织基因组DNA用于做定量PCR。先将小鼠脚趾放入组织裂解液(10mMTris-Hcl(pH7.5),100mMNaCl,10mMEDTA,and0.5%SDSwith0.4mg/mlproteinaseK)56°过夜,买了生工的:氯仿:异戊醇(25:24:1)溶液PH8.0,接下来该怎么做呀?感谢各位老师帮忙
DNA的粗提取和鉴定123
sha2842017-10-03
需要什么试剂?具体的配制方法是怎样的?要非常具体的!
真菌的细胞成分和植物是有差别的,这种专一性的植物DNA提取试剂盒不一定能提好真菌的DNA.如果有条件你最好是买专一性的真菌DNA提取试剂盒.不过植物DNA提取的CTAB法确实可以适用于真菌的DNA提取,但因为真菌菌丝体含有很多多糖,你需要参考下植物DNA。
我要检测转基因大豆里边的转基因成分,因此需要提取大豆的DNA,再普通的PCR电泳检测是否存在转基因条带,但是我觉得普通的DNA提取试剂盒不能很好的提取大豆里边的DNA,因为大豆不是新鲜的,而且经过一定的加工,里边的DNA片段估计有断裂吧,所以想问问大家,有没有谁提取过转基因植物的DNA,有好用的试剂盒给介绍一下么?
什么公司的DNA提取试剂盒比较好用?
而且比较容易买到,同时提取的DNA便于纯化
我的天哪,这个东西在专业网站上去查,一抓一大把。或者借本《分子克隆》看看,特别详细!
试剂准备:使用前先在SEWS-M Wash Solution中加入100 ml 100%的乙醇,混匀。在瓶子上做好标记,密闭储存于室温条件。提取步骤:1. 在样品处理管E中加入至多500 mg的土壤样品2. 将978 μl的Sodium Phosphate Buffer加入到样品处理管E中3. 再加入122 μl的 MT Buffer(为了得到良好的样品处理效果,请在加入土壤样品及两个缓冲液后,在样品处理管中仍能保留有250 – 500μl 空间)4. 将样品置于FastPrep? 仪器上,样品处理条件一般为,时间:40秒,速度:6.0(如果样品需要额外的处理时间,请在间隔期将样品处理管在冰上孵育至少2分钟,以免样品过热)5. 14,000 x g离心5~10分钟(如果把离心时间延长到15分钟,可以更好地使样品量较大的;或者细胞壁结构较复杂的细胞的碎片沉降到管底)6. 将上清转移到一个干净的2.0 ml离心管中。加入250μL的PPS溶液(蛋白质沉淀溶液),用手摇晃10次,使之充分的混合。7. 14,000 x g离心5分钟,将上清转移到一个干净的15ml管中(此处也可使用2Ml管,但使用大管子能获得更好的混合和DNA绑定效果)8. 重悬硅珠(Binding Matrix)溶液,将1.0 ml重悬液加入该15ml管中。9. 使用振荡器或者手动震荡2分钟,将DNA绑定在硅珠上。将管子置于管架上,静置3分钟,使硅珠沉淀下来。10. 小心地移除500μl的上清液,避免吸取到沉淀下来的硅珠。11. 将硅珠在剩余的上清液中重悬。转移约600μl的重悬液至SPIN? Filter中,14,000 x g离心1分钟。弃去接液管中的废液,将15ml管中剩余的重悬液转移到SPIN? Filter再次离心弃去废液。12. 加入500 μl事先准备好的SEWS-M溶液,用枪头轻轻吹打,小心地重悬沉淀。13. 14,000 x g离心1分钟,弃去废液。14. 不加其他溶液,将SPIN? Filter 14,000 x g离心2分钟,除去残留的SEWS-M溶液。弃去接液管,更换一个新的、干净的离心管。15. 将SPIN? Filter置于室温下晾干5分钟16.轻轻地用50-100 μl 的DES溶液(或者无菌/无DNA酶的水)重悬SPIN filter上的硅珠(为了避免过度稀释纯化出的DNA,请尽量减少DES溶液的量,55?C孵育5分钟能帮助提高纯化产物的得率)17. 14,000 x g离心1分钟使溶解的DNA转移到接液管中。弃去SPIN? Filter(得到的纯化产物可直接用于PCR等其他下游的操作,4°C使用前保存或者-20°C长期保存。)技术优势
能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并最大限度的降低RNA污染。3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切都后续实验之中。5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。注:对于去除腐植酸的方法在使用以下任何一种方法之前,请预先准备5.5M的异硫氰酸胍(Guanidine Thiocyanate)溶液方法A:1.当操作到土壤DNA提取试剂盒的第九步时,使用14,000 x g (~约5秒)的短时离心替代硅珠的自然沉降,移除上清。2.用1ml事先准备好的异硫氰酸胍溶液洗涤、重悬硅珠。3.14,000 x g (~约5秒)短时离心该离心管,除去上清。4.重复上述的洗涤步骤,直到硅珠恢复到原先的颜色。5.最后一次洗涤之后,用1ml的异硫氰酸胍溶液重悬硅珠,将600μl重悬液转移到SPIN filter里,14,000 x g离心1分钟。6.移除接液管中的废液,将剩余的重悬液转移至SPIN filter里,14,000 x g离心1分钟,弃去废液。7.从提取试剂盒操作说明的第十二步开始继续操作。方法B:1.将下列成分混合于1.5ml的离心管中,组成腐植酸洗涤液:978 μl Sodium Phosphate Buffer122 μl MT Buffer250 μl PPS2.充分混匀后,全速离心1分钟,将上清转移到一个新的离心管中(容量大于或等于2ml)3.加入等体积的5.5M的异硫氰酸胍溶液、混匀。4.完成了土壤试剂盒操作说明中的第九步后,将500μl的腐植酸洗涤液加入SPIN filter5.14,000 x g离心1分钟,弃去废液。6.重复上述的洗涤步骤,直到硅珠恢复到原先的颜色。7.从提取试剂盒操作说明的第十二步开始继续操作。
dna提取试剂盒说明书123
ewen71172021-07-23
**推荐性价比高的DNA提取试剂盒,提取分选后的细胞,细胞量不大。
这两个方法有什么区别?那个比较好?有什么要主意的吗?

提取试剂盒的详细步骤是什么?
你好,我要开始做实验了,要从血标本里提DNA,后续用来PCR基因分型,想问下有什么试剂盒性价比比较高的?同学说买试剂最好用进口的,但是打听了凯杰的觉得有点贵,不知道有没有其它进口的试剂盒性价比高的?麻烦尽量回复的详细点,因我刚开始做实验,很多东西不懂,多谢了!
请问各位大神,我实验室有这些试剂盒,QIAprepSpinMiniprepKit(250)、AllPrepDNA/RNAMiniKit(50)、QIAampDNAMiniKit、WizardGenomicDNAPurificationKit,请问这几个提DNA的试剂盒有什么不同吗?
有哪些可以提取细胞中病毒DNA的?或者用其他试剂盒提过呢
坐等回复!