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发布人 0虫虫0 发布时间 2021-08-04

目前我准备做甲基化PCR，由于经费问题，可能无法购买高价的试剂盒。看过甲基化PCR的原理后，在考虑经过修饰后，是否可以用RT-PCR的试剂盒（有现成的）来做甲基化PCR。请大牛指导！另求各位推荐性价比高的亚硫酸盐修饰试剂盒，谢谢！

[原创]亚硫酸氢盐修饰DNA步骤& lt;& lt;DNA methylation& gt;& gt;译稿 ...

发布人 doctoryangjp 发布时间 2021-08-03

亚硫酸氢盐修饰DNA步骤一、内切酶作用体系：（自建立，试过，效果很好）EcoRⅠTaKaRa消化DNA37℃3hddH2O11ulH溶液2ulEcoRⅠ1ulDNA6ul37℃孵育3h二、亚硫酸氢盐修饰过程：（翻译稿）1.用适合的内切酶消化大分子量的DNA（避免目的基因被切割），或者通过把DNA悬于蛋白酶k/SDS缓冲液，通过26gaugeneedle5次，37℃孵育30min（降低DNA大小，利于充分变性）2.加2.2ul新鲜配制的3MNaOH到18ulDNA样品中，搅拌混匀，短暂离心。3.3...

基因组编辑的技术.pdf全文可读

发布人龙神VM59VJ 发布时间 2021-08-02

虽然CRISPR有许多优点。三种系统的比较那么。三个其他的小组利用更系统的方法在人类细胞中评估了CRISPR的脱靶活性。例如，CRISPR能使基因组更有效地产生变化或突变，具有Cas9n的gRNAs的碱基对能够诱导具有徒步部分的DSBs，其中比较典型的模式是依靠一个复合物。相反。因为CRISPR产生了一个非粘性末端, 1996)，并且其酶促死的版本也可以通过慢病毒进行传递。当前，并且产物具有可扩展性，细胞系和转染方法。 TALEN TALENs中文名是转录激活因子样效应物核酸酶，在在II型C...

邓子新团队DNA骨架硫修饰研究获新突破—新闻评论

发布人 freelane 发布时间 2021-07-31

邓子新团队DNA骨架硫修饰研究获新突破------发现两种全新的细胞自我防卫机制来源：上海交通大学近日，上海交通大学邓子新院士团队对DNA骨架硫修饰生物学意义的研究又获得两项突破。聚焦核酸研究的著名国际学术刊物《核酸研究》（NucleicAcidsResearch）以特写文章（Featuredarticle）发表了由该团队由德林副教授主持，博士生徐铁刚和姚芬为共同第一作者的论文——“沙门氏菌中与DNA骨架上硫修饰直接关联的一种新的限制系统”。该论文报道了一种新的宿主专一性限制-修饰系统，它与以前...

DNA水解酶可以彻底水解DNA分子吗雨露学习互助

发布人灼眼丶夏娜侄发布时间 2021-07-30

不存在不能被DNA水解酶水解的DNA。　　DNA水解酶，用于切断磷酸二酯键的酶，这些酶使糖-磷酸酯主链上的磷酸二酯键水解.一般分为两种：外切核酸酶和内切核酸酶。　　简介：　　原理　　DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。在实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DN...

【求助】甲基化修饰中DNA模板的浓度与修饰量的问题核酸基因...

发布人 danbai 发布时间 2021-07-29

想请问各位，甲基化修饰后测量DNA的浓度一般是多少啊？修饰前有250ng/ul，修饰后只有25ng/ul，请问你们测的修饰后的浓度有多少？我的值正常吗？这个浓度做pcr行吗？要上多少微升dna啊。

275第十四章基因工程技术原理与应用

发布人詛躷囖48 发布时间 2021-07-27

基因工程中聚合酶不是基本酶的原因：DNA聚合酶是将单个的脱氧核苷酸加到原有的DNA片段上的，所以不用！DNA聚合酶是不论何种片段强制连接的，而聚合酶是连接有特定顺序的碱基对片段的DNA。基因工程常见几种酶比较：DNA聚合酶：在DNA复制时起作用，将多个脱氧核苷酸催化聚合为脱氧核苷酸链（也就是DNA单链），此时形成的化学键是磷酸二酯键。DNA解旋酶：在DNA复制或转录时起作用，将DNA的双链解开，作用对象是氢键，使氢键断裂 DNA水解酶：在消化道或细胞内起作用，将DNA水解为脱氧核苷酸，作用...

什么是酶,名词解释定义是?_

发布人 kaiyue1211 发布时间 2021-07-26

这种问题只能问佳学基因解码专家。

【求助】DNA的甲基化修饰

发布人萝莉控听说123456 发布时间 2021-07-24

今天晚上开始做甲基化修饰DNA实验，由于没有试剂盒，需要自己配置所有容易来进行修饰。晚上溶解亚硫酸氢钠时，由于太晚了，着急走，就在管子底部还有少许结晶沉淀的情况下，就加入到EP管中了。这样对于整个甲基化修饰影响大吗？？担心啊。

限制酶为什么不切自身DNA？_

发布人 Love柯南300 发布时间 2021-07-23

限制性核酸内切酶是可以识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶，简称限制酶。自身dna没有这个特异序列

【交流】甲基化:求重亚硫酸盐修饰后DNA碎裂的改进策略遗传学与...

发布人 waterf21 发布时间 2021-07-22

本人甲基化菜鸟，最近用的EpiTectBisulfiteKit（Qiagen）重亚硫酸盐试剂盒，修饰前OD260/OD280测得值1.8左右，DNA浓度10-20ng/ul，修饰后测得DNA浓度20-30ng/ul，并且OD260/OD280测得值大于3.0，考虑DNA碎裂，单核苷酸形成。各位对下述问题有何建议：1.怎样防止DNA碎裂（亚硫酸盐处理试验期间，DNA保护buffer有效）。2.什么公司的重亚硫酸盐修饰试剂盒处理后的DNA较稳定，可以继续后续试验。谢谢！

核酸酶发展历史

发布人 TSˊ控白发布时间 2021-07-21

20世纪70年代，在细菌中陆续发现了一类核酸内切酶，能专一性地识别并水解双链DNA上的特异核苷酸顺序，称为限制性核酸内切酶（restriction endonuclease，简称限制酶）。当外源DNA侵入细菌后，限制性内切酶可将其水解切成片段，从而限制了外源DNA在细菌细胞内的表达，而细菌本身的DNA由于在该特异核苷酸顺序处被甲基化酶修饰，不被水解，从而得到保护。限制性核酸内切酶的研究和应用发展很快，已提纯的限制性核酸内切酶有100多种，许多已成为基因工程研究中必不可少的工具酶。限制性核酸内切酶...

【转帖】PNAS:DNA修饰可控制个体恐惧感医药生命科学动态跟踪...

发布人 ximenchuixue 发布时间 2021-07-20

研究称DNA修饰可控制个体恐惧感来自昆士兰大学昆士兰脑研究所的神经学家或许发现了控制个体产生恐惧感的方法对许多人来说，类似乘坐飞机或看到蜘蛛在地板上爬过这样的经历，并不只是简单地导致心跳加速和手心出汗，而是已经成为严重的恐惧症，能带来沉重的焦虑。近日，一个国际研究团队的论文指出，他们或许发现了通过DNA修饰来控制个体恐惧感的方法。昆士兰大学昆士兰大脑研究所（QBI）的高级研究员、神经科学家TimothyBredy博士称，研究团队阐明了如何缓解与恐惧相关的记忆，特别是在恐惧症或创伤后精神压力障碍的...

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