CRISPR Cas9系统目前的研究热点在什么方面

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2017-10-02

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1.什么是CRISPR/Cas9？CRISPR----Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats 是在细菌和古细菌中广泛存在的成簇的、有规律的、间隔的短回文重复序列。07年，发现细菌可以用CRISPR系统抵抗噬菌体的入侵；08年，发现细菌的CRISPR系统能够阻止外源质粒的转移。是细菌的一种获得性免疫系统。Cas----CRISPR-associated CRISPR/Cas9----CRIPSR-Cas系统分为Type I、TypeII 、Type III三种类型。在TypeII 系统中包含一个标志性的Cas9蛋白（参与crRNA的成熟以及降解入侵的噬菌体DNA或外源质粒)。CRISPR/Cas系统和Cas9蛋白结合成复合体，发挥识别和降解入侵的外源DNA功能。2.CRISPR/Cas9的优缺点优点：构建方便简单快捷高效的介导基因定点敲入和基因组的点突变精确的切口酶活性提高了基因治疗的安全性缺点：严重的脱靶性3.CRISPR/Cas9的用途 CRISPR/Cas9被改造成第三代人工核酸内切酶（前两代分别是ZFN和TALEN），用于复杂基因组的编辑，目前该技术应用于人类细胞、斑马鱼、小鼠及细菌的基因组精确修饰。4.CRISPR/Cas9目前热点CRISPR/Cas9有个极大的优势就是可以改造为切口酶，在DNA的特定位置制造单链切口，这样不会引起非同源末端连接，但是可以激活同源细胞的重组。这套系统目前的主要用途是在以下几个方面：基因定点InDel突变基因定点敲入两位点同时突变小片段的缺失编码基因和非编码基因（lncRNA、microRNA）的靶向基因敲除

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基因编辑

CRISPR基因敲除转染试剂 CRISPR 细胞株 RNA干扰

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核酸酶类

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