定量PCR相关问答列表_蚂蚁淘，【正品极速】生物医学科研用品轻松购|ebiomall

发布人浅浅灰2010 发布时间 2021-08-05

定量pcr主要测的是基因的表达水平，比如不同时期基因的表达有所差异，具体差异了多少倍，就可以使用了。

发布人执xx丶439 发布时间 2021-08-04

荧光定量PCR是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品模板的初始浓度。|||原理不同：荧光定量pcr实时监测与dna结合的荧光染料激发的荧光；普通pcr通过检测插入dna中核算染料的量来测定pcr最终产物量，一般是紫外光。反应要求：荧光定量对扩增片段有较高的要求，一般为100-300bp；普通定量可以扩增长点的片段。如果不需要检测产物分子量大小，荧光定量可以不进行电泳就对产物进行定量分析，普通pcr必须...

PCR和实时荧光定量PCR这两种有什么区别？希望能稍微介绍一下这...

发布人发布时间 2021-08-03

实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。PCR(聚合酶链式反应）是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。恒温PCR和实时荧光定量PCR的不同，是不同在实时荧光定量PCR的系统中加入了荧光染料（SYBR Gre...

怎么看荧光定量PCR的试剂盒好不好

发布人 OneShine往圣生物发布时间 2021-08-02

一般说来，应选用口碑较好的经过大量客户实验验证的荧光定量PCR试剂盒，因为只有选对了试剂盒才能够做成漂亮的实验结果来，特别是对于一些珍贵的样品更不能因为节约一些蝇头小利而糟蹋了样品本身。OneShineSybrGreenpreMix试剂盒在研发之初就考虑到了一般科研环境中方方面面的影响，例如我们就光照强度、光照时间对本产品的影响做了严苛的实验论证，得到1ml本产品盛装于1.5ml离心管中放置在2000Lux光照强度下可以保存12h，超过12h产品性能则会下降。OneShineSybrGreenp...

【求助】real time PCR 能否用普通taq酶系统来做? 核酸基因技术...

发布人 tinkocoldmoon 发布时间 2021-08-01

最近要做realtimePCR，taqman探针法，没有买市场上的产品，可否先用普通taq酶试试？这样设想的前提是因为，普通Taq酶也具有5‘－3’外切酶活性，如果可以的话，与普通PCR相比，反应体系需要做什么样的改动呢？用的是ABI的机器。

求助:荧光定量PCR标准曲线稀释核酸基因技术讨论版论坛

发布人雾都丑鱼发布时间 2021-07-31

求助各位大侠，最近做的荧光定量PCR，标准曲线稀释一直不好，请教各位，采用的标准品是自己提的细胞基因组，浓度最高从125ng/uL，5倍稀释，到最低0.2ng/uL，问题如下：1.最后一个浓度做出来的扩增曲线重复性非常差，而且与前一个浓度梯度CT值差值约为5左右，稀释过程与前几个浓度时操作一致。2.待测样品中目标基因若含量高，则重复性尚可，若含量略低，Ct值在30及以上，重复性也很差。说明，1、每个标准曲线浓度的稀释操作均一致，涡旋混匀时间>15s2、所用移液枪无问题，枪头为低吸附枪头3、...

求助miRNA定量PCR!!!! PCR技术讨论版论坛

发布人凌维俊发布时间 2021-07-30

有大神做过人外周血全血miRNA的提取及后续PCR实验的吗？目前课题实验遇到瓶颈，求助大神！！！是否miRNA的PCR验证在全血做不出？必须要用血浆或者血清？目前血浆、血清也有部分样本。。。。有大神指条明路吗？

荧光定量PCR方法简介

发布人发布时间 2021-07-29

荧光定量PCR是400什么意思

为什么要做荧光定量PCR?用最实用的讲法说下,谢谢

发布人小豪°2395 发布时间 2021-07-28

为什么荧光定量pcr可以准确定量实时定量的引物设计要求比较高，可以按普通引物设计的方法来做，但是设计时要注意扩增的片段不能太大，最好在250bp-100bp之间。同时要保证这对引物有绝对的特异性，因为要是产生非特异性扩增的话，就不能准确的计量模板量了，这样就失去了实时定量的意义了用已知浓度的DNA样本（通常是质粒）梯度稀释成一系列的样本。做实验的时候，这些标准品和待测样本加在同样一块96孔盘的不同孔内。一起做PCR。标准品的荧光强度和已知的浓度作图，可以得到一条标准曲线。而待测样本的荧光强度测出...

实时荧光定量pcr内参是什么东西

发布人 yunshui1986 发布时间 2021-07-27

怎么知道自己要买哪个内参

Taq DNA聚合酶无5′→3′外切酶活性。_

发布人魔蝎大帝360 发布时间 2021-07-26

般taq酶没5‘-3’外切性现些酶比TAKARAEx-Taq5‘-3’外切性主要减少错配提高保真率再PrimerStar 另外pfu酶近用比较保真性介于ExPS间挺用扩增效率没

解答使用荧光定量pcr仪时的常见问题

发布人 shiqinghuayi1 发布时间 2021-07-25

第一次做这方面的实验，这张图的右半个不会选，希望大家帮帮忙

qPCR曲线正常,但溶解曲线杂乱无章,可能是什么原因呢? 分子生物...

发布人半度微凉灬发布时间 2021-07-24

实时荧光定量PCR溶解曲线杂乱是什么原因？调退火温度有用吗？怎么能改善啊

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