请使用支持JavaScript的浏览器! +,Peptides , Antimicrobial and Related Peptides , LL17-29; This peptide is an active segment of LL-37, a peptide derived from the C-terminal domain of human cathelicidin antimicrobial peptide. This peptide purportedly exhibits high antibacterial activity.蚂蚁淘商城
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Anaspec/LL17 - 29/5 mg/AS-65454-5
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Anaspec/LL17 - 29/5 mg/AS-65454-5
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Anaspec
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AS-65454-5
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DescriptionSequence(One-Letter Code)
Product NameLL17 - 29FKRIVQRIKDFLR
Size5 mg
Catalog #AS-65454-5
US$$158
PurityPeak Area by HPLC ≥95%

This peptide is an active segment of LL-37, a peptide derived from the C-terminal domain of human cathelicidin antimicrobial peptide. This peptide purportedly exhibits high antibacterial activity.

Detailed InformationDatasheet
Material Safety Data Sheets (MSDS)
Storage-20°C
ReferencesDürr, UHN. et al. Biochim Biophys Acta 1758, 1408 (2006); To, KK. et al. Peptides 40,13 (2013).
Molecular Weight1719.1
FKRIVQRIKDFLR
Sequence(Three-Letter Code)H - Phe - Lys - Arg - Ile - Val - Gln - Arg - Ile - Lys - Asp - Phe - Leu - Arg - OH
Product CitationsYu, G. et al. (2016). Combination effects of antimicrobial peptides Antimicrob Agents Chemother doi: 10.1128/AAC02434-15.
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实验室有毒常用药品0.溴化乙锭(EB):大家都比较熟悉了。具有强诱变致癌性,使用时一定要戴一次性手套,注意操作规范,不要随便触摸别的物品。1.DEPC(焦碳酸二乙酯):闻起来香香甜甜的,可是害人不眨眼!一种强有力的蛋白质变性剂,而且怀疑是致癌剂.开瓶时将瓶子远离你,内压可导致溅泼.操作时戴合适 查看更多>
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生化分析仪又常被称为生化仪,是采用光电比色原理来测量体液中某种特定化学成分的仪器。由于其测量速度快、准确性高、消耗试剂量小,现已在各级医院、防疫站、计划生育服务站得到广泛使用。配合使用可大大提高常规生化检验的效率及收益。... 查看更多>
一、原理 1949年Barr等发现,在雌性体细胞中的两条X染色体有一条(或这条的大部分)处于凝集不活动状态,从而形成X-小体(或称X-染色质、性染色质、Barr小体)。进而发现,所有哺乳类雌体细胞中都有一条这种表现的X染色体,当在个用雌或雄体中,有多于2条X染色体时,在间期细胞内除一条外,其余均 查看更多>
Materials Needed20ml glass scintillation vial Small stir bar Foil Glycerol 1X PBS Pipets * P-phenylenediamine ( EMD Chemicals Inc. Cat# PX0730) Carbonate-Bicar 查看更多>
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fcm常用的荧光染料有哪些
因外用杀精避孕药机理研究的需要,求助目前较新的有关精子流式细胞检测的实验资料,请各位大侠不吝赐教!
溴化乙锭通过嵌入碱基之间而与DNA结合,进而使双螺旋解旋。由此导致线状DNA的长度有所增加,作为补偿,将在闭环质粒DNA中引入超螺旋单位。最后,超螺旋度大为增加, 从而阻止了溴化乙锭分子的继续嵌入。但线状分子不受此限,可继续结合更多溴化乙锭,直至达到饱和( 每2个碱基对大约结合1个溴化乙锭分子) 。由于染料的结合量有所差别,线状和闭环DNA分子在含有饱和量溴化乙锭的氯化铯度中的浮力密度也有所不同。多年来,氯化铯-溴化乙锭梯度平衡离心已成为制备大量质粒DNA 的首选方法。然而该过程既昂贵又费时,为此发展了许多替代方法。其中主要包括利用离子交换层析、凝胶过滤层析、分级沉淀等分离质粒DNA和宿主DNA的方法。尽管这些方法大多数均被束之高阁,但其中最好的方法,也应是聚乙二醇分级沉淀法。
从大肠杆菌细胞中分离质粒DNA的方法众多,其分离的依据可利用分子大小不同,碱基组成的差异以及质粒DNA的超螺旋共价闭合环状结构的特点来进行。碱基性法抽提效果良好,既经济且得率较高。抽提到的质量DNA可用于酶切、连接和转化。对于分子量较大拷贝较少对的质粒DNA,由于DNA片段较大易于损伤断裂,因此选用吕华铯密度超高离心法抽提DNA,且具有纯度高、步骤少、方法稳定且获得的质量DNA是超螺旋构型等特点。对于高拷贝数质粒,用少量制备法抽提质粒DNA就有足够量可用于基因操作。

质粒DNA纯化的试验步骤:
测量DNA溶液的体积,按lg/ml的用量精确地加入固体CsCl, 将溶液加温至30℃助溶。温和地混匀溶液直到盐溶解。
每10mlDNA溶液加入0.8ml溴化乙锭溶液(10mg/ml溶于水);立即将溴化乙锭溶液(漂浮在表层)与DNA-氯化铯溶液混匀, 溶液的终密度应为1.55g/ml(溶液的折射率为1.3860)溴化乙锭浓度大约740μg/ml。【溴化乙锭贮存液应贮存于避光容器内(如用锡箔完全包裹的瓶子),于室温保存。
室温下用Sorvall SS34头(或与其相当的转头)以8000rpm离心5min, 浮在溶液上面的水垢状浮渣是溴化乙锭和细菌蛋白所形成的复合物。
用巴斯德吸管或带大号针头的一次性注射器将浮渣下的清亮红色溶液转移到离心管中。用轻石蜡油加满管的其余部分并封口。
以20℃对所得的密度梯度以45 000rpm离心16h(VTi65 转头)、 以45 000rpm离心48h(Ti50转头)、以60 000rpm离心24h(Ti65转头)或者以60 000rpm离心24h(Ti70.1转头)。普通光照下,在梯中心可见两条DNA区带, 上部区带材料通常较少,由线状的细菌(染色体)DNA和带切口的环状质粒DNA组成:下部区带则由闭环质粒DNA组成。管底部深红色的沉淀是溴化乙锭RNA复合物,位于CsCl溶液和石蜡油之间的是蛋白质。Beckman Quick-Seal离心管中的CsCl-溴化乙锭梯度可容纳4mg 闭环质粒DNA而不至超负荷。如有更大量的质粒存在,将扩展为一条宽带,并与染色体DNA相重叠。这种问题只有在质粒复制达到极高水平时才会出现,只要将该质粒提取物分为2个梯度即可解决。如出现负荷,可收集整个DNA区高产水平时才会出现,只要将该质粒提取物分为2个梯度即可解决。如出现超负荷,可收集整个DNA区带,用CsCl溶液(ρ=1.58g/ml)将体积调到15ml,在两个离心管中再度离心,使DNA达到平衡。
收集DNA带。将21 号皮下注射针头插入管的顶端以使空气进入,为尽量减少污染的机会,首先用18号皮下注射针头按下述方法收集上部的区带(杂色体DNA):用乙醇小心擦拭管外壁以除去任何油脂,然后将一块Soctch胶带贴于管外壁。穿过Soctch胶带将18号皮下注身针头(其斜面向上)插入管中,以便使针头的斜面开口恰好位于染色体DNA区带之下并与该区带相平行。将粘稠状DNA收集到一次性使用的管内,用造型粘土块封住皮下注射针头的末端并将第2根针头留于原处。 穿过Soctch 胶带插入第3根皮下注射针头(18号),将下部的质粒DNA区带收集到玻璃或塑料管中。展开
想问一下各位大侠提质粒时用的是那个公司的试剂盒呀?我的扩增荧光增量一直不是很高,而且作为被动参比的ROX信号比FAM的基线部分高很多,不知是不是质粒的质量不好造成的。
所以想请大家给推荐一个效果好的最好是国产的质粒提取试剂盒。
多谢!
1.无Ct值出现
  检测荧光信号的步骤有误:一般SG法采用72℃延伸时采集,Taqman法则一般在退火结束时或延伸结束采集信号。
  引物或探针降解:可通过PAGE电泳检测其完整性。
  模板量不足:对未知浓度的样品应从系列稀释样本的最高浓度做起。
  模板降解:避免样品制备中杂质的引入及反复冻融的情况。
  2.Ct值出现过晚(Ct>38)
  扩增效率低:反应条件不够优化。设计更好的引物或探针;改用三步法进行反应;适当降低退火温度;增加镁离子浓度等。
  PCR各种反应成分的降解或加样量的不足。
  PCR产物太长:一般采用80-150bp的产物长度。
  3.标准曲线线性关系不佳
  加样存在误差:使得标准品不呈梯度。
  标准品出现降解:应避免标准品反复冻融,或重新制备并稀释标准品。
  引物或探针不佳:重新设计更好的引物和探针。
  模板中存在抑制物,或模板浓度过高
  4.负对照有信号
  引物设计不够优化:应避免引物二聚体和发夹结构的出现。
  引物浓度不佳:重庆新桥医院网上预约挂号www.cqxqyy.net适当降低引物的浓度,并注意上下游引物的浓度配比。
  镁离子浓度过高:适当降低镁离子浓度,或选择更合适的mix试剂盒
  模板有基因组的污染:RNA提取过程中避免基因组DNA的引入,或通过引物设计避免非特异扩增。
  5.溶解曲线不止一个主峰
  引物设计不够优化:应避免引物二聚体和发夹结构的出现。
  引物浓度不佳:适当降低引物的浓度,并注意上下游引物的浓度配比。
  镁离子浓度过高:适当降低镁离子浓度,或选择更合适的mix试剂盒。
  模板有基因组的污染:RNA提取过程中避免基因组DNA的引入,或通过引物设计避免非特异扩增。
  6.扩增效率低
  反应试剂中部分成分特别是荧光染料降解。
  反应条件不够优化:可适当降低退火温度或改为三步扩增法。
  反应体系中有PCR反应抑制物:一般是加入模板时所引入,应先把模板适度稀释,再加入反应体系中,减少抑制物的影响。
  7.同一试剂在不同仪器上产生不同的曲线,如何判断?
  判断标准:扩增效率,灵敏度,特异性
  如果扩增效率在90%-110%,都是特异性扩增,都可以把数据用于分析。
  8.扩增曲线的异常?比如“S”型曲线?
  参比染料设定不正确(MasterMix不加参比染料时,选NONE)
  模板的浓度太高或者降解
  荧光染料的降解
相关疾病:原发性肝癌肿瘤先天性卵巢发育不全综合征新研究表明,对不宜手术切除的肝细胞癌(HCC)和门静脉血栓形成病人,动脉内注射放射性90钇玻璃微球(加拿大渥太华MDSNordion公司的ThereSphere)似乎安全,而且耐受性好。  这种新治......
流式细胞术(FCM)简介123
莠琹鮓瑂侏2018-01-17
CV是流式做仪器校准的时候,使用标准品的荧光微球来测量的。每个厂家的要求不一样。比如BD的CS&T要求是小于6%
普通的节能灯,日光灯发出的光各种波长都有,波长范围很宽。激光单色性很好,波长范围很窄,波长650nm指的是这种激光笔发出的光波长在650nm附近很窄的范围里。可见光的波长范围在390—770纳米之间。红:770—622nm;橙:622—597nm;黄:597—577nm;绿:577—492nm;蓝靛:492—455nm;紫:455—390nm。650nm应该是红光。所以是红色光的激光笔。
对不同材料来说不同,绝大多数情况下,发射波长会随着激发波长的偏移而有所偏移。 对于固态物质,主要是因为分子与其它材料形成了π建 对于量子点溶液,激发波长也会显著导致发射光谱的不同。但是不是绝对的,比如对于Alex555分子,发射波长的便宜往往就相对较小,这是由于分子内部的能带结构所决定的。 如果是单纯的回答问题,答案是:有关。
流式细胞术中荧光补偿该如何调节?
以FITC和PE为例来看光谱重叠。FITC单染管的荧光会部分漏到PE通道中,而这部分需要从PE通道中减掉溢漏过来的FITC荧光。那么荧光补偿该如何调节呢?l 调节电压l 检测荧光通道的自发荧光l 每个荧光通道做单染管对照检测何为单染管对照?l 细胞l 补偿微球细胞通常是流式抗体单染管对照的样本首选,但是当细胞数量有限,无多余细胞用于抗体单染或感兴趣的表面抗原表达较低,阳性分群不明显不足以用来调节补偿时,建议选择补偿微球。补偿调节时要注意:l 使用未染色的细胞做PMT的电压设置l 不要使用未染色的补偿微球设置电压eBioscience提供两种补偿微球:OneComp eBeads与UltraComp eBeads。微球大小和淋巴细胞相当,可连接各种荧光标记的抗体来调节补偿。每滴微球中都含有两群:一群是可以结合抗体的阳性群,一群是不会与抗体反应的阴性群。优点:l 使用方便,一滴即可l 使用实验抗体与微球有效结合调节补偿,无需再用CD4分群来调节l 细胞替代物,适应各种孵育时间,结果稳定流式细胞术中荧光补偿该如何调节?l 能与各种种属和亚型的抗体反应ProductSpecies CompatibilityChain RecognitionFeaturesMouse IgRat IgHamster IgRabbit IgKappa Light ChainLambda Light ChainOne DropOne VialAll cell sizesViolet LaserUltraComp eBeads 01-2222√√√√※√√√√√√OneComp eBeads 01-1111√√√√※√√√√√Competitor X Anti-Mouse Ig, k√√Competitor X Anti-Rat Ig, k√√Competitor X Anti-Rat/Hamster Ig, k√√√Competitor X Plus Anti-Mouse Ig, k√√Competitor X Plus Anti-Rat Ig, k√√Competitor Z Anti-Mouse Bead Kit√√√
竞争品牌的微球是分种属的,使用不同抗体要购买多个产品以使用注:兔来源的抗体与微球结合力较弱,但某些还是可以使用l 适用于各种激发光---适用于488 nm 蓝光,532 nm 绿光,561 nm 黄光,633-635 nm 红光,UltraComp eBeads尤其适用紫外 (355 nm) 或者 紫色 (405 nm) 激光器l 微球本身信号经过优化适合补偿调节l 价格相当,有小包装操作步骤:1. 准备好流式管,每种荧光抗体一个;2. 将微球翻转或者涡旋混匀;3. 在每管中加入一滴微球;4. 在管中分别加入相应的 1 test 抗体(不同抗体 1 test 的用量不同,具体参见说明书);5. 敲击或者涡旋混匀;6. 2-8℃暗处孵育 15-30 分钟;7. 每管加 2ml 流式染色缓冲液,400-600 x g 离心 3-5 分钟;8. 弃上清,每管加入 0.2-0.4 mL 流式染色缓冲液;9. 混匀后上机分析
做荧光定量PCR的TAKARA的SYBR荧光染料保存于-20摄氏度了,说明书上说要放于4摄氏度保存,放-20的话会影响SYBR荧光染料的效果。

现在已经保存于-20度了,而且经过了很多次的反复冻融,这样对实验结果的影响有多大?

1.取10mg荧光微球液体置于合适大小的离心管中,加入4mlMES缓冲液,混匀,离心(12000r/min),倾倒上清。

2.加入1mlMES缓冲液,超声重悬。

3.在装有1.5mgEDC和3mgNHS的离心管中分别加入300μl和600μlMES缓冲液,都配制成浓度5mg/ml,混匀。

4.加入配置好的NHS溶液0.2ml,EDC溶液0.1ml,混匀。

5.离心(12000r/min),得不到稳定沉淀。

想请教各位高手,为什么我加EDC和NHS活化之后离心得不到沉淀,所用荧光微球粒径196nm



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