消化法中常使用的酶有3种:胰蛋白酶、胶原酶I或Ⅱ以及透明质酸酶,透明质酸酶多与胰蛋白酶或胶原酶联合应用;胶原酶作用较缓和,能消化细胞间质中的胶原纤维以释放细胞,对细胞损伤小,以胶原I为主。
胰蛋白酶(简称胰酶)是广泛应用的消化剂.胰蛋白酶是一种胰脏制品,对蛋白质有水介作用,主要作用于赖氨酸或精氨酸相连接的肽键,使细胞间质中的蛋白质水介而使细胞分散开,在常用的蛋白酶中由于产品的活力和纯度不同,对细胞的消化能力也不同,胰蛋白酶对细胞的作用,取决于细胞类型、酶的活力、配制的浓度、消化的温度、无机盐离子、pH以及消化时间的长短等.胰蛋白酶作用较强,容易造成平滑肌细胞损坏;
胶原酶是一种从细菌中提取出来的酶,对胶原有很强的消化作用.适于消化纤维性组织、上皮组织以及癌组织,它对细胞间质有较好的消化作用,对细胞本身影响不大,可使细胞与胶原成分脱离而不受伤害.该酶分离效果好,即使有钙、镁离子存在仍有活性,故可用PBS和含血清的培养液配制,即操作简便又可提高细胞成活率,zui终浓度200u/mL此酶消化作用缓和,无需机械振荡,但胶原酶价格较高,大量使用将增加实验成本,所以选择价廉物美的胶原酶是关键,所以不光要看重量还要看每MG的活性单位.
胶原酶的化学名为胶原蛋白水解酶(Collagenase),它能在生理PH和温度条件下特异性地水解天然胶原蛋白的三维螺旋结构,而不损伤其它蛋白质和组织。胶原酶的化学本质是一种蛋白质,因此,这对温度、PH和导致蛋白质变性的各种因素均非常敏感,极易受到外界条件的影响而改变其本身的构象和性质。
胶原酶(collagenase)是从溶组织梭状细胞芽孢杆菌提取制备的,主要水解结缔组织中胶原蛋白成分。当拟消化的组织较硬,内含较多结缔组织或胶原成分时,用胰蛋白酶解离细胞的效果较差,这时可采用胶原酶解离细胞法。胶原酶仅对细胞间质有消化作用而对上皮细胞影响不大。因此适于消化分离纤维性组织、上皮及癌组织,可使上皮细胞与胶原成分分离而不受损害。常用剂量为zui终浓度200U/ml。胶原酶分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型以及肝细胞专用胶原酶,要根据所要分离消化的组织类型选择胶原酶类型。
中文名称:I型胶原酶、II型胶原酶、IV型胶原酶、V型胶原酶
英文名称:CollagenaseI、CollagenaseII、CollagenaseIV、CollagenaseV
CAS号:9001-12-1
规格:100mg,1g,5
产地:WorthingtonsigmaInvitrogen
外观:棕色或棕褐色结晶状冻干粉;
保存:-20C
胶原酶配制方法和胰蛋白酶的配制方法一致,只是要注意标签中的活性单位,zui终配制成为200u/mL就可以了.,
胰蛋白酶的配制、过滤除菌与分装过程
准备样品:干粉,PBS缓冲液,离心管两个、冻存管20个、盒子一个、枪头1盒、灭菌器、注射器。
准备工作:将离心管、冻存管装载盒子中高温高压灭菌。
配制:
1.称取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液浓度0.25%用电子天平准确称取粉剂50mg溶入离心管PBS(PH到7.2左右)液中。搅拌混匀,置于4℃内12小时。
2.用注射滤器抽滤消毒:配好的胰酶溶液要在超净台内用注射滤器(0.22微米微孔滤膜)抽滤除菌。
3.分装:将除菌之后的胰蛋白酶用移液枪分装至
A:CollagenaseI(胶原酶I型):主要用于上皮、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的分离。
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LS004194
CollagenaseI(胶原酶I型)
100mg
476
Worthington
LS004196
CollagenaseI(胶原酶I型)
1gm
2464
Worthington
LS004197
CollagenaseI(胶原酶I型)
5gm
10360
Worthington
17100-017
CollagenaseI(胶原酶I型)
1g
3025
invitrogen
C0130-100MG
CollagenaseI(胶原酶I型)
100mg
526.5
sigma
C0130-500MG
CollagenaseI(胶原酶I型)
500MG
1473.03
sigma
C0130-1G
CollagenaseI(胶原酶I型)
1G
2208.96
sigma
C0130-5G
CollagenaseI(胶原酶I型)
5G
6113.25
sigma
B:CollagenaseII(胶原酶II型):适用于肝脏,骨,甲状腺,心脏和唾液腺组织细胞的分离。
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LS004177
CollagenaseII(胶原酶II型)
5gm
10360
Worthington
LS004176
CollagenaseII(胶原酶II型)
1gm
2464
Worthington
LS004174
CollagenaseII(胶原酶II型)
100mg
476
Worthington
17101-015
CollagenaseII(胶原酶II型)
1g
3025
invitrogen
C6885-25MG
CollagenaseII(胶原酶II型)
25MG
508.95
sigma
C6885-100MG
CollagenaseII(胶原酶II型)
100mg
778.05
sigma
C6885-500MG
CollagenaseII(胶原酶II型)
500MG
1,980.81
sigma
C6885-1G
CollagenaseII(胶原酶II型)
1G
2,971.80
sigma
C6885-5G
CollagenaseII(胶原酶II型)
5G
7,926.75
sigma
C:CollagenaseIII(胶原酶III型)对哺乳动物的组织有广谱的消化作用
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LS004182
CollagenaseIII(胶原酶III型)
1gm
2464
Worthington
LS004183
CollagenaseIII(胶原酶III型)
5gm
10360
Worthington
LS004180
CollagenaseIII(胶原酶III型)
100mg
476
Worthington
D:CollagenaseIV(胶原酶IV型):胶原酶Ⅳ包含至少7中蛋白酶成分,分子量从68-130KD不等。它能消化多种组织,对哺乳动物的组织有广谱的消化作用。
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17104-019
CollagenaseIV(胶原酶IV型)
1g
3025
invitrogen
C5138-25MG
CollagenaseIV(胶原酶IV型)
25MG
452.79
sigma
C5138-100MG
CollagenaseIV(胶原酶IV型)
100mg
772.20
sigma
C5138-500MG
CollagenaseIV(胶原酶IV型)
500MG
2,530.71
sigma
C5138-1G
CollagenaseIV(胶原酶IV型)
1G
4,095.00
sigma
C5138-5G
CollagenaseIV(胶原酶IV型)
5G
15,420.60
sigma
LS004189
CollagenaseIV(胶原酶V型)
5gm
10360
Worthington
LS004188
CollagenaseIV(胶原酶V型)
1gm
2464
Worthington
LS004186
CollagenaseIV(胶原酶V型)
100mg
476
Worthington
E:CollagenaseV(胶原酶V型):胶原酶Ⅴ包含至少7中蛋白酶成分,分子量从68-130KD不等。它可用于胰腺小岛组织的分离,结缔组织分离。
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LS005283
CollagenaseV(胶原酶V型)
5gm
12460
Worthington
LS005282
CollagenaseV(胶原酶V型)
1gm
2968
Worthington
LS005280
CollagenaseV(胶原酶V型)
100mg
588
Worthington
C9263-25MG
CollagenaseV(胶原酶V型)
25MG
469.17
sigma
C9263-100MG
CollagenaseV(胶原酶V型)
100mg
625.95
sigma
C9263-500MG
CollagenaseV(胶原酶V型)
500MG
1,814.67
sigma
C9263-1G
CollagenaseV(胶原酶V型)
1G
2,845.44
sigma
C9263-5G
CollagenaseV(胶原酶V型)
5G
5,686.20
sigma
我们公司zui大优势是强大的采购,
1:基本什么都能进口,血清,抗体,耗材,还有部分限制进口的,
2:货品全,现经营过700多个品牌,基本所有生物试剂耗材都可以进口,特别是冷偏的产品那就更有优势,
3:提供加急服务,一般1-2周到货,超过时限加急费全免
4:价格公道,绝大部分价格有优势,当然不能保证100%产品都有价格优势,
5:良好的信誉,大部分客户我们提供货到付款服务,客户包括清华,北大交大复旦,中山等100多所大学,Roche,阿斯利康,国药,fisher等500多家公司
6:我们还是santa,AdvancedBiotechnologiesInc;AthensResearchTechnology,bangs,BBInternational,CrystalChem,dianova,FDNeurotechnologies,Inc.FormuMaxScientific,Inc;GeNEBridege;GlycotopeBiotechnologyGmbH;Iduron;InnovativeResearchofAmerica;Ludger;Neuroprobe;omicronbio;polysciences;Prospecbi;QA-Bio;quickzyme;RESEARCHDIETS,INC;sterlitech;sysy;TriLinkBioTechnologies,Inc;worthington-biochem;Zyagen;......几十家国外公司授权代理
7:我们还从事invitrogen,Qiagen;abcam;sigma;neb;roche;Merck;rnd;BD;GE;Pierce;Biolegend....等大品牌批发
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