震旦打印机官网｜打印机/复印机购买、租赁首选品牌 AURORA
| 实验材料 | 动物组织 试剂、试剂盒 | 乙酸钠-乙酸缓冲溶液β-葡萄糖酸苷酶-硫酸酯酶溶液甲醇正己烷水饱和乙酸乙酯 仪器、耗材 | 离心管HLB固相萃取柱液相色谱条件色谱柱 实验步骤 | 1. 前处理 称取10g样品，准确加入内标溶液（13C-己烯雌酚、13C-睾酮、13C-雌二醇）（20ng/mL）0.5mL，加入10mLpH5.2的乙酸钠-乙酸缓冲溶液，匀浆后，再加入β-葡萄糖酸苷酶-硫酸酯酶溶液10uL，于（37±1）℃振荡酶解过夜。取出冷却后，加入36mL甲醇振荡提取30min，转入离心管2000g离心10min。上清液中加入40mL正己烷提取两次，弃去正己烷层。水-甲醇层中加入0.5mL正丙醇，50℃旋转蒸发去掉甲醇。 HLB固相萃取柱（6mL，500mg）用6mL甲醇、6mL水活化。将旋转蒸发后溶液中加入50mL水，以2～3mL/min的速度过柱，用6mL水洗潘后，萃取柱用氮气吹干。用10mL5 mmol/L三乙胺甲醇溶液洗脱，洗脱液氮气吹干，加入0.3mL三氯甲烷溶解残渣，再加入3mL正己烷用于下一步净化。 桂胶固相萃取柱（6mL，500mg）用6mL正己烷活化，溶液过柱，用5mL正己烷洗涤。用6mL水饱和乙酸乙酯洗脱，洗脱液氮气吹干，用2mL甲醇-乙酸乙酯（40+60）溶液溶解，以备过氨基柱。 氨基柱（6mL，500 mg）用3mL甲醇-乙酸乙酯（40+60）溶液洗涤，3mL水饱和乙酸乙酯活化，将上步溶液过柱并接收，再加入3mL甲醇-乙酸乙酯（40+60）溶液洗脱接收，氮气吹干后，加入0.5mL流动相溶解上机测定。 2. 测定 （1）雄激素测定液相色谱条件色谱柱：苯基柱（2.0×250mm，5um）；流动相：甲醇-水，梯度淋洗，初始条件为65%水-35%甲醇，保持3min，27min线性梯度使甲醇比例为100%，保持5min，1min内甲醇比例降到35%，保持20min到下次进样。流速：0.2mL/min。 （2）雄激素测定质谱参考条件电离源：电喷雾正离子模式；毛细管电压：3.5KV；锥孔电压：70V；射频透镜1电压：30V；射频透镜2电压：0.5V；源温度：100℃；脱溶剂气温度：300℃；脱溶剂气流量：400L/h；电子倍增电压：650V；喷撞室压力：2.8×10-3mbar； （3）雌激素测定液相条件色谱柱：苯基柱（2.0mm×250mm，5um）；流动相：乙腈-水，梯度淋洗，初始条件为65%水-35%乙腈，保持3min，27min线性梯度使乙腈比例为100%，保持5min，1min内乙腈比例降到35%，保持20min到下次进样。流速：0.2mL/min （4）雌激素测定质谱条件电离源：电喷雾负离子模式；毛细管电压：3.1KV；维孔电压：80V；射频透镜1电压：40V；射频透镜2电压：0.5V；源温度：100℃；脱溶剂气温度：300℃；脱溶剂气流量：400L/h；电子倍增电压：650V；喷撞室压力：2.8×10-3mbar。 |
|---|
免责声明 本文仅代表作者个人观点，与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实，对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺，请读者仅作参考，并请自行核实相关内容。
版权声明 未经蚂蚁淘授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的，应该授权范围内使用，并注明“来源：蚂蚁淘”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
发布于 ： 2021-09-20
阅读（269）
▍
相关分类
▍
相关文章
PHG2081在线PH计_word文档在线阅读与下载_文档网
【CentralChembi天气预报10天】CentralChembi天气预报未来10天...
一种李斯特菌增菌培养基及制备方法与流程
齐岳供应 NucView 488 Caspase3 蛋白酶和肽酶底物
pol是哪个国家
重庆永生实验仪器厂_重庆永生实验仪器厂
Biofronttech中国代理品牌:..._网
复方氨基酸
【求助】代谢组学相关问题? 药学
实验仪器的日常保养和维护.
【求助】流式抗体标记外周血单个核细胞（PBMC）,标记不是咋回事...
氟奋乃静癸酸酯EP杂质E标准品(Fluphenazine Decanoate EP...
▍
相关问答
