BioSchiff希夫试剂使用说明书
【产品名称】希夫试剂
【产品编号】BS-OT-100(100ml), BS-OT-500(500ml), BS-OT-1L(1000ml)
【包装规格】100ml 500ml 1000ml
【产品介绍】
BioSchiff试剂为无色溶液,与醛类物质作用显紫色(品红),其显色强度与组织中的乙二醇含量有关。该试剂制备原理为利用硫酸使品红溶液褪色。Schiff试剂用于多种化学用途,其中最为广泛的是用于P.A.S染色(PeriodicAcidSchiff),PAS染色是基于过碘酸和Schiff试剂的氧化反应,过碘酸使含有乙二醇的分子产生醛类物质,Schiff试剂与其作用呈现紫色(品红)。此方法广泛地使用于肝脏和肌肉细胞的染色,此外,Schiff试剂亦可使用于DNA的检测(福尔根反应)。
【预期用途】Schiff试剂用于检测醛类物质和粘液物质,用于显微镜观察和电泳实验
【染色过程涉及的其他试剂】
固定剂,中性福尔马林缓冲溶液:4%NB甲醛溶液,10%NB甲醛溶液;
脱水剂水化剂,乙醇溶液:Histanol70,Histanol80,Histanol95,Histanol100;
组织病理学染色试剂:苏木素G3,苏木素ML;
氧化剂:过碘酸,0.8%溶液;
亚硫酸盐溶液:焦亚硫酸钠溶液,HCL溶液,PAS;
透明化试剂:BioClear二甲苯或替代物(BioClear脂肪烃基质)
渗透包埋剂,固体石蜡:BioWaxPlus,BioWax56/68,BioWaxBlue,BioWaxMicro;
组织病理学和细胞学用高级载玻片:SUPERGRADE、载玻片;
封片剂及盖玻片:BioMount,BioMountHigh,BioMountM,BioMountNew,BioMountNewLow,BioMountDPX;
BioMountDPXHigh,BioMountDPXLow,BioMountDPXLowEco,BioMountC,BioMountAqua,CanadaBalsam;
盖玻片:规格(18×18mm-24×60mm)
【其他溶液的准备】
亚硫酸盐溶液
混合10ml焦亚硫酸钠溶液与10mlHCL溶液,P.A.S;加入200ml水,混合。
注:亚硫酸盐溶液现配现用。
【组织学染色准备】
固定样本(4%NB甲醛溶液,10%NB甲醛溶液),水洗后用递增梯度浓度乙醇溶液(Histanol70,Histanol80,Histanol95,Histanol100)进行脱水;
透明处理:二甲苯(BioClear)或二甲苯替代物(BioClearNew);
石蜡(BioWaxPlus56/68,BioWax56/68,BioWaxBlue,BioWaxMicro)渗透包埋;
切片:将包埋后的样本切至4-6μm,置于载玻片上;
【注意事项】
试剂应完全覆盖样本;
BioSchiff试剂应密封保存,以避免SO2挥发;
【P.A.S染色步骤】
1. | BioClear二甲苯或BioClearNew二甲苯替代物进行脱蜡处理 | 3次,每次10min |
2. | 100%乙醇溶液水化处理(Histanol100) | 5min和3min交替2次 |
3. | 95%乙醇溶液水化处理(Histanol95) | 2min |
4. | 蒸馏水说去离子水水化处理 | 2min |
5. | 0.8%过碘酸溶液处理 | 5-10min |
6. | 自来水冲洗 | 3min |
7. | 蒸馏水或去离子水冲洗 | |
8. | BioSchiff试剂处理(至少5滴,或直接浸入BioSchiff中) | 10-15min |
注意:浸入过程中应盖好瓶盖,防止SO2挥发 | ||
9. | 亚硫酸盐处理 | 3次,每次2min |
10. | 自来水冲洗 | 3min |
11. | 苏木素ML染色 | 1-3min |
12. | 自来水冲洗 | 3min |
13. | 70%乙醇(Histanol70)脱水 | 上下5次 |
14. | 95%乙醇(Histanol95)脱水 | 上下5次 |
15. | 100%乙醇(Histanol100)脱水 | 2min |
16. | BioClear二甲苯或BioClearNew二甲苯替代物透明化处理 | 2次,每次5min |