一、试剂盒简介
本试剂盒为快速逆转录试剂盒,主要含有4管试剂:4 RT Master Mix中主要包含了逆转录所需的除引物以外的所有成分(逆转录酶、buffer、RNase Inhibitor、dNTP Mixture),Oligo(dT)18 Primer、Random Hexamer Primer为独立包装,便于添加目标片段特异性引物(如microRNA, lncRNA, circRNA等的特异性引物)。
该试剂盒采用的新型MMLV突变体逆转录酶具有很强的抗干扰能力及扩增能力,扩增效率尤佳,15分钟得到的扩增产物量可以达到AMV逆转录酶大约1h的产物量(Ct值相同),后续逆转录产物建议用于qPCR。如果用于PCR克隆长片段基因,则建议将逆转录反应时间延长至30分钟。
二、产品组分
四、试剂盒特点
1、可以快速、高效合成荧光定量PCR用的高质量cDNA模板,是进行2步法荧光定量PCR反应的理想试剂。
2、含有Oligo(dT)18和Random Hexamer两种反转录引物,可根据实际情况区别使用。反转录反应可使用Oligo(dT)18引物或者Random Hexamer引物,也可以Oligo(dT)18和Random Hexamer两种引物同时使用。只扩增一种目的基因时,也可以使用Specific Primer作为反转录引物。
五、注意事项
1、当同时需要进行数次反应时,应先配制各种试剂的混合液,然后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
2、4 RT Master Mix在使用前需Vortex振荡混匀,轻轻离心后使用。由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。同时,要使用精确、量程适合的移液枪,并且不要使Tip插入液面过深,否则会因Tip壁粘着造成损失,而使酶量不足。
3、分装试剂时务必使用新的枪头 (Tip),以防止样品间污染。
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