请使用支持JavaScript的浏览器! 【原创】miRNA用荧光定量PCR检测的流程以及汇总[精华]_蚂蚁淘商城
【原创】miRNA用荧光定量PCR检测的流程以及汇总[精华]
2011-03-17
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新手上路,学习学习!

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ronger352275
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我想知道最后出来的结果怎么分析
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jiyuyan168
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学习了,谢谢楼主分享
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myjbingli
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lz你好我是新手,想做miRNA的QRT-PCR,您上面说如果是细胞的话,直接用Trizol提就好,请问反转录试剂盒用哪个公司比较好?文献上大多是用TaqmanmicroRNAarraykit,由于经费不多,我想用染料法,想求些好的建议。对于茎环引物一般用哪个公司设计?如果要验证七八个的话,一共下来要多少钱?问题有些傻,请别见笑>
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myjbingli
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lz你好我是新手,想做miRNA的QRT-PCR,您上面说如果是细胞的话,直接用Trizol提就好,请问反转录试剂盒用哪个公司比较好?文献上大多是用TaqmanmicroRNAarraykit,由于经费不多,我想用染料法,想求些好的建议。对于茎环引物一般用哪个公司设计?如果要验证七八个的话,一共下来要多少钱?问题有些傻,请别见笑>
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tangel
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学习,正准备做,谢谢楼主!
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myjbingli
  用户
大家反转录试剂盒用的哪个公司的呀急需
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myjbingli
  用户
大家有做miRNA转染的吗是怎么做的用的什么载体具体方法是什么
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jin_henjin
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新手先围观一下谢谢!
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jin_henjin
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请问提血浆microRNA和PBMCmicroRNA在逆转录之前有没有区别,如果有,是什么?其实我还是没看明白stem-loop法和poly(A)法的区别,求教!谢谢。
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wyj8664
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学习了,佩服楼主的耐心。
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Calvinsum
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mark,好帖子,等我看过后跟楼主交流
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修玛杨
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我是提取组织的miRNA做realtimePCR,现在用trizol提取了总rna,打算采用加尾法反转录,看首页上说加尾法尽量要提取小RNA,还有,不知道Ologod(T)特异引物和Oligod(T)特异引物是打错了呢还是本来就是两种东西。
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普耐洛尔
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我现在也在做miRNA的RT-PCR,用的是polyA加尾,Taq酶探针,扩增条件是:95摄氏度5min,95度15sec,60度1min,但是扩增不出来条带,是引物的问题还是应该将扩增步骤改为三步法呢?
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ypljack
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谢谢楼主
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ypljack
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谢谢楼主分下你给
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xiaoyou_321
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非常感谢,学习一下引物设计原则
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jiaojiaoliu922
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楼主好~请教个问题。我也是做了miRNA芯片,挑了几个差异显著的来做验证。taqman探针和相关RT及PCR的试剂盒都是ABI的。开始是用Trizol提RNA的。预实验结果内参在22个cycle左右,第一个miRNA在18左右,但是其他几个miRNA通通在35个cycle。跟公司沟通过,认为Trizol提取RNA时miRNA损失较多。换了Qiagen的RNeasykit来提RNA。再次实验结果,内参和第一个miRNA没太大变化。有一个miRNA提前到32cycle左右。其他的还在35。实验室的师兄师姐认为cycle在35,结果的可靠性较差。希望能再把cycle提前一点,不知还有没有什么好方法。请各位不吝赐教。最近因为这个十分挠头~~~
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liulipingldyy
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东东很有用,很感兴趣,以后还要请教,先谢谢
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zhangyong74462
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LZ太强了,谢谢啦。实用哦
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lwch2
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感激不尽啊,在这个帖子学到了很多很多有用的信息。谢谢
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zmzpxsz
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mark!
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parkere123
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顶谢谢
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nancynancy5
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好好学习中
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fjx0616
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谢谢,分享
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fjx0616
  用户
LZ,你在RNA提取中提到的。血液和植物样本需要前期处理后再用Trizol+氯仿或用专门的Kit抽提。要如何前期处理?
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archsoulin
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谢谢楼主分享
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yzg831
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受益匪浅!
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yzg831
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自己最近也在做,做的有点不好,像大家学习了
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麦丽素
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最近在做血浆miRNA检测。目前想先设计合成茎环结构引物,用sybgreen方法检验一下引物的好坏。到正式实验时,再订制探针做。存在的疑问就是:国内有几家公司,比如上海闪晶和上海基康,都可以合成MGB探针,考虑到价格和时间问题,ABI的货期太长,而且很贵,我想选择国内的探针做做。不知道大家伙有没有人试过国内的MGB探针,效果好坏与否都来说说啊。。。谢谢!
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gq2002
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不错,谢谢楼主,学习一下!
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gaoling831108
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好东西,收藏
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gwg850727
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经过我个人的经验来看,推荐做miRNA的童鞋都采用茎环引物来反转,跟试剂盒比起来贵不了多少点点钱滴,至少不会被某些不良商家用特异性下游引物要挟啊
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