简述tRNA转录后加工。_
| 提供商： | ABI7900 |
| 服务名称： | 实时荧光定量PCR |
实时荧光定量PCR（RealTimePCR）技术，是指在PCR指数扩增期间通过连续监测荧光信号强弱的变化来即时测定特异性产物的量，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
项目流程
项目内容
中康博优势
※ 采用ABI7900HT实时荧光定量PCR仪，提供可靠的数据。
※ 丰富的引物设计经验。
※ 3个内参同时检测，确保数据的可靠性。
※ 覆盖多种检测内容，从mRNA—microRNA—lncRNA—circRNA定量。
※ 零距离沟通，强大的技术支持，完整的实验报告，让您轻松分析实验结果。
mRNA/lncRNA
lncRNA是一类长度大于200nt的非编码RNA,其片段大小与mRNA接近，因此，lncRNA在定量PCR检测方面与mRNA检测方法类似。
部分结果展示
miRNA（poly(A)加尾法）
miRNA是一种长约20nt的非编码RNA，核酸序列过短无法直接应用常规的PCR技术扩增。因此，miRNA的PCR检测，必须要延长待测miRNA的长度，构建出一个足够长的PCR模板，才能进一步应用PCR技术来定量分析。本公司采用加尾法——对miRNA进行加PolyA尾处理，改造成mRNA的结构，再采用mRNA常用的oligo(dT)反转录引物进行反转录，从而得到较长的模板链。
miRNA加尾法原理图
部分结果展示（miRNA）
circRNA
circRNAs区别于线性RNA的关键在于circRNA来源于RNA转录本的反向剪接（backsplice）。因此，circularRNA验证时采用和线性mRNA分子引物方向相反的方式(DivergentPCR)，用扩增区域覆盖剪接位点的反向引物能扩增出来证明其特异性表达。
数据分析
各样品相对定量分析结果，根据Real-TimePCR原始检测结果，按照2-△△ct相对定量计算公式，即
计算出各样品的目的基因相对定量结即其他各个样品相对于对照样品，目的基因mRNA/miRNA/lncRNA/circRNA转录水平的差异。
客户需提供:
※请提供新鲜或保存完好的细胞（至少5×106）、组织(至少50mg)、血液(300μl)等样本材料；或纯化好的总RNA（OD260/OD280在1.9-2.1之间，完整性好）或总DNA（OD260/OD280在1.7-1.9之间，完整性好）。
※请提供基因名称（GeneBankAccessionNumber、GeneID）、物种信息。
※客户可以提供引物，没有引物的情况下，本公司帮助设计合成。
※运输要求，液氮或干冰保存寄送，北京本地客户可上门收样。
注：样本应避免各类污染和反复
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发布于 ： 2018-03-30
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