2018年3月,蚂蚁淘正式签约Clodronate liposomes代理商
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ClodronateLiposomes产品性质
1ml脂质体体悬液中所含的氯磷酸大约为5mg。所用的磷酸盐缓冲液为10mMNa2HPO4,10mMNaH2PO4,140mMNaCl。
去除巨噬细胞(depletionofmacrophages)是研究巨噬细胞功能的重要方法。荷兰阿姆斯特丹VrijeUniversity的NicovanRooijen教授开发的一款ClodronateLiposomes,可以利用巨噬细胞的内吞机制,将膜不通透性的氯磷酸(clodronate)带入细胞内,从而达到去除巨噬细胞的目的。
作用原理:
两亲性磷脂分子在水中可以形成同心圆形式的磷脂双分子层球体,磷脂双分子层中间通过水相分隔。溶解在水溶液中的氯磷酸盐在形成脂质体的过程中被包裹进磷脂双分子层之间的水相中(如图1)。游离的氯磷酸盐不能自由的通过脂质体的磷脂双分子层。随着脂质体被巨噬细胞吞噬,在巨噬细胞溶酶体磷酸酶的作用下,溶解在脂质体水相中的氯磷酸盐就可以被逐步释放出来,并累积在细胞内,当其达到一定浓度时,巨噬细胞将会受到不可逆转的损伤,从而进入凋亡过程(如图2)。从死亡的巨噬细胞中释放出来的氯磷酸盐在细胞外的半衰期极短(大约15min),可以通过泌尿系统排除体外。
图1:氯磷酸-脂质体(Clodronateliposomes)复合物。在脂质体的形成过程中氯磷酸通过溶解在水溶液中被包裹进磷脂双分子层之间的水相中。
图2:巨噬细胞清除原理。包裹着氯磷酸(方块)的脂质体通过巨噬细胞的内吞作用进入细胞,与溶酶体(L)融合后,在磷脂酶(箭头)的作用下,释放出氯磷酸,当细胞内氯磷酸的浓度达到一定浓度,就会对巨噬细胞造成不可逆转的损害,从而迫使其进入细胞凋亡。
产品性质:
1ml脂质体体悬液中所含的氯磷酸大约为5mg。所用的磷酸盐缓冲液为10mMNa2HPO4,10mMNaH2PO4,140mMNaCl。
脂质体体内注射:
隔日尾静脉注射200μlclodronateliposome,根据实验要求制定注射日程。通过免疫组化或流式检测巨噬细胞去除效率。
尾静脉注射方法:
(1)将小鼠放在倒扣的饭盒内,从孔口拉出尾巴,小鼠的尾部有2条动脉和3条静脉,2条动脉分别在尾部的背侧面和腹侧面,3条静脉呈品字型分布,一般采用左右两侧的静脉;
(2)将纱布浸泡于约70度的温水中,拿出后包裹尾巴,以达到使尾部血管扩张及软化表皮角质的目的;
(3)行尾部静脉注射时,以左手拇指和食指前后摁住鼠尾,留出约2cm一段,使皮肤紧张,静脉更为充盈,右手持1ml针头注射器,使针头与静脉平行(小于30°角),从尾巴的下1/4处进针,开始注入药物时应缓慢,仔细观察,如果无阻力,无白色皮丘出现,说明已刺入血管,可正式注入药物。
(4)有的实验需连日反复尾静脉注射给药,注射部位应尽可能从尾端开始,按次序向尾根部移动,更换血管位置注射给药。拔出针头后,用棉球按住注射部位轻压1-2min,止血。