苏州蚂蚁淘生物科技有限公司是专业从事生物技术产品销售的高科技企业，是国内生物试剂、仪器、消耗品领域的知名企业之一。起发公司自成立以来，连续2年高速成长。公司的发展目标是建成专业从事生物技术产品销售、生产与开发的一流公司。
Arthus Biosystems
用本公司抗体可以测定SAM分子在样品中的浓度，而不需要昂贵的设备。加利福尼亚里士满的阿萨斯生物系统为世界各地的研究实验室提供了一套完整的研究工具，以利用免疫分析技术有效地测量SAM。
With our antibodies one can determine the concentration of the SAM molecule in samples without costly equipment. Arthus Biosystems of Richmond, California, offers a complete series of research tools for research laboratories worldwide to measure SAM effectively using immunoassay technology.
货号 | 规格 |
FK00201 | 100 tests |
FK00202 | 20 tests |
FK00301 | 60 tests |
FK00302 | 20 tests |
IK00201 | 96 tests |
IK00201s | 96 tests |
IK00301 | 96 tests |
IK00301s | 96 tests |
IK00202 | 96 tests |
IK00202s | 96 tests |
IK00302 | 96 tests |
IK00302s | 96 tests |
Arthus Biosystems的SAM和SAH
SAM类似物和抗体
一种重要的S-腺苷甲硫氨酸（SAM）类似物具有非常好的热稳定性，但又具有很高的吸湿性。该类似物也可以用作SAM内检的标准。
SAM和SAH抗体
很难产生针对这种具有生物活性的代谢产物的抗体。我们的研究人员开发并生产了针对S-腺苷甲硫氨酸或SAM的单克隆和多克隆抗体。与它的密切相关的类似物如S-腺苷同型半胱氨酸或SAH以及蛋氨酸（Met）和腺苷，ATP，ADP和甲基硫代腺苷（MTA）的交叉反应已被证明非常简单。为了进一步验证我们的抗SAM抗体的特异性，我们证明了由来自ATP的蛋氨酸腺苷基转移酶（MAT）合成的SAM和Met可以剂量依赖性方式竞争性结合抗体（右图）。
对于抗SAH抗体，与S-腺苷甲硫氨酸的交叉反应低于3％；同型半胱氨酸，L-半胱氨酸，腺苷，谷胱甘肽，L-半胱氨酸，ADP和ATP均<1％; MTA约为5％。与SAM和MTA相对较高的交叉反应不应该考虑，因为SAM和MTA的生理水平远低于1uM，在该水平下未观察到与抗体的交叉反应。我们的产品使普通技术人员可以在实验室中用便宜的仪器快速，准确和轻松地测量样品中S-腺苷甲硫氨酸（SAM）和S-腺苷同型半胱氨酸（SAH）的水平。
如何测量呢？
由于SAM是本质上不稳定的分子，因此确定其在各种生物体液和组织中的浓度一直具有挑战性。当前定量SAM和SAH的方法是LC，MS和MS的组合。使用了HPLC，但事实证明它具有明显的优势。
LC-MS / MS和HPLC测量SAM和SAH的基础不适用于具有生物活性和不稳定的分子。因此，这些方法具有局限性。这些方法费力，费时并且需要昂贵的设备。LC-MS / MS是目前流行的方法，但它没有考虑其检测到的代谢物的生物学活性相关性。因此，从生物学的角度来看，它在测量SAM或SAH中的用途可能不准确且不完整。化学方法只能检测游离形式的SAM或SAH，但不包括与其他生物分子相关的任何形式的SAM或SAH。仅仅因为LC-MS / MS无法从样品中检测出该窄分子量范围内的SAM分子，可能并不总是意味着SAM已完全降解，消失和失灵。此外，用于训练LC-MS / MS的SAM标准与活细胞中的SAM不同，但是在LC-MS / MS等技术中，需要与待测分子完全相同的分子作为标准。最近，关于GC-MS和LC-MS分析方法的争议可能由于操作过程（包括样品提取，预处理和测量过程）引起的意外变化而无法准确测量代谢物 （http://cen.acs.org/articles/93/i42/Heated-Dispute-Over-Analytical-Method.html）。
一种简单，方便的方法，不需要昂贵的仪器，但考虑到生物学功能，例如结合相关分子的能力，绝对值得您投入。现在，我们能够提供通过免疫测定定量测量SAM和SAH所需的所有基本试剂，并帮助解决技术问题。
使用我们的产品测量血浆和血清中SAM的水平，可以进行许多临床研究以证实上述说法。仍有许多研究可供全球不同领域的科学家参与。我们相信，与甲基化指数相关的越来越重要的发现将在不久的将来出现。
数据现状不一致
尚未准确确定血液，血清和血浆中SAM浓度的正常范围。由于人口，样品处理，预处理和检测方法的原因，已发表的结果不一致。最近有报道称，通过LC-MS / MS方法测得的人血浆中SAM水平约为60nM-140 nM（Klepacki J，Clin Chim Acta，2013），而通过HPLC测得的> 1.5 uM（Carolynk K，J。色谱，1997）。甚至使用类似技术的实验室也已经报告了健康患者的广泛浓度范围。通常，这些数据对于在特定研究范围内进行比较最有用。考虑到SAM的重要性，期望有一种简单可靠的方法来测量其在生物样品中的浓度。在采用高质量抗SAM抗体的免疫分析中，可以确定与抗体特异性和灵敏结合的分子是SAM。也就是说，特异性至少使检测方法更可靠。
SAM应用程序更有趣的领域
过去已经对SAM的功能进行了大量研究。例如，与人红细胞在体外孵育的SAM-e穿透细胞膜并增加细胞内的ATP，从而恢复细胞形状。由于SAM-e在基本代谢过程中起重要作用，因此在许多表面上无关的领域中在临床上很有用。它最引人注目的临床用途之一是治疗酒精性肝硬化，直到现在，这种酒精在医学上仍无法治愈。SAM-e已被施用于患有周围闭塞性动脉疾病的患者，并被证明可降低血液粘度，主要是通过其对红细胞变形性的影响。
Sam-e可减轻由肿瘤坏死因子α（TNFα）引起的损伤，还可以减少细胞分泌的TNFα的数量。已经研究了SAM-e降低与施用环孢霉素A（一种强大的免疫抑制剂）相关的毒性的能力。在偏头痛患者中也进行了研究，发现它是有益的。
当宿主受到免疫抑制时，会发生肺孢子虫肺炎（PCP）。人体中的PCP与晚期HIV疾病，儿童严重营养不良以及癌症，晚期癌症，风湿性疾病和预防器官移植排斥的治疗有关（Perez-Leal等人，《 Am J Respir Cell Mol Biol Vol 45》， PP1142-1146，2011）。如果不治疗，将会致命。因此，早期诊断非常重要。已经进行了有关S-腺苷甲硫氨酸（SAM）水平在诊断HIV感染患者卡氏肺孢子虫肺炎（PCP）中的研究。由于卡氏肺孢子虫在体外需要S-腺苷甲硫氨酸，因此肺孢菌感染会耗尽大鼠和人类的血浆SAM，尼古丁会降低豚鼠肺的SAM，吸烟与减少艾滋病患者的肺孢子虫肺炎（PCP）有关。慢性尼古丁治疗会增加肺多胺的分解代谢/合成代谢循环和/或排泄，从而导致消耗SAM的多胺生物合成和肺SAM耗竭增加（J. Biological Chemistry 2005; 280（15）：15219-15228）。因此，血浆SAM水平的严重降低仅有助于预测仅在免疫功能低下患者中PCP的发生。PCP的最佳治疗方案应包括保持较低的SAM水平，因为降低SAM水平有助于杀死PCP病原体，而当SAM或甲基化指数较低时，建议提高SAM水平以更好地治疗其他疾病（非PCP）。因此，血浆SAM水平的严重降低仅有助于预测仅在免疫功能低下患者中PCP的发生。PCP的最佳治疗方案应包括保持较低的SAM水平，因为降低SAM水平有助于杀死PCP病原体，而当SAM或甲基化指数较低时，建议提高SAM水平以更好地治疗其他疾病（非PCP）。因此，血浆SAM水平的严重降低仅有助于预测仅在免疫功能低下患者中PCP的发生。PCP的最佳治疗方案应包括保持较低的SAM水平，因为降低SAM水平有助于杀死PCP病原体，而当SAM或甲基化指数较低时，建议提高SAM水平以更好地治疗其他疾病（非PCP）。
在酒精性肝中，SAM降低，而SAH和Hcy水平升高。两种基因（MAT1A和MAT2A）编码必需酶蛋氨酸腺苷基转移酶（MAT），该酶催化S-腺苷甲硫氨酸（SAMe）的生物合成，这是主要的甲基供体，在肝脏中是谷胱甘肽的前体。MAT1A主要在肝脏中表达，而MAT2A则广泛分布。MAT2A在快速生长和去分化期间在肝脏中诱导。在人类肝细胞癌（HCC）中，MAT1A被MAT2A代替。这在病因学上是重要的，因为MAT2A表达与较低的SAMe水平和更快的生长相关，而外源的SAMe处理抑制生长（Lu，SC et al.Alcoho 35（3）：227-34，2005）。
测量SAM和甲基化指数的意义
Arthus Biosystems的垫
高度保守的蛋氨酸腺苷转移酶（MAT）同工酶
已经表明，细胞内S-腺苷甲硫氨酸（SAM）水平的变化与细胞和生物体的健康有关。SAM水平的波动是由于SAM合成与代谢途径（甲基化，转硫和氨基丙基化）或降解之间的不平衡引起的。S-腺苷甲硫氨酸的生物合成严格且完全取决于蛋氨酸腺苷转移酶（MAT，EC2.5.1.6）的活性，也称为S-腺苷甲硫氨酸合成酶。甲硫氨酸腺苷基转移酶由两个基因MAT1A和MAT2A编码，编码两个同源MAT催化亚基α1和α2。MAT1A在正常肝脏中表达，它编码在两个天然MAT同工酶中发现的α1亚基，该同工酶是该单个亚基的二聚体（MAT III）或四聚体（MAT I）。MAT2A编码在天然MAT同工酶（MAT II）中发现的催化亚基（α2），它与MATA2B基因编码的调节亚基（β）相关。MAT1A主要在成人正常肝细胞中表达，而MAT2A则广泛分布，其中主要研究的对象是高度增殖的肝细胞，如胎儿肝和肝癌细胞。除了依赖宿主生存的寄生虫，所有生物的细胞都具有蛋氨酸腺苷转移酶。已经发现MAT基因在整个进化过程中都极其保守。MAT的酶活性对于调节SAM的水平至关重要，并且在蛋氨酸循环和表观遗传研究中起着关键作用。在某些情况下，MAT1A或MAT2A的表达没有改变，但合成SAM的能力却有所不同。因此，
MAT-II对细胞增殖很重要
肝细胞增殖的调节是在发育和肝再生过程中控制器官大小的关键事件。MAT-II是细胞代谢中的重要酶，可催化L-蛋氨酸和ATP形成S-腺苷甲硫氨酸（SAMe）。MAT2A在肝外组织中表达。在成年肝脏中，MAT2A表达的增加与肝脏的快速生长或去分化有关。使用MAT1A基因敲除小鼠模型进一步证明了MAT表达对肝脏生长和损伤的影响（Martínez-Chantar，ML，2002。FASEB J. 16：1292）。在该模型中，肝MAT1A的缺乏可通过MAT2A的诱导来补偿。这些动物表现出慢性肝SAMe缺乏症，容易发生肝损伤并发展为肝细胞癌（HCC）。
在人类肝癌中，启动子低甲基化以及c-Myb和Sp1的表达增加，以及随后的MAT2A启动子反式激活，都有助于肝癌中MAT2A的转录上调。在肝癌中，NF-κB和AP-1与人谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基启动子的核结合增加。在人肝细胞癌HepG2细胞中，基础MAT2A表达需要NF-kB和AP-1，并介导对TNF-α治疗所观察到的MAT2A表达的增加（Yang H，诱导人甲硫氨酸腺苷基转移酶2A表达肿瘤坏死因子α.JBiochem.2003.278：50887）。MAT2A的上调可改善生长，S-腺苷甲硫氨酸和甲硫基腺苷因此可以阻断结肠癌细胞中的促有丝分裂信号。
在H35肝癌细胞中，肝细胞生长因子（HGF）和胰岛素等生长因子上调MAT2A表达。HGF诱导的细胞增殖和MAT2A上调均需要丝裂原激活的蛋白（MAP）激酶和磷脂酰肌醇3-磷酸激酶（PI 3-K）途径。这些途径的抑制与从胎儿肝脏MAT2A的表达向成年肝脏MAT1A的亚型的转换有关。用MAT2A反义寡核苷酸处理H35肝癌细胞可降低HGF诱导的细胞增殖。生长抑制剂（例如转化生长因子（TGFβ））可阻止HGF诱导的MAT2A上调，同时增加H35细胞中的MAT1A mRNA水平。肝细胞增殖过程需要MAT2A表达（Paneda C，肝细胞增殖需要蛋氨酸腺苷转移酶2A mRNA上调。肝病学。2002 35：1381）。
胆碱缺乏和补充乙硫氨酸（CDE）饮食的结果是肝S-腺苷甲硫氨酸（SAM）的消耗。CDE饮食48小时后，通过翻译后机制，SAM水平下降约一半，MAT1 / III消失，而通过翻译前机制，MAT-II增加。用CDE喂养的年幼小鼠表现出广泛的坏死，水肿和急性胰腺炎浸润，SAM的治疗可以帮助预防和恢复损伤。食用CDE饮食但未发展为胰腺炎的雌性老年小鼠，其胰腺SAM水平也有类似的下降。尽管在MAT1A基因敲除小鼠中胰腺SAM水平下降了80％以上，但没有胰腺炎发生。MAT1A在正常胰腺和胰腺腺泡中高表达，这与我们通常认为MAT-I / III是肝特异性的相反。CDE饮食通过不同的机制导致MAT同工酶表达的急剧变化。与肝脏情况相反，肝脏中缺乏MAT1A和肝SAM含量降低会导致自发性组织损伤，而在胰腺中，SAM和MAT1A的作用似乎更为复杂，尚待确定（Lu SC，S-的作用腺苷甲硫氨酸在两种胰腺炎实验模型中的应用（FASEB J 2003 17（1）：56）。有趣的是看到组织中年龄相关的病理变化。可能与正常人的SAM水平也取决于年龄这一事实有关。由于SAM是DNA，RNA，激素，脂质蛋白和神经递质正确甲基化的唯一甲基供体，
甲硫氨酸腺苷基转移酶的表观遗传调控和HCC治疗
MicroRNA（miRNA）和MAT1A在HCC中失调，而MAT1A表达降低与HCC预后差有关。在肝癌中，miR-664，miR-485-3p和miR-495（MAT1A的潜在调控miRNA）的表达增加。分别敲除Hep3B和HepG2细胞中的这些miRNA会诱导MAT1A表达，减少生长和增加细胞凋亡，而联合敲除则发挥了其他作用。皮下和实质内注射的Hep3B细胞稳定地过表达miRNA的这三个三态中的每一个都促进了小鼠的肿瘤发生和转移。使用miRNA-664（miR-664），miR-485-3p和miR-495 siRNA进行治疗可减少原位肝癌模型中的肿瘤生长，侵袭和转移。阻断MAT1A诱导可显着降低miR-495 siRNA的抗肿瘤作用，而维持MAT1A的表达阻止了miRNA介导的生长和转移增强。减少这些miRNA可以增加MAT1A蛋白的总和核水平，总体CpG甲基化，lin-28同系物B（秀丽隐杆线虫）（LIN28B）启动子甲基化，并降低LIN28B表达。miR-664，miR-485-3p和miR-495的上调有助于降低HCC中的MAT1A表达，增强的肿瘤发生可能为HCC治疗提供潜在的靶点（Yang H，HEPATOLOGY 2013. 57（5）：2081）。
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