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【求助】关于原位杂交的组织处理问题
2007-10-10
问题描述:

需要灌流小鼠取脑切片做mrna原位杂交,请问灌流用的pbs和多聚甲醛需要用depc处理么?

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多聚甲醛
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理论上来说,凡是进行原位杂交前的液体和器械都要用DEPC处理,但存在许多问题,比如,上述两个液体添加DEPC后,进行高温消毒是个难题,即使解决了消毒这个问题,多聚甲醛在温度超过60度后,能给发生分解,生成较多的甲醛,我们以前在做这些步骤的时候,都是将器械和仪器用DEPC水浸泡,然后消毒,配置液体用新鲜的双蒸水,然后直接添加DEPC进去,没有对液体进行消毒,但实验过程中要注意保护自己,最好是戴橡胶手套,封闭袖口,白大褂专用,口罩,帽子,白大褂定期高温高压消毒,试验结束后白大褂要消毒。
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chilling
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那么也就是说给小鼠灌流用的pbs和多聚甲醛最好是用depc处理过的咯?直接用depc处理过的水配行不行呢?
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多聚甲醛
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当然可以阿,应该比我说的效果还要好一些,至少对人体的毒性要小得多
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chilling
  用户
明白了,多谢~
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