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biopioneerinc/Genomic DNA miniprep kit for plant, 100 preps/1/GDMIP-P100
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BP-10 Spin Column Genomic DNAMinipreps Kit, Plant
BP-10 Spin GenomicDNA Minipreps Kit, Plant | GDMIP-100P, 100 Preps |
RNase A (10 mg/ml)(a) PCLSolution PPSolution PBSolution WashSolution(b) ElutionBuffer(c) EZ-10 SpinColumn & 2.0-ml Collection Tube Protocol | 300 ml 30 ml 4 ml 40 ml 24 ml 10 ml 100 1 |
Introduction
The BP-10Spin Column Kits provide a simple and efficient method for purification ofgenomic DNA from different sources such as Bacteria, Plant, Animal and Blood.
The DNA isselectively adsorbed in silica gel-based BP-10 Spin Column and other componentsare washed away. The genomic DNA is eluted off the column and can be used forany downstream applications, including restriction enzyme digestion, PCR,Southern-blotting, etc.
Thepurification methods used in these protocols do not require use of phenol,chloroform, or CsCl. The DNA is purified without an additional step of ethanolprecipitation.
These kitsare designed for research only. The purified DNA should not be used for liveanimal transfections. It is also not to be used for human diagnostic or drugproduction purposes.
Features
- Simple, fast and efficient
- Preparation of high quality genomicDNA from various sources
- High yield and reproducible
- No phenol / chloroform extraction orethanol precipitation required
- High capacity: up to 10µg of DNA percolumn
Applications
Efficient ofup to 10µg of genomic DNA purification from different sources
Storage
With theexception of the Proteinase K, the kit may be stored at room temperature.Proteinase K should be stored at 4ºC for short term or -20ºC for longterm. The kit is stable for 12 months at room temperature. For longer storage,keep all contents in cold place.
Quality Control
Each lot ofBP-10 Spin Column kit is tested against predetermined specifications to ensureconsistent product quality.
- PCLSolution DOES NOT contain RNase A (100 µg/ml). Please add entire contents ofRNAse A into PCL Solution and store at 4ºC for long term storage. PCL Solution may form a precipitate upon storage. If necessary,dissolve the precipitate by warming up to room temperature.
- Beforeuse, add 96ml of 100% ethanol to 24ml Wash Solution for GDMIP-100P.For other volumes of wash solution, simplyadd enough ethanol to make a 4:1 ratio (volume of added ethanol : volume of WashSolution = 4:1).
- ElutionBuffer is 2.0mM Tris-HCl pH 8.0~8.5. Although TE buffer pH 8.0 or water can beused, yield may be 20% lower.
Procedures for Isolation of Genomic DNA from Plants
- PlantTissue Sample Preparation
- Grind plant tissue under liquid nitrogen to a finepowder using a mortar and pestle. Transfer the powder and liquid nitrogen to1.5ml Eppendorf tube and allow liquid nitrogen to be evaporated. Do not allowthe sample to thaw. Proceed immediately to Step 2.
- Note:
- Ifsample can not be used immediately for genomic DNA extraction, it isrecommended to store at -20ºC for long-term use.
- Avoid repeated freezing and thawing of stored samples, since this leads to reduced DNA size and yield.
- Incubation period depends on the nature of sample. Longer period incubation even overnight incubation will not affect the result.
- Better results could be achieved if starting material is less than 60mg.In any case, the quantity of samples should not exceed 100 mg for one BP-10 Spin Column.
- Checkthe volume of grounded material, and add equal volume (approximately 150µl) ofPCL Solution (Plant Cell Lysis Solution).
- Vortexand shake the tube several times. Incubate at 65ºC for 20 minutes,vortex or pipette up and down to further remove any clumps. Clumped tissue willnot lyse properly and will result in a lower yield of DNA.
- Add25µl PP Solution. Mix well. Keep the solution on ice for 15 minutes.
- Centrifugeat 4ºC, 8,000 x g (10,000 rpm) for 5 minutes. Apply the clearlysate to an BP-10 Spin Column.
- Add300µl PB buffer to the BP-10 Spin Column. Mix gently by inverting the tube.Incubate the mixture for 3 minutes at room temperature. During incubation, mixoccasionally by inverting the tube.
- Centrifugeat 4ºC, 8,000 x g(10,000 rpm) for 2 minutes.
- Discardthe flow-through in the Collection Tube. Add 500µl of Wash Solution, and spinat 8,000 x g (10,000 rpm) for 2 minutes.
- RepeatStep 8.
- Discard flow-through. Spin at 8,000 xg (10,000 rpm) for an additional minute to remove residual amount of WashSolution.
- Place the column into a clean 1.5mlEppendorf tube. Add 30-50µl Elution Buffer into the center part of membrane inthe column. Incubate at RT for 2 or 3 minutes. Incubating the tube at 37 or 50ºC for 2 minutes may increase recovery yield.
- Spin at 8,000 x g (10,000 rpm) for 2minutes to elute DNA from the column. Measure DNA quantity by UV absorption atA260 (1.0 OD unit is equivalent of 50µg).
- For long term storage, keep aliquotsof purified genomic DNA at -20ºC.
Measure DNA quantity by UV absorption at A260(1.0 OD unit is equivalent of 50 µg). Assess genomic DNA quality by ananalytical 0.7% agarose gel. Isolated genomic DNA should not contain RNA. Itslength should be over 50 kb.
Troubleshooting Guide: BP-10 SpinColumn Genomic DNAMinipreps Kit, Plant
- Low Yield
- There are a number of variables that can cause low yield.
- Inefficienthomogenization.
- Ensure that the material is completely disrupted. If necessary, increase time of homogenization.
- Low DNA content of plant tissue.
- Increase the amount of starting material to 200mg.
- RNA contamination
- RNase activity is weakened or lost.Add 30% additional RNAse A, and store solution at 4ºC.
- OD 260nm/280nm ratio outside1.9-2.2 range
- If the ratio of OD260nm/280nm is greater than 2.2, there maybe traces of ethanol present. If the ratio of OD260nm/280nm is smaller than1.9, there is a chance of protein contamination. Make sure the sample is mixedwell after Proteinase K digestion.
Biopioneer Brand:
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运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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2021-08-01
货号：PKT0010K 查看更多
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2021-09-20
一个月内，顶级学术期刊连发两篇顶级论文！上半年引爆生物圈的华人科学家张锋教授团队又有新动作！这次，他在一月内，分别在《Nature》、《Science》连发两篇论文！他将CRISPR-Cas13a改造成了灵敏度达到了阿摩尔级（aM，10的负18次方摩尔每升），可以检测单分子的SHERLOCK技术。而这其中，RPA起到了不小的作用。那么，什么是RPA呢？RPA,即重组酶聚合酶扩增技术，是在由多种酶和蛋白的参与下，在恒温条件下实现核酸指数扩... 查看更多
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2018-12-26
The binding of ?-arrestins to agonist-occupied GPCRs triggers the assembly of a MAP kinase activation complex using ?-arrestin as a scaffold, with subsequent a 查看更多
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2018-06-08
1.1.7 重组酶聚合酶扩增技术重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification, RPA)技术 [61-64]是英国公司 TwistDx Inc 开发的在低温下的恒温... 查看更多
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2021-07-22
KG201 快速DNA提取扩增试剂盒200T是由北京索莱宝科技有限公司代理或销售的天根品牌的试剂，产品来源于china。北京索莱宝科技有限公司是中国最权威的KG201 快速DNA提取扩增试剂盒200T试剂销售服务商之一，在北京等地方销售KG201 快速DNA提取扩增试剂盒200T试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业KG201 快速DNA提取扩增试剂盒200T仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的KG201 快速DNA提取扩增试剂盒200T产品 查看更多
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2021-08-19
金思德生物销售的ABI 9700型PCR仪是为PCR核酸扩增技术所设计的自动化仪器，它具有ABI公司（原PE公司） 9600型PCR仪的性能和2400型PCR仪的操作界面，用户界面包括全数字式键盘，软触摸按键 查看更多
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2021-08-10
重组酶T4uvsX,单链结合蛋白T4gp32,2mM DTT,购于TwistDX;模板等);在PCR管管2中添加100μL50μg/mL MnO2和20μM钙黄绿素;管3添加100μL 500μM焦磷酸盐... 查看更多
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2021-08-27
目前,英国公司 TwistDX Inc 基于以上两种探针,已分别开发出 TwistAmp® exo 试 剂盒和 TwistAmp® nfo 试剂... 查看更多
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2021-08-04
广州市锐博生物科技有限公司在发布的高通量测序服务—扩增子测序供应信息，浏览与高通量测序服务—扩增子测序相关的产品或在搜索更多与高通量测序服务—扩增子测序相关的内容。 查看更多
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2021-09-09
北京普凯瑞生物科技有限公司在发布的二手 ABI PCR 扩增仪供应信息，浏览与二手 ABI PCR 扩增仪相关的产品或在搜索更多与二手 ABI PCR 扩增仪相关的内容。 查看更多
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2018-02-09
北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司在发布的伯乐T100 全新原装进口 基因扩增仪供应信息，浏览与伯乐T100 全新原装进口 基因扩增仪相关的产品或在搜索更多与伯乐T100 全新原装进口 基因扩增仪相关的内容。 查看更多
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2018-05-28
上海卓康生物科技有限公司在发布的质粒扩增、筛选用试剂供应信息，浏览与质粒扩增、筛选用试剂相关的产品或在搜索更多与质粒扩增、筛选用试剂相关的内容。 查看更多
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环介导等温扩增_LAMP_技术的应用研究123
serain332021-07-27
大家好，现在做LAMP结果颠倒了，阴性对照会出现LAMPladder条带，而加了基因组DNA的反而扩增不出来，有没有人遇见这种情况？最后如何解决了呢？
实时荧光核酸恒温扩增检测技术在肺结核临床诊断中价值研究123
脆乳2018-01-24
基因扩增技术（PCR）聚合酶链反应（polymerase chain reaction简称PCR）又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法，是基因扩增技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍，从而大大提高对DNA分子的分析
恒温核酸扩增学术百科知网空间123
冰洁20112012-09-24
恒温扩增技术是什么？ 123
oiljdljdio2018-01-24
操作方法?
原理?(没有就算了...)
答的好的提高悬赏50分
有原理的追加50分
谢谢啊~~~~
原理?(没有就算了...)
答的好的提高悬赏50分
有原理的追加50分
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PCR技术在食品检测中的应用123
绿萝2015的春天2018-01-24
应用很广泛，因为比荧光定量PCR的操作简单方便，无需专业人员操作，仪器的性价比也比较高，挺受食品企业的追捧，食药系统也用的不少，现在技术越来越成熟，以后的应用会越来越广
食品中常规致病菌快速检测恒温扩增芯片法全国团体标准信息平台....123
2018-01-24
需要根据不同的样品来源，和相关的致病菌检测国家标准进行检测，也就是说对不同的样品其检测方法是不同的。一般情况下，需要先进行增菌，因为致病菌的含量往往很低，直接检测很可能检测不出，增菌过后再使用不同的培养基划线接种，分离出致病菌后进行生化鉴定，或者使用一些更先进的方法，比如PCR、质谱等等。恒温扩增法也有企业在用，但是新推出的技术，使用度比荧光定量PCR的要少一些
环介导等温扩增技术的临床应用进展123
火烈鸟20172021-07-28
请问一下，目前环介导等温扩增技术在临床上的应用怎么样？
恒温荧光PCR是什么技术 食品微生物检测 食品论坛123
神马3lI2018-01-24
基因扩增技术（PCR）聚合酶链反应（polymerase chain reaction简称PCR）又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法，是基因扩增技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍，
环介导等温扩增技术(loopmediated isothermal amplification,LAMP)123
mylab2021-07-20
各位战友：
今天发现，我在核酸技术区开辟的“DIG/Biotin标记的Southern/Northern杂交专题讨论”4个月，今天回帖数破100，点击达1500多次。能和大家一起分享和交流，并且得到共同提高，心情很是愉快。
所以想借PCR技术区的宝地，新开辟“环介导等温扩增技术(Loop-MediatedIsothermalAmplification,LAMP)专题讨论”。我做LAMP一年多了，有些经验。而最近，和我谈起LAMP的朋友明显增多。所以在这方面大家有什么心得、体会、资料和实验困难，希望能一起交流讨论。谢谢支持！
今天发现，我在核酸技术区开辟的“DIG/Biotin标记的Southern/Northern杂交专题讨论”4个月，今天回帖数破100，点击达1500多次。能和大家一起分享和交流，并且得到共同提高，心情很是愉快。
所以想借PCR技术区的宝地，新开辟“环介导等温扩增技术(Loop-MediatedIsothermalAmplification,LAMP)专题讨论”。我做LAMP一年多了，有些经验。而最近，和我谈起LAMP的朋友明显增多。所以在这方面大家有什么心得、体会、资料和实验困难，希望能一起交流讨论。谢谢支持！
【求助】梯度PCR有条带,恒温扩增无条带 核酸基因技术论坛123
yangjunfly2010-09-09
分子生物学实验报告123
louise36532021-07-23
恒温扩增可取代变温PCR?技术优劣势看这里!123
bitianxuan2018-01-24
就是原跟过程不一样,结果都一样的吧?不懂啊
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