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Epigentek DNA甲基化

添加到DNA中的甲基图被称为DNA甲基化,一种表观遗传机制DNA甲基化是一种主要的表观遗传修饰,涉及通过DNA甲基转移酶在胞嘧啶的5位添加一个甲基以形成5-甲基胞嘧啶(5-mC)。此表观遗传标记具有打开或关闭基因的能力,可以通过细胞分裂来继承。DNA甲基化是第一个被发现的表观遗传标记,在人类正常发育,衰老,肿瘤发生以及其他遗传和表观遗传疾病中起着重要作用类似地,进一步发现,通过TET酶家族的5-mC氧化引起的DNA羟甲基与控制基因表达有关,并且是DNA甲基化循环中重要的DNA脱甲基过程。

多年来,测量5 mC的技术已经发展起来,并且从基于热的方法到基于化学的方法都可能不同。亚硫酸氢盐转化是一种流行的技术,用于制备用于基因特异性水平的甲基化分析的DNA。该过程将胞嘧啶转化为尿嘧啶,同时保留5-甲基胞嘧啶完整,以允许以单核苷酸分辨率进行甲基化分析。不仅必须进行有效的转化,而且由于苛刻的化学反应通常会使DNA降解,因此回收率必须达到最佳。

全面了解样品的甲基化状态是在进行下游应用之前预筛选样品的明智方法。在更深入的研究和昂贵的测序之前,可以使用我们的MethylFlash 全球DNA甲基化预筛选工具。对于这种基于ELISA的方法而言,不需要昂贵的设备或专业知识的常规方法(例如质谱法或色谱法)。此外,与基于LUMA或LINE-1,Alu和LTR的测定法不同,MethylFlash技术可直接对实际的整体DNA甲基化进行定量。从胞嘧啶到5-甲基胞嘧啶的甲基化胞嘧啶化学结构,5-mC

研究DNA甲基化的其他方法包括称为甲基化DNA免疫沉淀(MeDIP)的基于抗体的技术,该技术用于在全基因组范围内研究基因特异性DNA甲基化,测量DNA甲基转移酶(DNMT)的活性/抑制测定和其他与DNA甲基化过程有关的酶,以及涉及甲基化特异性PCR(MS-qPCR)的扩增技术,用于研究基因或序列特异性DNA甲基化。


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