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eBioscience多因子检测细胞和组织样本裂解处理方法 - 商家动态 - 生物...

  
  2025-07-18
  
正确的样本收集整理方法,是实验成功至关重要的步骤. 目前eBioscienceProcartaPlex(Luminex多因子检测)可以检测样本类型有: 细胞上清、血清、血浆、组织/细胞裂解液. 尽管其他生物学样本没有经过验证,但是理论上也可以检测,这些样本包括: 支气管肺泡灌洗液(BAL), 唾液,脑脊液(CSF), 尿液。 前面文章我们针对常见样本整理了收集、保存方法,具体请查阅: http://www.liankebio.com/article-information_Tech-319.html 细胞、组织样本怎么做才能继续处理后面的多因子检测呢? 小科带领大家来针对细胞、组织裂解液如何处理进行专题介绍。 2. 使用胰酶消化收集细胞;3. 将收集好的细胞转移至15ml圆形离心管,4oC, 500g离心5min;4. 小心去除上清,加入5ml预冷PBS重悬细胞,4oC, 500g离心5min;重复步骤4;5. 尽可能多的去除上清,小心不要碰到细胞沉淀。6. 在上步骤获取的细胞中,加入200ul ProcartaPlex Cell Lysis Buffer(EPX-99999-000)。7. 吹吸混匀8-10次,冰上孵育5min;8. 将所有细胞转移到1.5ml离心管;9. 4oC, 14000g(离心机最大转速)离心10min;10. 将上清转移到新管中。该上清可立即用于检测或者保存在-80oC;11. 按照多因子检测试剂盒操作方法检测。25ul细胞裂解液样本加入25ul Universal Assay Buffer(EPX-11111-000),作为一个样本加入到样本孔中。 悬浮细胞裂解方法1. 培养1 106-1 107个细胞;2. 将细胞转移到15ml圆形离心管,4oC, 500g离心5min;3. 小心去除上清,加入5ml预冷PBS重悬细胞,4oC, 500g离心5min;4. 尽可能多的去除上清,小心不要碰到细胞沉淀。5. 在上步骤获取的细胞中,加入200ul ProcartaPlex Cell Lysis Buffer(EPX-99999-000)。6. 吹吸混匀8-10次,冰上孵育5min;7. 将所有细胞转移到1.5ml离心管;8. 4oC, 14000g(离心机最大转速)离心10min;9. 将上清转移到新管中。该上清可立即用于检测或者保存在-80oC。10. 按照多因子检测试剂盒操作方法检测。样本孔加入25ul细胞裂解液和25ul Universal Assay Buffer(EPX-11111-000)。可选步骤:建议细胞裂解后上清进行蛋白定量检测。我们推荐使用Lowry法蛋白定量检测。建议将所有样本使用预冷的ProcartaPlex Cell Lysis Buffer调整样本蛋白浓度方为4-8 mg/ml。组织样本裂解方案:1. 收集组织样本-脾脏、肺、脑、肾脏、肝脏和心脏组织,称重。2. 按照每100mg组织加入500ul ProcartaPlex Cell Lysis Buffer (EPX-99999-000)。3. 使用研磨、机械匀浆器、磁珠裂解等方法将组织进行裂解匀浆;4. 4oC,16000g 离心10min;5. 将上清转移到新离心EP管中。6. 使用蛋白定量试剂盒对上清进行蛋白定量。7.使用1 PBS把样本进行稀释到10mg/ml;8. 按照多因子检测试剂盒Protocol进行检测。样本孔加入25ul Universal Assay Buffer(EPX-11111-000)和25ul 稀释后的组织上清液。当然,如您愿意,可以将您的样本直接寄送给我们,我们帮您做样本处理和多因子检测。以上信息来源:1. 细胞裂解方法:点我查看相关PDF2. 组织裂解方法:点我查看相关PDF 地址:浙江省杭州市拱墅区祥园路108号智慧信息产业园三期三号楼13层 邮政编码:310012 联系人: 电话:4006721600 传真:4006721600 Email:network@liankebio.com 展台:点击进入

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