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Exalpha对照抗体是分析设计的重要组成部分,可确保在基于抗体的应用过程中检测到信号,这可归因于特异性抗原结合,而非非特异性背景染色。
阴性同型对照通过确定一抗与靶标的非特异性结合水平来发挥功能。这是通过将对照抗体宿主物种,同种型以及如果适用的荧光染料与实验特异性抗体的物种匹配来实现的。如果将实验性一抗直接偶联,则需要匹配的荧光染料。阴性对照抗体是故意针对目标细胞或组织未表达的化学物或靶标产生的,因此任何结合本质上都是非特异性的。这种非特异性结合最常见是由目标样品表面表达的Fc受体引起的。这些受体不依赖于其Fab表位结合域而结合抗体的Fc区。
对照抗体最常用于流式细胞术或免疫组化以确定背景染色的水平,但也可以在添加一抗之前用作封闭剂。
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