在最近的一项研究中，Friedl 和 Graf（电泳，22, 890-895, 2001）使用以下任一方法比较了硝酸纤维素膜上生物素化蛋白质的检测：(A) 在暗读数器上可视化的荧光素标记的链霉亲和素的荧光透照仪，或：(B) 过氧化物酶-链霉亲和素缀合物分解鲁米诺 (ECL) 产生的发光。

方法通过 (A) 荧光素检测生物素化蛋白质的基本方案的简化摘要荧光或 (B) 鲁米诺发光如图所示。在这两种方法中，首先通过使用 t 放大局部生物素浓度。他采用\"催化报告沉积”技术，在原始生物素附近产生额外的生物素化。使用 Dark Reader 透照仪和 Hamamatsu CCD 相机在采集模式下检测荧光，曝光时间约为 10 秒。使用柯达 X 射线胶片检测发光，曝光时间长达 15 分钟。

结果结果表明，基于 Dark Reader 的荧光检测技术比使用 ECL 发光检测技术更加灵敏。使用 Dark Reader 透照仪可以检测不到 10 pg 的蛋白质，而使用 ECL 可以检测到 100 pg 以上的蛋白质。 Graf 和 Friedl 还指出了 ECL 信号的再现性和量化的几个问题以及背景问题。这些效应可以在较低蛋白质含量的广泛分散的 ECL 数据点中看到。

一种简单而灵敏的荧光技术，用于快速测定蛋白质磷酸凝胶中的结合态！ Molecular Probes 的 Pro-Q Diamond 染色剂是一种令人兴奋的新型染料，用于灵敏检测 1-D 和 2-D 凝胶中的磷蛋白。该染料在激酶研究和磷酸化蛋白质组学中具有广泛的应用。

SYPRO Ruby 污渍是来自 Molecular Probes 的新型发光金属螯合蛋白染色剂。染料在 470 nm 处被最大激发，发射峰约为 610 nm——这是与暗读数器一起使用的理想光谱特性。使用 Dark Reader 可在 SDS 凝胶中直接肉眼检测到约 2 ng SYPRO Ruby 染色的蛋白质，在印迹上可直接检测到约 8 ng。

– SYPRO Ruby 蛋白质凝胶染色剂可对 SDS 聚丙烯酰胺和二维凝胶上的蛋白质进行灵敏的荧光检测。

– SYPRO Ruby IEF 凝胶染色剂可检测载体两性电解质等电聚焦、固定 pH 和非变性凝胶中的蛋白质。

SYPRO Orange 染色剂（Molecular Probes, Inc.）是一种新型荧光染料，用于检测通过 SDS 或天然聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的蛋白质。详细描述使用 SYPRO Orange 对蛋白质凝胶进行染色的优秀报告可参见 Malone 等人，电泳，2001, 22, 919-932。）使用 DR 透照仪对 SYPRO Orange 染色蛋白质的检测限约为 2 – 肉眼观察和使用宝丽来 667 胶片均为 3 ng。这种灵敏度水平（尤其是肉眼观察）明显高于使用 UV 设备获得的灵敏度（约 20 ng）。

PBXL 荧光团（马泰克生物科学公司）基于从蓝藻和红藻中分离的光捕获蛋白。每次结合事件可提供多达 1400 个发色团，无需信号处理、信号放大或酶底物。可作为多种与链霉亲和素、或 IgG、PBXL 染料可用于多种印迹和免疫分析应用，而这些应用以前需要更繁琐的酶扩增方法。

AttoPhos

AttoPhos 和 AttoPhos Plus 是 JBL Scientific 发明的新型碱性磷酸酶底物Inc. 并由 Promega 分销。它们可用于以碱性磷酸酶为放大分子的任何测定，例如蛋白质印迹和 ELISA。AttoPhos 的激发和发射最大值分别为 440 nm 和 560 nm – 非常适合与 Dark Reader 一起使用. 与Dark Reade结合r，AttoPhos 可用于检测小于 100 pg 的目标蛋白。