小鼠杂交瘤细胞；D47-u使用说明书细胞一般2-3天更换一次培养基，这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一，周三，周五更换培养基。 【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。产品名称小鼠杂交瘤细胞；D47-u使用说明书货期3－5天发货地上海细胞名称 小鼠杂交瘤细胞；D47-u使用说明书形态特性 淋巴母细胞样生长特性 半贴壁生长特征特性 该杂交瘤细胞由湖南远泰生物技术有限公司制备并提交，细胞注射小鼠腹腔可产生高滴度的单抗，可用于基础研究和临床检验。培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes)10%FBS传代方法 1:3传代,2-3天传一代传代情况 C5冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS支原体检测 阴性STR 同工酶 同工酶鉴定染色体 使用权限 A类复苏操作要点：1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过zui易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BIU-87(人膀胱癌细胞)避免引起污染。3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。操作步骤：1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4 C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37 C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。11. 镜检观察。phospho-Kv2.1(Tyr128) 磷酸化钾通道蛋白DRK1抗体KCNC4 离子通道蛋白Kv3.4抗体KCNC3/Kv3.3 离子通道蛋白Kv3.3抗体KDM4B 组蛋白去甲基化酶JMJD2B抗体Ketohexokinase 肝果糖激酶抗体KY 脊柱侧后凸畸形肽酶抗体KAT2B 组蛋白乙酰转移酶PCAF抗体Phospho-c-Kit(Ser741) 磷酸化原癌基因c-kit抗体Phospho-c-Kit(Ser721) 磷酸化原癌基因c-kit抗体KCNC1 离子通道蛋白Kv3.1抗体KLK11 激肽释放酶11抗体Kappa Light Chain k轻链抗体重楼皂苷VI Polyphyllin VI 55916-51-3 736.92896 C40H64O12重楼皂苷VII Pennogenin tetraglycoside 68124-04-9 1031.18418 C51H82O21薯蓣皂苷;重楼皂苷III Dioscin 19057-60-4 869.05 C45H72O16薯蓣皂苷元 Diosgenin 512-04-9 414.63 C27H42O3原薯蓣皂苷 Protodioscin 55056-80-9 1049.19946 C51H84O22伪原薯蓣皂苷 Pseudoprotodioscin 102115-79-7 1031.18 C51H82O21纤细薯蓣皂苷 gracillin 19083-00-2 248.32 C15H20O3花椒毒酚;花椒毒醇 7H-Furo[3,2-g][1]benzopyran-7-one,9-hydroxy- 2009-24-7 202.16294 C11H6O4佛手柑内酯;香柑内酯;5-甲氧基补骨脂素 Bergapten 484-20-8 216.19 C12H8O4山柰酚;酚 kaempferol 520-18-3 286.24 C15H10O6连翘酯苷B Forsythoside B 81525-13-5 756.70176 C34H44O19双去氧基姜黄素 BIS(4-HYDROXYCINNAMOYL)METHANE 24939-16-0 308.33 C19H16O4C19H16O4 以上信息由企业自行提供，信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责，安防展览网对此不承担任何保证责任。温馨提示：为规避购买风险，建议您在购买产品前务必确认供应商资质及产品质量。