组织模型

MatTek 先进的 3D 体外共培养皮肤模型将人类黑素细胞融入分化良好的表皮组织中。使用领先的色素皮肤模型在体外评估新型皮肤增白剂。

MelanoDerm 是评估皮肤增白剂和配方的理想选择，全世界的化妆品科学家都在使用 MelanoDerm。减少与临床测试相关的时间和成本通过在 MatTek MelanoDerm 3D 组织模型中筛选化合物和配方来进行分析。

+ 下载

MatTek 的 MelanoDerm 系统由正常的人源表皮角质形成细胞 (NHEK) 和黑素细胞 (NHM) 组成，经过培养形成多层、高度分化的人类表皮模型。共培养物中的 NHM 经历黑素生成，导致组织色素沉着.MelanoDerm 使用无血清培养基生产，不含 TPA 和 IBMX 等人工黑素生成刺激剂。培养物在气液界面的组织培养插入物上生长，允许局部应用皮肤美白剂或自晒黑剂。MelanoDerm 提供了一种有用的体外方法来评估旨在调节皮肤色素沉着的化妆品和药物制剂。

MelanoDerm 表现出类似体内的形态和超微结构特征，这些特征均一且高度可重复。NHM 定位于基底细胞MelanoDerm 层是树突状的，会自发产生黑色素颗粒，并逐渐填充组织层。培养长达 3 周后，MelanoDerm 组织的色素变得越来越多，同时保留了正常的上皮形态。与含有白种人或亚洲人 NHM 的组织相比，含有黑人捐献者 NHM 的组织显示出色素沉着增加；所有三种类型的培养物均明显比不含 NHM 的组织 (EpiDermTM) 颜色更深。局部应用已知的黑色素生成抑制剂可显着减少黑色素的产生和宏观变黑。相反，组织内的 NHM 会对已知的黑素生成刺激物（例如 α-黑素细胞刺激激素和 β-成纤维细胞生长因子）做出反应，从而产生比未经处理的对照更快变黑的组织。近 20 年来，MelanoDerm 的简单检测已被纳入实验室作为完整的测试策略。拥有数十种技术参考资料越来越多的数据表明，MelanoDerm 提供了一种廉价且有效的方法来评估皮肤色素沉着，同时避免物种外推和使用实验动物。

MelanoDerm 提供了一种廉价且有效的方法来评估皮肤色素沉着，同时避免物种外推和使用实验室分析动物。简单的方案和早期细胞终点的评估使科学家能够在几天而不是几周或几个月内获取数据。

使用 SOLVABLE™ 黑色素测定进行定量测定，以确定组织中的黑色素含量。该测定可用于测试最终化妆品配方的皮肤提亮功效。

MelanoDerm (MEL-300 A、B、C) 使用方案

皮肤提亮应用说明

MelanoDerm 已用于研究皮肤色素沉着的生理机制。

搜索我们的技术参考资料库以获取更多信息。

试剂盒：标准 MelanoDerm™ 试剂盒（MEL） -300）由 24 个单独的组织组成，每个组织直径为 9 毫米。 （组织\"试剂盒”包含组织、少量培养基和塑料器皿；有关具体试剂盒内容，请联系 MatTek。）

基质：使用经过化学修饰、胶原蛋白包被的 9 mm ID 单孔组织培养板插入物。

接种比例：NHM:NHEK = 1/10。可根据要求提供 1/30 的比例。

组织学：8-12 细胞层（基底层、棘状层和颗粒层）。

角质层：10-15 层（基于 TEM）。

批号：每个技术人员每周生产的组织批次都会分配一个特定的批号。通常，任何一周的组织生产都有多个批号。批号末尾附加一个字母，以区分给定批次组织中的各个试剂盒。同一批次中的所有组织试剂盒在细胞、培养基、处理、培养条件等方面均相同。

运输：4°C 下，在 24 孔板中的添加培养基的琼脂糖凝胶上进行运输。

运输日期：每周一。如有特殊要求，还可在周四发货。

交付：周二上午通过 FedEx 优先服务（美国）交付。美国境外：周二至周三，具体取决于地点。

保质期：包括 tr 中的时间请注意，组织在使用前可在 4°C 下保存最多 6 天。但是，除非必要，否则不建议延长储存时间。此外，如果组织在同一天持续使用，将获得最佳的重现性。周二下午或在 4°C 下过夜储存后（周三上午）。

实验长度：培养可以持续至少 2 周，并能很好地保留正常表皮形态。必须每隔一天向培养物饲喂 5.0 mL 的新维持培养基 (EPI-100-NMM-3) 或 EPI-100-NMM-113。细胞培养插入物放置在悬挂顶板（HNG-TOP-12，提供）上，以允许使用 5.0 mL。

MEL-300-A（或 -B 或 -C）-EACH：与 MEL-300 相同，只是只有 1 个组织，而不是 24 个组织。

MEL-300-A（或 -B 或 -C）-FRZN-EA：已经历 3 次冷冻/解冻循环的 MEL-300-B 组织。设计用作黑色素检测的对照。

MEL-301（-A、-B、-C）：比 MEL-300 培养时间少 3 天，分化程度低于 MEL-300

MEL-312（-A、-B、-C）：与 MEL-300（-A、-B、-C）相同，只是每个套件有 12 个组织，而不是 24 个。

MEL-606（-A、-B、-C）：与 MEL-300（-A、-B、-C）相同，除了每个套件有 6 个组织，每个组织在较大直径的细胞培养插管（ID = 22 mm）。

MEL-300-FT（-A、-B、-C）：由含成纤维细胞的胶原基质（真皮）组成的全层人体皮肤组织模型；正常人表皮角质形成细胞和正常人黑色素细胞（表皮）。每个套件 24 个组织。

类型：a) 正常人表皮角质形成细胞 (NHEK)； b) 正常人类黑素细胞 (NHM)。

基因组成：NHEK 和 NHM 来自个体，但不同的供体。可根据特殊要求提供含有匹配的 NHEK 和 NHM 的组织。

种族来源：含有来自白种人 (MEL-300-C)、非洲裔美国人 (MEL-300-B) 和亚洲人 (MEL-300-A) 捐赠者的 NHM 的 MelanoDerm 可供选择。

源自：新生儿包皮组织。

替代品：A来自成人乳腺组织的 NHEK 和 NHM 菌株数量有限。

筛选：HIV、乙型肝炎和丙型肝炎。

基础培养基：Dulbecco 改良 Eagle 培养基 (DMEM)。

生长因子/激素：表皮生长因子、胰岛素、氢化可的松和其他表皮分化专有刺激剂。

血清：无。

血清：无。 p>

抗生素：庆大霉素 5 µg/mL（正常庆大霉素水平的 10%）。

抗真菌剂：两性霉素 B 0.25 µg/mL。

pH 指示剂：酚红。

其他添加剂：用于增强表皮屏障形成的脂质前体（专有）。

替代品：不含酚红提供 (MEL-300-B-PRF)、不含抗生素 (MEL-300-B-ABF)、不含抗真菌剂 (MEL-300-B-AFF) 和不含氢化可的松的培养基和组织 (MEL-300-B-HCF)。发货前至少 3 天除去试剂。

维护介质：建议使用三种维护介质。

对于需要考虑色素沉着和组织学的长期实验。重要的是，建议使用EPI-100-NMM-3、EPI-100-NMM-113或EPI-100-LLMM-3。

EPI-100-NMM-3（新维护培养基）含有KGF，可保留组织学，但不含任何直接促进色素沉着的因子。

EPI-100-NMM-113含有KGF、β-FGF和α-MSH，促进色素沉着以及组织学保留。

长效维持培养基 EPI-100-LLMM-3 含有高水平的 α-MSH 和 β-FGF，并且还含有与 EPI-100-NMM-3 和 EPI-100-NNM-113 相同水平的 KGF。 LLMM-3 中组织变黑最快，NMM-113 中较慢，NMM-3 中最慢。

每 48 小时添加 5.0 mL 培养基时，可获得最佳的组织学保留。

目视检查：对所有组织进行目视检查，如果发现物理缺陷，则拒绝运输组织。对选定的组织进行显微镜检查，以确保黑色素细胞可见（对于 MEL-300-B 和 MEL-300-A 组织），并且它们均匀分布在整个组织中。

最终使用测试：组织继续培养，以确保发生组织的宏观变暗。将组织暴露于 1% Triton X-100 中 5 小时。每批组织的 5 小时活力必须超过 35%，由 MTT 测定（参见 MatTek EpiDerm™ ET-50 方案）确定。

无菌性：检查整个生产过程中使用的所有培养基的无菌性。维持培养基在有或没有抗生素的情况下孵育 1 周并检查无菌情况。用于运输的 24 孔板的琼脂糖凝胶也孵育 1 周，并检查是否有任何污染迹象。

病原体筛查：所有细胞均经过 PCR 筛查，结果为 HIV、乙型肝炎和丙型肝炎阴性。然而，没有已知的测试方法可以完全保证细胞不含病原体。因此，这些产品和所有人类衍生产品应在 BSL-2 级别进行处理（biosafety 级别 2) 或更高，如 CDC-NIH 手册\"微生物和生物医学实验室的生物安全”，1998 年所建议的。如需进一步帮助，请联系您所在场所的安全官员或 MatTek 技术服务。

批次失败通知：如果组织批次未通过我们的 QC 或无菌测试，我们将通知客户，并在适当时免费更换组织。由于我们的质量控制和无菌测试是在发货后进行的，因此我们会尽快发出通知（正常情况下，存活率失败百分比将在周三下午 5 点之前通知；无菌失败将在发货后 8 天内通知）。

索取我们的一种体外组织产品报价，我们团队的成员将立即与您联系。

sales@mattek。 com +1-508-881-6771

联系 Viktor Karetsky +1-508-881-6771 X337 vkaretsky@mattek.com

我们已经帮您解决了。

使用基于人体细胞的 MelanoDerm 组织模型评估局部配方或活性物质的皮肤美白功效。

720

Kim1, M., Park1, J.、Song1、K.、Kim2、H.G.、Koh2、J.-S。和 Boo1，Y.C. 1分子医学与细胞与基质研究所标题，BK21 人力资源医学教育计划，大邱庆北国立大学医学院和韩国首尔 Dermapro Co. Ltd. 2Dermapro 皮肤研究中心。