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MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 | 博士德生物 BOSTER...
2025-06-20
产品货号：AR1156
产品价格：200元/500次
应用范围：细胞相关实验
产品类型：检测试剂盒
发货周期：现货
选择规格:
200元/500次产品概况产品货号AR1156产品名称MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒价格规格￥200/500次保存条件MTT染色液,-20℃避光保存；Formazan溶解液可以室温保存。内容MTT染色液 5ml
Formazan溶解液 55ml产品简介1.MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的实验方法。由于细胞活力与细胞数呈正相关，因此常常用来检测细胞的增殖情况。MTT可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物formazan。在特定溶剂存在的情况下，可以被完全溶解。然后通过酶标仪可以测定570nm波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快，则吸光度越高；细胞毒性越大，则吸光度越低。
2.本试剂盒采用了独特的Formazan溶解液配方，无需去除原有的培养液，可以直接加入Formazan溶解液溶解formazan。从而避免了由于去除培养液时formazan被部分去除而引起的误差。
3.本试剂盒背景低，灵敏度高，线性范围宽，使用方便提高了可靠性。
4.本产品为500 次（5个96孔细胞培养板）操作。注意事项：1. 由于使用96孔板进行检测，如果你的细胞要养48 小时或更长，建议不要吝啬96-孔板的四周边孔，这32个边孔不能使用，建议加入灭菌PBS以饱和中间64个孔的水分。因为细胞培养过程中，边孔的水分蒸发很快，培养液及里面的药物会出现浓缩现象，细胞的状况就复杂了。
2. MTT溶剂在低温情况下会凝固，使用前请室温放置或20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
3. MTT一般最好4?C避光保存两周内有效，保存在-20度长期保存，避免反复冻融，最好小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解，当MTT变为灰绿色时就表明MTT已失效。
4. Formazan溶解液结冻或产生沉淀时可以37℃水浴孵育以促进溶解，并且必须在全部溶解并混匀后使用。
5. 孵育时，须避光。
6. MTT有致癌性，用的时候小心,有条件最好带那种透明的簿膜手套. MTT需要无菌，MTT对菌很敏感。
Instructions
1. 收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入100ul,细胞增殖实验每孔加入2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入5000个细胞（96孔板，具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。加入浓度梯度的药物，原则上，细胞贴壁后即可加药，每孔0-10ul，设3-5个复孔。
2. 5%CO2，37℃孵育16-48小时，置显微镜下观察。
3. 每孔加入10微升MTT染色液，继续培养4h。若药物与MTT能够反应，可先离心后弃去培养液，小心用PBS洗2-3遍后，再加入含MTT的培养液。
4. 每孔加入100微升Formanzan溶解液，在细胞培养箱内再继续孵育。直至在普通光学显微镜下观察发现formazan全部溶解。通常37℃孵育4小时左右，紫色结晶会全部溶解。如果紫色结晶较小较少，溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大较多，溶解的时间会长一些。（也可以每孔加入50ul的DMSO，细胞培养箱孵育10min，紫色结晶基本全部溶解，加入DMSO之前需去除细胞培养液。）
5. 在酶联免疫检测仪570nm测定吸光度。如无570nm滤光片，可以使用560-600nm的滤光片。
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