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大鼠促甲状腺激素(TSH)ELISA试剂盒使用说明书-技术文献-北京伯乐...

  
  2024-04-27
  
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大鼠促甲状腺激素(TSH)ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。药品名称:通用名:大鼠促甲状腺激素(TSH)酶联免疫分析试剂盒使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关组织样本中促甲状腺激素(TSH)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠促甲状腺激素(TSH)水平。用纯化的大鼠促甲状腺激素(TSH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入促甲状腺激素(TSH),再与HRP标记的促甲状腺激素(TSH)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠促甲状腺激素(TSH)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠促甲状腺激素(TSH)浓度。试剂盒组成

1 20倍浓缩洗涤液 30ml 1瓶 7 终止液 6ml 1瓶 2 酶标试剂 6ml 1瓶 8 标准品(1250 IU/L) 0.5ml 1瓶 3 酶标包被板 12孔 8条 9 标准品稀释液 1.5ml 1瓶 4 样品稀释液 6ml 1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂A液 6ml 1瓶 11 封板膜 2张 6 显色剂B液 6ml 1/瓶 12 密封袋 1个

标本要求1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融操作步骤1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在*、第二孔中分别加标准品100 l,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50 l,混匀;然后从*孔、第二孔中各取100 l分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50 l,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50 l弃掉,再各取50 l分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50 l分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50 l,混匀后从第七、第八孔中分别取50 l加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50 l,混匀后从第九第十孔中各取50 l弃掉。(稀释后各孔加样量都为50 l,浓度分别为900 IU/L,600 IU/L ,300 IU/L,150 IU/L, 75 IU/L)。2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40 l,然后再加待测样品10 l(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6. 加酶:每孔加入酶标试剂50 l,空白孔除外。7. 温育:操作同3。8. 洗涤:操作同5。9. 显色:每孔先加入显色剂A50 l,再加入显色剂B50 l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10. 终止:每孔加终止液50 l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。检测范围:50 IU/L -1000 IU/L规格:96人份/盒保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月 [ 打印 ][ 返回顶部 ] [ 关闭 ]

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