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为君主基因组 DNA 纯化试剂盒选择输入量 |鼻

  
  2025-11-15
  
主页工具和资源使用指南为 Monarch 基因组 DNA 纯化试剂盒选择输入量为 Monarch 基因组 DNA 纯化试剂盒选择输入量下表显示了可使用 Monarch 基因组 DNA 纯化试剂盒处理的各种样本类型的推荐和最大输入量套件(NEB #T3010)。此外,还显示了典型的产量和 DIN 值。使用超过推荐量的输入量将导致这些样品的产量和纯度降低。如果需要更多起始材料,建议将样品拆分并在多根色谱柱上进行处理。对于预期产量 <100 ng(相当于 5 µl 全血、1 x 104 个培养细胞或 0.2 mg 组织)的低输入量,建议使用载体 RNA(请参阅产品中的\"使用 CarrierRNA 进行低输入” manual).

不同样本对组织样本纯化工艺的要求差异很大类型。因此,针对各个组织组指示了不同的输入量,并且方案中提供了额外的指南,以确保为每种组织类型获得最佳结果。样品类型推荐的输入量典型产量(μg)DIN最大输入量组织*尾巴(小鼠) )10 mg12–208.5–9.525 mgEar (mouse)10 mg18–218.5–9.510 mgLiver (mouse and rat)10 mg15–308.5–9.515 mgKidney (mouse)10 mg10–258.5–9.510 mgSpleen (mouse)10 mg30–708.5–9.510 mgHeart (小鼠)10 mg9–108.5–9.525 mg 肺(小鼠)10 mg14–208.5–9.515 mg 脑(小鼠和大鼠)10 mg4–108.5–9.512 mg 肌肉(小鼠和大鼠)10 mg4–78.5–9.525 mg 肌肉(鹿)10 mg58。 5–9.525 mg 血液**人(全)100 μl2.5–48.5–9.5100 μl小鼠100 μl1–38.5–9.5100 μl兔100 μl3–48.5–9.5100 μl猪100 μl3.5–58.5–9.5100 μl豚鼠100μl3–88.5–9.5100 μlCow100 μl2–38.5–9.5100 μlHorse100 μl4–78.5–9.5100 μlDog100 μl2–48.5–9.5100 μl鸡(有核)10 μl30–458.5–9.510 μlCellsHeLa1x106 cells7–99.0–9.55x106 cellsHEK2931x106 cells7–99.0–9.55x106 cellsNIH3T31x106 cells6– 7.59.0–9.55x106 个细胞细菌E。大肠杆菌(革兰氏阴性)2 x 109 个细胞6–108.5–9.02 x 109 个细胞红杆菌属。 (革兰氏阴性)2 x 109 个细胞 6–108.5–9.02 x 109 个细胞 B。蜡样(革兰氏阳性)2 x 109 个细胞 6–98.5–9.02 x 109 个细胞 ArchaeaT。 kodakarensis2 x 109 个细胞3–58.5–9.02 x 109 个细胞酵母 S。酿酒酵母5 x 107 个细胞0.5–0.68.5–9.05 x 107 个细胞唾液/口腔细胞***唾液(人)200 µl2–37.0–8.0500 µl 口腔拭子(人)1 拭子5–76.0–7.01 拭子

* 组织 gDNA 产量显示为冷冻组织粉末、冷冻组织块和 RNAlater-stab组织碎片。虽然冷冻组织粉末可产生高度完整的 gDNA,但与使用冷冻或 RNAlater 稳定的组织片相比,产量可能较低。组织碎片中残留的核酸酶活性会切割 gDNA,导致整体尺寸略小;然而,这种 gDNA 最适合基于二氧化硅的纯化。** 用各种抗凝剂(例如 EDTA、柠檬酸盐和肝素)和各种抗衡离子稳定的人类全血样本经过评估,结果在所有情况下都具有可比性。此外,所有指定的血液样本都作为新鲜和冷冻样本进行了测试,产生了可比的结果。人体样本由健康人捐赠;来自不健康捐献者的产量可能不同。*** 口腔拭子和唾液样本部分由死细胞材料和降解的 gDNA 组成。因此,从这些样本中纯化的 gDNA 自然会具有较低的 DIN 值。

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