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组织学技术中的问题与解决方案

2025-05-09

组织病理学技术中的问题

编制者

ROY ELLIS

IMVS 病理科

伊丽莎白女王医院

Woodville Road, Woodville, South Australia 5011

Email:roy.ellis@imvs.sa.gov.au

问题编号 23

如何恢复组织切片的核染色暴露于过度固定或过度脱钙

周期性的酸法是一种方法（问题 21），但它不适用于过度脱钙的材料，也不适用于经过福尔马林以外的固定剂处理的材料。所以如果固定剂是 Zenker 的：

尝试将脱石蜡部分放入 10% 的碳酸氢钠水溶液中 6 到 8 小时——不幸的是，这些修复中的大多数都不是快速修复。然后

用流水冲洗载玻片 10 分钟

然后照常染色。

Zenkers 是一种酸性很强的固定剂，pH 值为 2.3，碳酸氢钠具有对酸性物质的中和作用，可能正是这种中和作用使染料更好地结合组织，增强了染色反应。

如果 fixative isBouin\'s:

然后将切片放入 5% 的碳酸锂中 16 小时

用流水清洗 30 分钟

然后照常染色。

Bouin 含有苦味酸，组织中残留的任何未结合的苦味酸都会妨碍充分染色。它通常需要在处理前用流水清洗组织来去除。如果组织处理后苦味酸仍未正确去除，则可以使用此方法去除。碳酸锂呈碱性，可中和因固定在布因液中而引起的组织酸度。但真正去除未结合的苦味酸的是流水。无论如何它都有效。有趣的是，如果配方中的甲醛被甲酸取代，Bouin\'s 将成为一种很好的脱钙剂随后在骨组织中具有出色的染色特性。 24 小时通常对于小骨头来说就足够了，而对于骨髓来说则需要几个小时。

如果固定剂是未缓冲的福尔马林：你可以使用 0.05% 高碘酸

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如果问题是过度脱钙：

你可以用像 Weigert 那样的铁苏木精染色，而不是用明矾苏木精染色。在 Weigert 苏木精中染色 30 分钟，然后根据需要进行发蓝和分化。根据我的经验，很难正确控制差异化，染色的载玻片在最好的时候看起来很脏，所以我推荐

Celestin blue-Haemalum 序列，可提供更清晰、更清晰的结果

但请记住，一些过度脱钙的材料永远不会染色。

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