一步PCR——基因扩增技术的新革命

VitaNavi Technology公司 www.vitanavitech.com

       PCR技术已广泛应用于遗传病分子诊断、临床检验、动植物进出口检疫、食品安全监测、土壤微生物检测和亲子鉴定等众多领域。由于血液、食物、土壤等样本中含有大量抑制因子，如血红蛋白、高铁血红素、乳铁蛋白、腐植酸等，对常规Taq DNA聚合酶将产生明显的抑制作用。因此，必须先从这些待测样本分离提取核酸，然后用于PCR扩增。显然，传统方法操作步骤多、成本高、对样品的需要量较大且易于造成交叉污染。美国VitaNavi Technology 公司研发的新型高耐受性DNA聚合酶为基因检测技术带来了根本性的革新，彻底解决了依赖于纯化的核酸DNA为模板进行PCR扩增这一瓶颈问题。

       VitaNaviTechnolog是总部在美国的一家专门从事Taq酶及其相关产品研发与销售的国际高科技生物公司。该公司生产的新一代突变的Taq和Klentaq酶可耐受反应中高浓度的抑制因子，具有内在热启动特性，不需抗体或化学修饰。生产的PCR增强剂可改善PCR的结果, 从GC含量 80% 的样品中成功扩增目的基因。 该公司产品被广泛应用于临床诊断，法医鉴定，动、植物检疫，食品及环境监测，畅销全球40多个国家和地区，是目前国际上生产PCR聚合酶的主要供应商之一。

    
      2012年12月VitaNavi Tech公司授权“深圳市盎然生物科技有限公司”为其在中国大陆及香港地区的合法代理商，经营所有VitaNavi Tech公司的产品。
 

核心产品介绍：
       VitaNavi Tech公司的核心产品是一类经基因工程改造的Taq DNA聚合酶，主要有Klentaq、Omni Taq、Omni Klentaq、Cesium Taq或Cesium Klentaq等，每一种聚合酶包括常规和LA（long accurate）两种类型。Klentaq是缺失了N端278个氨基酸的Taq酶，与野生型Taq酶相比，截短的Klentaq酶具有更高的保真性和热稳定性；Omni 酶是从文库中筛选出来的具有极高耐受性的Taq或者Klentaq突变体，可以直接以全血、血清、土壤、牛奶、巧克力或奶酪等材料为模板一步扩增目的基因，避免了繁琐的核酸DNA提取过程；Cesium酶是筛选出来的另一种聚合酶突变体，其特征是在常温下活性很低，而当温度达到68℃以上时，Taq酶的活性得到完全恢复，因此，Cesium酶具有天然的热启动（Hot start）特性。

VitaNavi Technology产品选购


 

一、Klentaq1 / Klentaq LA 

实例1：用Kelntaq LA扩增大于20kb的大片段基因。
 

二、高耐受性(Inhibitor-Resistant) 聚合酶：OmniTaq / Omni Klentaq
产品特征：
1. 对全血、血清、血浆、土壤、植物、巧克力、奶酪和牛奶中的抑制因子具极高的耐受性，可直接对样品进行PCR检测，无需进行DNA分离纯化。
2. 可以耐受高达40% 的全血，20% 的血浆或血清，已应用于多种遗传病的分子诊断和临床检验。
3. 可用于法医、环境监测、农业、动植物检疫和临床诊断等领域。
4. 可以从人血液中一步扩增疟疾基因。
5. 与PCR增强剂结合使用时，其耐受性将进一步提高。
6. 使用Omni 酶不仅节省时间、降低成本，而且实现了从微量样品中的扩增，避免因提取过程所致的DNA丢失或污染。

实例 2：用OmniTaq（OT） 和 Omni Klentaq（OKT）从肝素抗凝血液中一步扩增乙肝病毒基因。
 

实例 3：用新突变的Omni酶从富含腐殖酸的人基因组中扩增1.1kb的CCR5基因。
 

实例 4：用新突变的Omni酶从巧克力和黑胡椒中直接扩增基因。

 
三、热启动聚合酶(Hot-start) 聚合酶：Cesium Taq / Cesium Klentaq
产品特征：
1. Cesium Taq 和Cesium Klentaq是一种冷敏感的突变体，在室温条件下聚合酶的活性很低，当升高温度进入PCR循环时聚合酶的活性就全部释放出来，因而具有内置式热启动功能。
2. 与现有化学修饰或抗体封阻的热启动聚合酶相比，Cesium Taq 和Cesium Klentaq的聚合酶活性更高，扩增效果更好。
3. Cesium Klentaq具有热启动和高耐受性双重效果。

实例 5：用Cesium Klentaq扩增基因热启动效果比较

 
四、PCR增强剂（PCR enhancing cocktails, PEC）
产品特征：
1. 联合使用PEC-1 或 PEC-2与高耐受性Taq酶（OmniTaq and Omni Klentaq）可以更好的克服样品中各种物质对PCR反应的抑制作用，进一步提高PCR扩增效率，简化PCR操作流程提高。
2. PEC有助于从基因组中扩增GC含量高达80%的基因。
3. PEC也可用于qPCR（SYBR和Taqman probe）。
4. 新研发的PCR增强剂PEC-3 and PEC-4有助于从食品中扩增基因。

实例 6：联合使用Omni Taq or Omni Klentaq及PCR增强剂（PEC）从不同类型的牛奶中检测沙门氏杆菌 Inv 基因。
 

实例 7：联合使用Omni Taq or Omni Klentaq及PCR增强剂（PEC）从人的基因组DNA或全血中直接扩增3个高GC含量的基因。
 

五、各种特异性一步PCR试剂盒
VitaNavi Tech公司开发了系列一步法PCR和qPCR试剂盒，可以直接从样品中扩增目的基因。

1. Direct Blood PCR Kit： 从血液中直接扩增目的基因

实例 8：使用Direct Blood PCR Kit从全血中一步扩增CCR5基因
 

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