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AAT Bioquest/Screen Quest™ CHO-Gqz Chimera Cell line/38103/Each
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AAT Bioquest/Screen Quest™ CHO-Gqz Chimera Cell line/38103/Each
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AAT Bioquest
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MWN/A
CAS#N/A
SolventN/A
StorageN2(L)
CategoryGPCR
cAMPGPCRAssays
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ScreenQuest™celllinesareaseriesofcellsthathavebeensuccessfullyusedindrugdiscoveryandscreeningenvironmentsforstudyingG-protein-coupledreceptors(GPCR)thatdonotconventionallycouplethroughintracellularcalcium.IthavebeeneffectivelyusedwiththeFLIPR,FDSSSystemsinconjunctionwithnon-Gqcoupledmembersofmanyreceptorssuchaschemokine,SEROtonin,glutamate,dopamine,opoid,vasopressinand?-andß-adrenoceptorreceptorfamilies.Over60%oftheknownG-protein-coupledreceptorssignalthroughpathwaysotherthanGqwhichleadtoanincreaseinintracellularcalcium,andasgenomicsrevealsmoreG-protein-coupledreceptortargetsthistrendcontinuestoincrease.ScreenQuest™celllinesareusedforinvestigatingG-protein-coupledreceptors(GPCR)thatdonotconventionallycouplethroughintracellularcalcium.ScreenQuest™celllinesarebasedonaseriesofG-proteinchimeras,includingthepromiscuousG-protein,G?16.ThechimerasconsistofthealphasubunitofaGq-proteincomplexwhose5carboxy-terminalaminoacidshavebeenreplacedwiththosefromoneoftheotherG-proteins(eitherG?s,G?i,G?o,orG?z).TheseaminoacidsareresponsIBLeforthecouplingofthereceptortoitsG-protein.Co-expressionofthesechimeraswithspecificnon-Gq-coupledreceptorswhichnormallyactthroughthecAMPpathwaymayresultinthegenerationofanintracellularcalciumsignaluponreceptorstimulation.ScreenQuest™CHO-GqzcelllineisCHO-K1cellsstablytransfectedwiththechimericGqzalphasubunitprotein.WhenusedasahostcellfortransfectionexpressionofGi-coupledreceptors,theconstitutivelyexpressedGqzproteininthecellsallowsthetransfectedreceptorwhichnormallyactthroughthecAMPpathway,tocoupletoGqsignaltransductionandmobilizedintracellularcalcium.Activationofthespecificnon-Gq-coupledreceptorsinthesecellsbyspecificligandscanbedetectedusingcalciumsensitivedyessuchasCal-520AM,Fluo-8AM,orFluo-4AM.

Thisprotocolonlyprovidesaguideline,andshouldbemodifiedaccordingtoyourspecificneeds.
  1. CellDensityandStorage
    Thecellsarefrozenatadensityof2X106cellsin90%fetalbovineserumand10%(v/v)DMSO.ToinsurethehighestlevelofviABIlity,thawthevialandinitiatethecultureassoonaspossibleuponreceipt.Cellsmustbestoredinliquidnitrogenifnotimmediatelyprocesseduponreceipt.
  2. CellCultureMedium
    Basalmedium:Ham’sF12culturemediumcontaining10%fetalbovineserum,2mML-glutamine,100units/mLpenicillin,100µg/mLstreptomycin(Basalmedium).
    SelectionMedium:BasalMediumwith200µg/mLhygromycinBand400ug/mLG418.
  3. ThawingandSeedingCells
    1. PrepareBasalMedium.Prepare37°CWaterBath.Thawcellsrapidlybyremovingfromliquidnitrogen,andimmediatelyimmersingina37°Cwaterbath.Removethevialfromthewaterbathassoonasthecontentsarethawed,andsterilizetheexteriorofthevialwith70%ethanol.Alloftheoperationsfromthispointonshouldbecarriedoutunderstrictasepticconditions.
    2. Addvialcontentsto25mLcellculturemediuminT75TissueCultureTreatedFlask.Gentlyswirlflaskandplaceinahumidified,tissuecultureincubator,37°C,5%CO2.
    3. Alllivecellsshouldbeattachedafter18-24hourspost–thaw.ChangeBasalMediumwithSelectionMedium.
  4. SubcultureandPropagation
    1. Whencellsareapproximately80%confluent,passagethecells.
    2. Passagethecells1:10every3-4days,usingTrypsin-EDTAtodissociatethecells.
    3. Itishighlyrecommendedthatafrozencellbankbeestablishedatlowpassagenumber.
References&Citations
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ActivationofP2X7andP2Y11purinergicreceptorsinhibitsmigrationandnormalizestumor-derivedendothelialcellsviacAMPsignaling
Authors:DAvanzato,TGenova,AFiorioPla,MBernardini,SBianco,BBussolati,DMancardi,EGiraudo,FMaione,PCassoni
Journal:ScientificReports(2016)

TheM2muscarinicreceptorsareessentialforsignalingintheheartleftventricleduringrestraintstressinmice
Authors:HanaTomankova,PaulinaValuskova,EvaVarejkova,JanaRotkova,JanBenes,JaromirMyslivecek
Journal:Stress(2015)


AAT Bioquest AAT Bioquest是一家位于美国的生物公司,前身为ABD Bioquest,总部位于加利福尼亚州。专门从事光学检测技术十多年,一直致力于光谱学检测领域技术的创新和突破。其独特的光学检测技术,综合了化学、生物学和信息学等各个领域的研究,引领了比色、荧光和发光技术新一代光学探针的浪潮。AAT Bioquest在全球拥有强大的经验丰富的专业分销商网络,为从小型研究机构到《财富》500强企业的各类客户提供卓越的产品和定制服务。


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1)我们提供反应荧光探针和发光探针,生物素和端粒酶能够应用于标记药物小分子和生物聚合物,如蛋白、核酸以及其他碳水化合物;2)我们研究并生产荧光和发光探针用于检测蛋白,核酸和活细胞。3)我们不断的推出新型的荧光和发光探针用于检测多种酶,特别是检测水解酶和氧化还原酶类;4)我们致力于开发用于信号转导研究的试剂;5)我们提供生理和神经探针,特别是钙离子指示剂和膜电位探针。

作为AATBioquestInc.的中国区域代理,艾美捷科技为中国客户提供光谱学检测领域,包括吸收(颜色),荧光和发光技术等全系列解决方案。我们也将一如既往更加努力为国内用户提供快捷、方便的高质量产品,同时更为您售前售后全面技术支持。

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Besidesthestandardcatalogproductswealsooffercustomservicetomeetyourspecialresearchneeds.Ourcurrentservicesincludecustomsynthesisofcolorimetric,fluorescentandluminescentprobes,customdevelopmentofbiochemical,cell-basedanddiagnosticassaysandcustomscreeningofyourcompoundlibrariesagainstyourdefinedtargetsusingourvalidatedHTSassays.

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如题,求助。做肝癌细胞侵袭、迁移实验,用哪种细胞株比较好?

各位大侠豪客,小的新手一枚,潜水有一阵,目前朋友遇到这样一个问题,说出来估计大家都了解。她们公司不大,没能力买生产权限的ATCC细胞株,只能暂时买科研权限的便宜细胞株,但又要进行临床申报和后续的生产申报,各位大侠,有没有合适的或者合理的途径,经验,或者建议,最好能规避细胞株不能用于生产这一规定。小的知识量少的可怜,更不懂ATCC细胞株的生产权限细胞株购买的咨询,程序和途径。问了几个小的代理公司,也问到了北京中原,都说所出售的细胞株只能用于科研,不能用于生产。各位大大,有没有好的建议或者谁是过来人,给小的分享一下经验,特别谢谢!
版主zhulikou431留言:
鼓励新手。
患者信息:女24岁江苏南京
病情描述(发病时间、主要症状等):
体检血常规中血小板计数343.血小板比积0.39.
尿检中白细胞计数26.2.上皮细胞计数10.30
心电图下写窦性心律,p-r间期偏短

想得到怎样的帮助:
有没有什么大问题
我一直在养肝癌细胞株HepG2,用的是10%小牛血清和1640培养基,开始一个月的时候细胞养的挺好的,可是自从10月8号开始细胞第一次污染,如图所示,细胞间隙间有很多小黑点,光学显微镜下没有看到运动,细胞上面好像雾蒙蒙的很模糊的一层流沙样的,每次发现后细胞全部丢弃。重新复苏,复苏后的前几天细胞看着还可以,小黑点非常非常少,基本没有,在第5天第一次传代,第6天后细胞长满,再次传代后第二天(今天)早上观察细胞细胞就如图所示了,培养基没有浑浊,很郁闷!不知道哪位前辈遇到过类似情况,到底是细菌污染还是支原体污染啊?急着做实验啊,希望哪位前辈指导一下,谢谢了!



血常规分三大部分,
你的第一部分,白细胞和中性粒细胞偏低,说明免疫力低,最近要多保养,不受凉,近期容易生病。不过数据也不是太低的,也不用过于担心,多吃多睡,过一段时间复查,可能会好转为正常。另外消炎药,止痛,退热药尽量不吃,这些药会加重白细胞下降的。
第二部分,最主要的红细胞和血红蛋白是正常的,总体看还是正常的。但是下面数据有点低,而且只低一点,问题不大,多吃点米饭,红枣,肉等,会好转的。
第三部分,血小板部分是正常的。
你这种检查单,最主要的是免疫力低下,注意多吃多睡,别受凉,少烦神少劳累,引起白细胞低的药物尽量不吃。
稳转细胞株构建123
l小呆2016-01-21
现在准备构建两株细胞的稳转细胞系,进行了一点实验,其中一株细胞在筛选过程中几乎都死光了,另一株目前还好,有几个问题想请教一下园子里的高手,还请给位给点建议。
G418浓度之前师兄已经摸索出来,这次筛选直接用师兄浓度。
1、6孔板转染后多长时间开始进行G418筛选?
2、G418筛选是在6孔板中继续筛选还是转到24/96孔?大皿?
3、G418浓度什么时候减量
4、?筛选过程中荧光观察一小部分克隆不错,如何挑选出来?
5、整个筛选过程大约需要多长时间?
lipo3000筛选
谢谢大家!
请教各位:
目前想建立家系血标本的淋巴细胞的永生化细胞株,请问有哪些成熟的方法及protol,费用贵么?
我买了一管ATCC细胞株。是不是最好大量培养,然后冻存,分次取用于实验?但以前没买过,不知道“一管”第一次要用多少培养基培养呢?
请教处理步骤。
小弟,近期开始培养乳腺癌细胞,导师让了解一下咯细胞株的特性,在网上百度了一下,找不全。MDA-MB-231,MDA-MB-468,MDA-MB-435,SKBR3,MCF-7......只百度出MCF-7是ER(+),PR(+),Her-2(-)
希望有大神赐教!谢谢!
您好,所谓的“圆细胞”,包括泌尿生殖道的上皮细胞,前列腺细胞,生精细胞和白细胞几项数据。属于非精子细胞成分。圆细胞数量偏高就是说你的精液中非精子细胞偏高了。但临床上很少应用此项数据,因为无直接说明。
我是入职体检的报告单上的,会不会影响公司对我的录取啊,我是景观公司的,网上说是有轻度的泌尿系感染,影响不大吧应该。。
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