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AAT Bioquest/Screen Quest™ CHO-Gqz Chimera Cell line/38103/Each
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AAT Bioquest/Screen Quest™ CHO-Gqz Chimera Cell line/38103/Each
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AAT Bioquest
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SolventN/A
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CategoryGPCR
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ScreenQuest™celllinesareaseriesofcellsthathavebeensuccessfullyusedindrugdiscoveryandscreeningenvironmentsforstudyingG-protein-coupledreceptors(GPCR)thatdonotconventionallycouplethroughintracellularcalcium.IthavebeeneffectivelyusedwiththeFLIPR,FDSSSystemsinconjunctionwithnon-Gqcoupledmembersofmanyreceptorssuchaschemokine,SEROtonin,glutamate,dopamine,opoid,vasopressinand?-andß-adrenoceptorreceptorfamilies.Over60%oftheknownG-protein-coupledreceptorssignalthroughpathwaysotherthanGqwhichleadtoanincreaseinintracellularcalcium,andasgenomicsrevealsmoreG-protein-coupledreceptortargetsthistrendcontinuestoincrease.ScreenQuest™celllinesareusedforinvestigatingG-protein-coupledreceptors(GPCR)thatdonotconventionallycouplethroughintracellularcalcium.ScreenQuest™celllinesarebasedonaseriesofG-proteinchimeras,includingthepromiscuousG-protein,G?16.ThechimerasconsistofthealphasubunitofaGq-proteincomplexwhose5carboxy-terminalaminoacidshavebeenreplacedwiththosefromoneoftheotherG-proteins(eitherG?s,G?i,G?o,orG?z).TheseaminoacidsareresponsIBLeforthecouplingofthereceptortoitsG-protein.Co-expressionofthesechimeraswithspecificnon-Gq-coupledreceptorswhichnormallyactthroughthecAMPpathwaymayresultinthegenerationofanintracellularcalciumsignaluponreceptorstimulation.ScreenQuest™CHO-GqzcelllineisCHO-K1cellsstablytransfectedwiththechimericGqzalphasubunitprotein.WhenusedasahostcellfortransfectionexpressionofGi-coupledreceptors,theconstitutivelyexpressedGqzproteininthecellsallowsthetransfectedreceptorwhichnormallyactthroughthecAMPpathway,tocoupletoGqsignaltransductionandmobilizedintracellularcalcium.Activationofthespecificnon-Gq-coupledreceptorsinthesecellsbyspecificligandscanbedetectedusingcalciumsensitivedyessuchasCal-520AM,Fluo-8AM,orFluo-4AM.

Thisprotocolonlyprovidesaguideline,andshouldbemodifiedaccordingtoyourspecificneeds.
  1. CellDensityandStorage
    Thecellsarefrozenatadensityof2X106cellsin90%fetalbovineserumand10%(v/v)DMSO.ToinsurethehighestlevelofviABIlity,thawthevialandinitiatethecultureassoonaspossibleuponreceipt.Cellsmustbestoredinliquidnitrogenifnotimmediatelyprocesseduponreceipt.
  2. CellCultureMedium
    Basalmedium:Ham’sF12culturemediumcontaining10%fetalbovineserum,2mML-glutamine,100units/mLpenicillin,100µg/mLstreptomycin(Basalmedium).
    SelectionMedium:BasalMediumwith200µg/mLhygromycinBand400ug/mLG418.
  3. ThawingandSeedingCells
    1. PrepareBasalMedium.Prepare37°CWaterBath.Thawcellsrapidlybyremovingfromliquidnitrogen,andimmediatelyimmersingina37°Cwaterbath.Removethevialfromthewaterbathassoonasthecontentsarethawed,andsterilizetheexteriorofthevialwith70%ethanol.Alloftheoperationsfromthispointonshouldbecarriedoutunderstrictasepticconditions.
    2. Addvialcontentsto25mLcellculturemediuminT75TissueCultureTreatedFlask.Gentlyswirlflaskandplaceinahumidified,tissuecultureincubator,37°C,5%CO2.
    3. Alllivecellsshouldbeattachedafter18-24hourspost–thaw.ChangeBasalMediumwithSelectionMedium.
  4. SubcultureandPropagation
    1. Whencellsareapproximately80%confluent,passagethecells.
    2. Passagethecells1:10every3-4days,usingTrypsin-EDTAtodissociatethecells.
    3. Itishighlyrecommendedthatafrozencellbankbeestablishedatlowpassagenumber.
References&Citations
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ActivationofP2X7andP2Y11purinergicreceptorsinhibitsmigrationandnormalizestumor-derivedendothelialcellsviacAMPsignaling
Authors:DAvanzato,TGenova,AFiorioPla,MBernardini,SBianco,BBussolati,DMancardi,EGiraudo,FMaione,PCassoni
Journal:ScientificReports(2016)

TheM2muscarinicreceptorsareessentialforsignalingintheheartleftventricleduringrestraintstressinmice
Authors:HanaTomankova,PaulinaValuskova,EvaVarejkova,JanaRotkova,JanBenes,JaromirMyslivecek
Journal:Stress(2015)


AAT Bioquest AAT Bioquest是一家位于美国的生物公司,前身为ABD Bioquest,总部位于加利福尼亚州。专门从事光学检测技术十多年,一直致力于光谱学检测领域技术的创新和突破。其独特的光学检测技术,综合了化学、生物学和信息学等各个领域的研究,引领了比色、荧光和发光技术新一代光学探针的浪潮。AAT Bioquest在全球拥有强大的经验丰富的专业分销商网络,为从小型研究机构到《财富》500强企业的各类客户提供卓越的产品和定制服务。


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企业如何进口细胞株
各位,最近几个月一直在帮着公司进口细胞株,我是新手,从来没有接触过这样的业务,摸着石头过河,遇到了很多问题,也得到了很多教训和经验,不敢独享,觉得还是分享一下吧,给有需要的指指道,希望能少走弯路。
先不多说,正文如下:
大家看好了,我写的是企业进口细胞株,不是针对高校或者别的什么科研机构,因为到目前为止国家还没有一个正式的文件去指导企业进口细胞株,只有一个过渡性文件,因此各地操作时也有些不同,除了北京、上海、广东等一些发达的地方有操作程序,其他地方由于企业进口细胞株的案例很少,因此很麻烦的(比如黑龙江,我们最后都找到省卫生厅厅长了)。
首先,你们公司如果选择购买一个国外的细胞株,最先考虑的是付款问题,你得找一家进出口代理公司,帮你操作,这个都是比较常规的,另外你最好再找一家在北京或者上海的公司帮助清关。这里有涉及到“进口代理协议”和“供货合同,我们当时是签了一个三方合同”,这里一定要注意和国外沟通好,需要进口的细胞株的名称、数量、价值等等,后期发货的时候千万不要不一致。
因为细胞株是特殊物品,需要从省卫生厅那里拿到一个“医用特殊物品准出入境证明”,这个东西很难搞的(高校或科研机构容易一些,基本上都有程序),尤其是一些没有先例的省份(领导不敢批,怕担事),我们公司就是黑龙江的先例,这个东西不知道怎么办的到时候可以找我私聊。搞这个东西的正常周期是2-3周,请注意,一定要把准出入境的有效时间尽量写长一点,还有就是主送单位一定要你所清关的口岸的检疫局,例如北京口岸入境,就写北京出入境检验检疫局。当时没人提醒我,这两个我都搞错过,结果多跑了几次,我们的国家服务人员态度一次比一次差,快气死了,不过后来还是搞到了。
拿到“医用特殊物品准出入境证明”以后,预付款也打了,国外准备要发货了,这之前还要一个“特殊物品入境审批单”,这个需要到你所清关的口岸的检疫局搞,下面以北京出入境检验检疫局为例,这个东西要是你是外地的(非清关所在口岸)是搞不到的,你得先去北京出入境检验检疫局备案(就是公司证照原件,情况说明,单位说明等等,比较好办),然后在你细胞株进口之前2-3周申请(1周能批,有效期3个月)。我当时是委托北京一家公司办的,因为你自己办是不方便的,到时候审批单还要亲自去取,外地的很麻烦。
箱单、发票就不说了
接下来是运输,细胞株一般都用干冰运输,当然也可以选择液氮,不过价钱不一样,液氮要比干冰贵40%左右。要计算好运输过程中干冰损失量,量要足够,最好放一个温度记录仪,如果你没有把握,在货物到港清关之前,也可以加干冰的,就比较贵,单次1000元左右。发货之前一定和发货方、运输公司沟通好,标签和数量一定要准入证明和审批单一致,要不然清关很麻烦的,我再次犯了一个错误。
最后就是清关了,这里一定要注意,你找的清关公司的清关能力一定强,一定是做过冷链清关的。
总结一下:
程序是:签合同,找进口代理和清关公司,办理相关证明文件,选择冷了运输公司,运输,清关。
文件:合同、代理协议、医用特殊物品准出入境证明、特殊物品入境审批单、发票、箱单等。
另外,这里面还有不少细节,我就不一一说了,如果真有这方面运输的,可以找我。
版主horizon801留言:
谢谢分享
潜血表示分解的红细胞,不作为诊断疾病的标准。有些潜血是因为长时间激烈运动引起的,当然多数是由泌尿系统疾病引起,2%的血尿由全身性疾病或泌尿系统邻近器官病变所致。病因非常之多。所以尿检潜血必须做一个镜检,就是在显微镜下对尿液中的红细胞进行观观查。主要是数目和形态。镜检红细胞的个数,如不超过3个/HP,即是正常的。平时多饮水,注意休息,就行了。如果超过3个就要看形态。如果是多形型,也就是说,尿中红细胞不是球型的而是扁的,长的,而且,变形红细胞80%以上,常提示为肾小球性血尿,就是说肾脏有问题了。若结果为均一型,变形红细胞20%以下,常提示为非肾小球性血尿。也就是说即使尿中红细胞数多于8个,一般是肾下泌尿系损害引起的。潜血的情况比较复杂,尽快做个镜检。
请教各位:
目前想建立家系血标本的淋巴细胞的永生化细胞株,请问有哪些成熟的方法及protol,费用贵么?
相关疾病:心力衰竭范可尼贫血心肌梗死癌症mRFP-EGFP-LC3稳转细胞株构建质粒来源:Addgene#21074(载体pEGFP...
稳转细胞株构建123
l小呆2016-01-21
现在准备构建两株细胞的稳转细胞系,进行了一点实验,其中一株细胞在筛选过程中几乎都死光了,另一株目前还好,有几个问题想请教一下园子里的高手,还请给位给点建议。
G418浓度之前师兄已经摸索出来,这次筛选直接用师兄浓度。
1、6孔板转染后多长时间开始进行G418筛选?
2、G418筛选是在6孔板中继续筛选还是转到24/96孔?大皿?
3、G418浓度什么时候减量
4、?筛选过程中荧光观察一小部分克隆不错,如何挑选出来?
5、整个筛选过程大约需要多长时间?
lipo3000筛选
谢谢大家!
我是入职体检的报告单上的,会不会影响公司对我的录取啊,我是景观公司的,网上说是有轻度的泌尿系感染,影响不大吧应该。。
相关疾病:卵巢癌各位大大:本人需要作卵巢癌细胞株ovcar-3的培养,有哪位前辈有做过这方面工作的能否指导一下,有没...
小弟,近期开始培养乳腺癌细胞,导师让了解一下咯细胞株的特性,在网上百度了一下,找不全。MDA-MB-231,MDA-MB-468,MDA-MB-435,SKBR3,MCF-7......只百度出MCF-7是ER(+),PR(+),Her-2(-)
希望有大神赐教!谢谢!
我一直在养肝癌细胞株HepG2,用的是10%小牛血清和1640培养基,开始一个月的时候细胞养的挺好的,可是自从10月8号开始细胞第一次污染,如图所示,细胞间隙间有很多小黑点,光学显微镜下没有看到运动,细胞上面好像雾蒙蒙的很模糊的一层流沙样的,每次发现后细胞全部丢弃。重新复苏,复苏后的前几天细胞看着还可以,小黑点非常非常少,基本没有,在第5天第一次传代,第6天后细胞长满,再次传代后第二天(今天)早上观察细胞细胞就如图所示了,培养基没有浑浊,很郁闷!不知道哪位前辈遇到过类似情况,到底是细菌污染还是支原体污染啊?急着做实验啊,希望哪位前辈指导一下,谢谢了!



上皮细胞2是什么意思_有问必答_123
蓝天静海的鱼儿2021-07-21
患者信息:女28岁江西南昌病情描述(发病时间、主要症状等):怀孕34周加四天,检查白细胞镜检是2—5,上皮细胞是2+,请问正常吗?想得到怎样的帮助:怀孕34周加四天,检查白细胞镜检是2—5,上皮细胞是2+,请问正常吗?曾经治疗情况及是否有过敏、遗...
U266人骨髓瘤细胞 培养说明书123
shengminghua蒙蒙2021-07-22
我的u266人多发性骨髓瘤细胞株复苏后常规培养总是生长缓慢或逐渐变少,请问人多发性骨髓瘤细胞株培养的注意事项,有何需要特殊处理吗
患者信息:女24岁江苏南京
病情描述(发病时间、主要症状等):
体检血常规中血小板计数343.血小板比积0.39.
尿检中白细胞计数26.2.上皮细胞计数10.30
心电图下写窦性心律,p-r间期偏短

想得到怎样的帮助:
有没有什么大问题
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