| Overview |  PrinterFriendlyVersion |
| Ex/Em(nm) | None/None |
| MW | N/A |
| CAS# | N/A |
| Solvent | N/A |
| Storage | N2(L) |
| Category | GPCR cAMPGPCRAssays |
| Related |
- CellDensityandStorage
Thecellsarefrozenatadensityof2X106cellsin90%fetalbovineserumand10%(v/v)DMSO.ToinsurethehighestlevelofviABIlity,thawthevialandinitiatethecultureassoonaspossibleuponreceipt.Cellsmustbestoredinliquidnitrogenifnotimmediatelyprocesseduponreceipt. - CellCultureMedium
Basalmedium:Ham’sF12culturemediumcontaining10%fetalbovineserum,2mML-glutamine,100units/mLpenicillin,100µg/mLstreptomycin(Basalmedium).
SelectionMedium:BasalMediumwith200µg/mLhygromycinBand400ug/mLG418. - ThawingandSeedingCells
- PrepareBasalMedium.Prepare37°CWaterBath.Thawcellsrapidlybyremovingfromliquidnitrogen,andimmediatelyimmersingina37°Cwaterbath.Removethevialfromthewaterbathassoonasthecontentsarethawed,andsterilizetheexteriorofthevialwith70%ethanol.Alloftheoperationsfromthispointonshouldbecarriedoutunderstrictasepticconditions.
- Addvialcontentsto25mLcellculturemediuminT75TissueCultureTreatedFlask.Gentlyswirlflaskandplaceinahumidified,tissuecultureincubator,37°C,5%CO2.
- Alllivecellsshouldbeattachedafter18-24hourspost–thaw.ChangeBasalMediumwithSelectionMedium.
- SubcultureandPropagation
- Whencellsareapproximately80%confluent,passagethecells.
- Passagethecells1:10every3-4days,usingTrypsin-EDTAtodissociatethecells.
- Itishighlyrecommendedthatafrozencellbankbeestablishedatlowpassagenumber.
| References&Citations |  CitationExplorer |
ActivationofP2X7andP2Y11purinergicreceptorsinhibitsmigrationandnormalizestumor-derivedendothelialcellsviacAMPsignaling
Authors:DAvanzato,TGenova,AFiorioPla,MBernardini,SBianco,BBussolati,DMancardi,EGiraudo,FMaione,PCassoni
Journal:ScientificReports(2016)
TheM2muscarinicreceptorsareessentialforsignalingintheheartleftventricleduringrestraintstressinmice
Authors:HanaTomankova,PaulinaValuskova,EvaVarejkova,JanaRotkova,JanBenes,JaromirMyslivecek
Journal:Stress(2015)
AAT Bioquest AAT Bioquest是一家位于美国的生物公司，前身为ABD Bioquest，总部位于加利福尼亚州。专门从事光学检测技术十多年，一直致力于光谱学检测领域技术的创新和突破。其独特的光学检测技术，综合了化学、生物学和信息学等各个领域的研究，引领了比色、荧光和发光技术新一代光学探针的浪潮。AAT Bioquest在全球拥有强大的经验丰富的专业分销商网络，为从小型研究机构到《财富》500强企业的各类客户提供卓越的产品和定制服务。
美国AATBioquestInc.(前身是ABDBioquest，Inc.)是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域，包括吸收（颜色），荧光和发光技术。AATBioquest的产品帮助全世界的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学，免疫学，细胞生物学和分子生物学等领域。AATBioquest会不断介绍新产品，快速的丰富各个领域的产品。
1）我们提供反应荧光探针和发光探针，生物素和端粒酶能够应用于标记药物小分子和生物聚合物，如蛋白、核酸以及其他碳水化合物；2）我们研究并生产荧光和发光探针用于检测蛋白，核酸和活细胞。3）我们不断的推出新型的荧光和发光探针用于检测多种酶，特别是检测水解酶和氧化还原酶类；4）我们致力于开发用于信号转导研究的试剂；5）我们提供生理和神经探针，特别是钙离子指示剂和膜电位探针。
作为AATBioquestInc.的中国区域代理，艾美捷科技为中国客户提供光谱学检测领域，包括吸收（颜色），荧光和发光技术等全系列解决方案。我们也将一如既往更加努力为国内用户提供快捷、方便的高质量产品，同时更为您售前售后全面技术支持。
AATBioquest,Inc.(formerlyABDBioquest,Inc.)develops,manufacturesandmarketsbioanalyticalresearchreagentsandkitstoscientistsengagedinlifesciencesresearch,diagnosticR&Danddrugdiscovery.Wespecializeintheareaofphotometricdetectionsincludingabsorption(color),fluorescenceandluminescencetechnologies.TheCompany"sproductsenablescientistsandbiomedicalresearcherstobetterunderstandbiochemistry,immunology,cellBIOLOGyandmolecularbiology.AATBioquestconstantlyintroducesnewproducts,andoffersarapidlyexpandinglistofproductsthataregroupedintoseveralproductlines.
1)Ourreactivefluorescentandluminescentprobes,biotinsandtagenzymesareusedforlabelingsmalldrugmoleculesandbiopolymers,e.g,proteins,nucleicacidsandcarbohydrates;2)Wedevelopfluorescentandluminescentprobesfordetectingproteins,nucleicacidsandlivecells;3)Weconstantlyintroducenovelfluorescentandluminescentprobesfordetectingvariousenzymes,inparticular,hydrolyticandredoxenzymes;4)Wefocusondevelopingreagentsforsignaltransductionresearch;and5)Wealsoofferphysiologicalandneurologicalprobes,e.g.,calciumindicatorsandmembranepotentialprobes.
Besidesthestandardcatalogproductswealsooffercustomservicetomeetyourspecialresearchneeds.Ourcurrentservicesincludecustomsynthesisofcolorimetric,fluorescentandluminescentprobes,customdevelopmentofbiochemical,cell-basedanddiagnosticassaysandcustomscreeningofyourcompoundlibrariesagainstyourdefinedtargetsusingourvalidatedHTSassays.
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G418浓度之前师兄已经摸索出来，这次筛选直接用师兄浓度。
1、6孔板转染后多长时间开始进行G418筛选？
2、G418筛选是在6孔板中继续筛选还是转到24/96孔？大皿？
3、G418浓度什么时候减量
4、？筛选过程中荧光观察一小部分克隆不错，如何挑选出来？
5、整个筛选过程大约需要多长时间？
lipo3000筛选
谢谢大家！
单纯从你这个尿常规结果来看：你的上皮细胞数量在正常女性的尿液中算是正常的，镜检白细胞：15——20个/HP，它表示你的泌尿系统可能存在感染。但是，因为没有你的其他资料和其他检查结果，单凭一个结果不能说明太多问题。一般情况下不可能是肾的不好，请不用担心。
我的建议是：
1、去医院复查，但要注意留尿的时候先清洁外阴，留取中段尿。及时化验。
2、如果检查结果仍然有白细胞，可去妇科或泌尿科看医生，一般的感染的话吃点药马上就好了。
3、放松心情，注意个人卫生即可。
指导意见：
毕竟阴道上皮是鳞状上皮,而输尿管,膀胱,尿道的上皮是柱状上皮,形态上是不一样的.所以您要是对您的结果出怀疑态度,首先：重新留尿,做一个复检（留尿时注意防止阴道分泌物污染）；或者让值班医生分析一下是那种类型的上皮（鳞状还是柱状）.所以不要担心这个结果.一般情况下污染的比较多.
红细胞压积，是指红细胞占血液体积的比例，您仅仅是比参考范围略低，同时红细胞数量，和血红蛋白并没有下降，这可能是血液有所稀释所致。
白细胞计数3.9，正常的话 4-10之间，你仅仅是比参考范围略下降一丁点，本身并无意义，参考范围是大致的。而且血液还可能存在稀释可能性
中性粒细胞绝对值和百分比略低一点，同时淋巴细胞百分比略有上升，那这本身就只是略高一点点，而一般比如感冒以后，也往往可以升高，其他的红细胞分布宽度等是派生指标，没大意义的。
总之单单看这一个血常规检验，本身没有什么大的异常发现，当然也可以稍后复查，比如过2周以后复查
我是厉清，更多医疗知识，请看 厉清就是我 的新浪博客
2：红细胞计数（RBC）（参考值：3.5~5.5），（单位：10^12/L）
3：血红蛋白浓度（HB）（参考值：120~160），（单位：g/L）
4：红细胞压积（HCT）（参考值：40~48），（单位：%）
5：平均红细胞体积（MCV）（参考值：80~97），（单位：fL）
6：平均红细胞血红蛋白含量（MCH）（参考值：26.5~33.5），（单位：pg）
7：平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）（参考值：300~360），（单位：g/L）
8：血小板计数（PLT）（参考值：100~300），（单位：10^9/L）
9：淋巴细胞比值（LY%）（参考值：17~48），（单位：%）
10：单核细胞比例（MONO%）（参考值：4-10），（单位：%）
11：中性粒细胞比例（NEUT%）（参考值：43~76），（单位：%）
12：淋巴细胞计数（LY）（参考值：0.8~4.0），（单位： 10^9/L）
13：单核细胞计数（MONO）（参考值：0.3~0.8），（单位：10^9/L）
14：中性粒细胞计数（NEUT）（参考值：1.2~6.8），（单位：10^9/L）
15：红细胞分布宽度（参考值：11~14.5），（单位：%）
16：血小板体积分布宽度（PDW）（参考值：9~18），（单位：%）
17：平均血小板体积（MPV）（参考值：7．4~12．5），（单位：fL）
18：大血小板比例（P-LCR）（参考值：10~50），（单位：%）
你的第一部分，白细胞和中性粒细胞偏低，说明免疫力低，最近要多保养，不受凉，近期容易生病。不过数据也不是太低的，也不用过于担心，多吃多睡，过一段时间复查，可能会好转为正常。另外消炎药，止痛，退热药尽量不吃，这些药会加重白细胞下降的。
第二部分，最主要的红细胞和血红蛋白是正常的，总体看还是正常的。但是下面数据有点低，而且只低一点，问题不大，多吃点米饭，红枣，肉等，会好转的。
第三部分，血小板部分是正常的。
你这种检查单，最主要的是免疫力低下，注意多吃多睡，别受凉，少烦神少劳累，引起白细胞低的药物尽量不吃。
看到之前的一个朋友也发了IBC会议的PPT内容，不过好像没有这个PPT（不确定，要是重复了请见谅）。
因为会议上投影的问题，当时有些内容贾老师没介绍太多。不过内容相当不错，主要是国内比较缺乏这方面的信息和经验。可以算得上是干货吧，不过里面主要是一些规则性或方向性的内容，需要具体细节，只能花钱请她做顾问了。
AudreyJia是美籍华人，在FDA做CMCReviewer之前也一直是从事细胞开发及细胞培养的工作。她应该也是目前唯一一个生物大分子部门中，唯一从FDA离职出来从事顾问工作的。可能很多国内单抗药企大佬都认识她，可能很多园子里面的人也见过她了。
谁能赏几个积分啊？新人，没积分，一些东西想看或者下载都不行。
版主jackieustc留言:
感谢分享，鼓励新人，我给你打赏，多交流自然有收获！
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